本文關鍵詞：直接灸“肝俞”對HCC癌前病變大鼠T淋巴細胞亞群、NK細胞和IL-2的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本實驗以腹腔注射二乙基亞硝胺(DEN)誘導肝癌癌前病變模型大鼠為研究對象,觀察直接灸與間接灸法刺激模型大鼠肝俞穴后,外周血中T淋巴細胞亞群、NK細胞含量以及IL-2含量的變化,探討灸法對肝癌癌前病變大鼠免疫功能的影響。方法：1.分組與模型建立：將70只雄性Wistar大鼠隨機分為空白組(10只)、肝癌模型組(15只)、直接灸1組(15只)、直接灸2組(15只)以及隔姜灸組(15只),采用腹腔注射二乙基亞硝胺(DEN)法逐步誘導HCC癌前病變模型,為期10周；直接灸1組、直接灸2組造模的同時分別給予直接灸“肝俞”穴3壯/穴、6壯/穴干預,隔日1次；隔姜灸組造模開始的同時運用“肝俞”隔姜灸法進行干預,3壯/穴,隔日1次；空白組不做任何治療。2.指標檢測：運用流式細胞術檢測大鼠外周血中T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、 CD8+含量以及NK細胞含量的變化；采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測各組大鼠血清中IL-2的表達；HE染色觀察大鼠肝臟組織形態(tài)學變化。結果：1.各組大鼠肝臟形態(tài)學變化：在病理改變方面,模型組中央靜脈偏離或缺如,肝索排列紊亂甚至消失,肝血竇狹窄,膠原纖維增生明顯,有結節(jié)形成,細胞大小不均,細胞核深染,異型性高,出現(xiàn)巨核瘤細胞；艾灸各干預組光鏡下癌細胞分化程度高,異型性低,有的可見脂肪變性,細胞炎癥,與模型組比較有一定改善。2.各組大鼠外周血中T淋巴細胞亞群、NK細胞含量變化：(1)與空白組比,模型組CD3+T、CD4+T細胞含量降低(P0.05,P0.01)；與模型組比,直接灸1組CD3+T、CD4+T細胞含量升高(P0.05,P0.01),直接灸2組CD3+T、 CD4+T細胞含量顯著升高(P0.01,P0.01),隔姜灸組CD4+T細胞含量顯著升高(P0.01), CD3+T細胞含量無統(tǒng)計學差異(P0.05)；艾灸干預三組組間比較,差異無統(tǒng)計學意義。(2)與空白組比,模型組CD8+T細胞含量升高(P0.01)；與模型組比,直接灸1、2組和隔姜灸組的含量顯著降低(P0.01,P0.01,P0.01),三組組間比較,差異無統(tǒng)計學意義。(3)與空白組比,模型組CD4+/CD8+比值顯著降低(P0.01)：與模型組比,經(jīng)艾灸干預后三組的CD4+/CD8+比值均顯著升高(P0.01,P0.01,P0.01),三組組間比較,差異無統(tǒng)計學意義。(4)與空白組比,模型組、直接灸1組、隔姜灸組NK含量顯著升高(p0.01,p0.01,p0.05)；與模型組比,直接灸1、2組和隔姜灸組NK含量顯著降低(p0.05,p0.01,p0.01),其中以直接灸2組的降幅最大；與直接灸1組比較,直接灸2組的含量降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.各組大鼠血清中IL-2表達變化：與空白組比,模型組大鼠IL-2表達顯著降低(P0.01),直接灸1組和隔姜灸組大鼠IL-2降低(P0.05,P0.05)；與模型組比,直接灸1、2組和隔姜灸組IL-2血清中的表達有差異(P0.05,P0.01,P0.05)；三組組間比較無差異。結論：1.直接灸和隔姜灸對肝癌癌前病變病理形態(tài)學變化均有改善作用,但兩種灸法對其改善程度未見明顯差異。2.直接灸和隔姜灸肝俞穴均可以提高CD3+、CD4+T細胞含量,下調細胞毒性CD8+T細胞含量,使CD4+、CD8+比值趨于正常范圍,調節(jié)免疫狀態(tài),提高抗腫瘤的免疫功能。3.HCC癌前病變模型大鼠NK細胞含量升高,說明其存在抗腫瘤的自然免疫應答,提高自然免疫應答的充分性可能是直接灸和隔姜灸起效的機制之一。4.HCC癌前病變模型大鼠血清IL-2含量下降,直接灸和隔姜灸肝俞穴有上調IL-2含量的作用,提示提高IL-2的含量可能是直接灸和隔姜灸發(fā)揮抗腫瘤的作用機制之一。綜上所述,灸法干預肝癌癌前病變是有效的,其作用機制可能是通過調節(jié)CD3+、 CD4+T、CD8+T、NK細胞以及IL-2的含量,從而增強抗腫瘤免疫功能,提高免疫監(jiān)視,緩解其病理改變。
【關鍵詞】：白介素-2 灸法 NK細胞 T淋巴細胞亞群 肝癌癌前病變 腫瘤免疫
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R245
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 符號說明11-12
• 第一章 文獻研究12-38
• 綜述一 中醫(yī)藥治療肝癌的研究進展12-21
• 1. 肝癌的病因病機12-13
• 2. 肝癌的辨證論治13-17
• 3. 肝癌的中醫(yī)藥治療展望17-18
• 參考文獻18-21
• 綜述二 灸法防治腫瘤的細胞免疫機制21-29
• 1. 中醫(yī)的“正氣”與免疫的關系21
• 2. 艾灸抗腫瘤的中醫(yī)源流21-22
• 3. 艾灸在腫瘤防治中對細胞免疫的影響22-25
• 4. 小結25-26
• 參考文獻26-29
• 綜述三 免疫系統(tǒng)與腫瘤的相互關系29-38
• 1. 腫瘤微環(huán)境29-30
• 2. 免疫監(jiān)視學說30-32
• 3. 腫瘤逃逸現(xiàn)象32-34
• 4. 小結34-35
• 參考文獻35-38
• 前言38-39
• 第二章 實驗研究 直接灸肝俞對HCC癌前病變大鼠T淋巴細胞亞群、NK細胞和IL-2的影響39-58
• 1. 材料39-40
• 2. 方法40-45
• 3. 結果45-51
• 4. 小結51-52
• 5. 討論52-58
• 結語58-60
• 1. 結論58
• 2. 存在問題與不足58-60
• 參考文獻60-65
• 致謝65-66
• 個人簡歷66

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