【摘要】：研究目的:本實驗研究以“慢性阻塞性肺病呼吸肌疲勞”為切入點,通過“腹針療法”干預慢性阻塞性肺病呼吸肌疲勞大鼠,觀察大鼠血清和膈肌組織線粒體中細胞色素氧化酶(Cytochrome c oxidase,CCO)、還原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(Non-phagocytic cell oxidase,NOX)與琥珀酸脫氫酶(Succinatedehydrogenase,SDH)及腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-a,TNF-α)的活性,探討腹針治療慢性阻塞性肺病呼吸肌疲勞的作用機理,為進一步推廣腹針療法在肺系疾病的臨床應用提供可靠的動物實驗證據。研究方法:挑選體重為180g-220g左右的SD雄性大鼠35只,適應性飼養(yǎng)7日后,按隨機數字表法抽取10只作為空白對照組,其余大鼠均采用煙熏法聯合氣道內兩次注入脂多糖法復制模型。造模周期為30日,造模結束后隨機抽取5只判定大鼠模型成功與否。將造模成功的20只大鼠隨機分成2組,分別為腹針組與模型組,每組10只,并標記序號以便識別。大鼠建立模型方法:實驗研究第1日與第20日向大鼠氣道內注入脂多糖200ug/200ul,于第2日至第19日及第21日至第30日被動吸煙,每日1次,每次10支,每次持續(xù)60min,2次煙熏之間至少休息4個小時。實驗大鼠均飼養(yǎng)于鼠籠中自行飲水、進食,及時清理墊料,保持鼠籠衛(wèi)生。熏煙過程中每3min敲打煙箱1次以避免大鼠出現扎堆現象造成氣道及肺組織內煙霧濃度彌散不均勻。腹針組治療方案為每日基礎治療(吸氧)+針刺關元、氣海、中脘、下脘、雙氣穴、雙滑肉門穴。模型組和空白對照組治療方案均給予基礎干預(吸氧),治療周期為30日,每周觀測大鼠體重、毛發(fā)、飲水、攝食、爪甲、活動度等情況。連續(xù)治療30日后測定大鼠血清和膈肌組織線粒體中細胞色素氧化酶(CCO)、還原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NOX)、琥珀酸脫氫酶(SDH)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的活性。大鼠予以處死后,取大鼠右肺下葉,進行石蠟切片,HE染色,觀察空白對照組、模型組及腹針組大鼠肺組織病理形態(tài)學改變,進行統(tǒng)計分析。研究結果:1、造模結束第31天,從造模大鼠中隨機抽取5只,觀察大鼠一般狀態(tài)、肉眼下肺組織形態(tài)、光鏡下肺組織病理改變,證明大鼠模型復制成功。2、造模成功后將20只大鼠分為腹針組、模型組,每組10只,加上空白對照組共三組,空白對照組大鼠飲水攝食量正常、體重正常、精神狀態(tài)佳、毛發(fā)濃密有光澤,反應靈敏。模型組大鼠出現精神萎靡、弓背、豎毛、毛色晦暗無光澤并有嚴重脫落現象,對一般刺激反應較前敏感甚至出現暴躁,撕咬狀態(tài),熏煙造模過程中可見大鼠口鼻分泌物較多。腹針組大鼠體重、毛發(fā)、飲水攝食、爪甲情況、活動情況等較模型組均有好轉;3、腹針組和模型組大鼠血清、膈肌組織懸液中TNF-α含量較空白對照組均有升高(P0.05),且腹針組與模型組比較顯著降低(P0.05);4、腹針組和模型組大鼠膈肌組織線粒體懸液CCO、NOX與SDH活性較空白對照組顯著降低(P0.05),且腹針組與模型組比較顯著升高(P0.05);5、肺部病理組織顯示:空白對照組大鼠支氣管粘膜上皮纖毛組織排列整齊有序,肺泡組織結構正常,未見肺組織炎癥及肺氣腫表現;模型組大鼠支氣管粘膜細胞變性、壞死或脫落,杯狀細胞顯著增多,上皮纖毛組織雜亂無序,支氣管壁粘膜出現炎性充血、水腫,伴有大量的炎性細胞浸潤,肺泡組織結構異常,大小不一,部分可見肺泡間隔組織斷裂、融合、腔擴大,出現典型肺氣腫的病理表現,病理變化符合慢性阻塞性肺疾病特點;與模型組比較,腹針組病理支氣管粘膜層和粘膜下層炎性細胞的浸潤、粘膜上皮細胞的壞死和脫落,氣道分泌物產生均明顯減少。研究結論:COPD呼吸肌疲勞大鼠血清、膈肌組織線粒體懸液中TNF-α含量較空白對照組升高,CCO、SDH、NOX活性較空白對照組顯著降低,肺組織病理表現為支氣管粘膜上皮變性、壞死、脫落,支氣管壁出現大量炎性細胞浸潤,周圍伴有炎性分泌物。經腹針療法干預后,上述情況可明顯減輕,證明腹針通過降低大鼠血清與膈肌組織線粒體懸液中TNF-α含量,提高CCO、NOX、SDH活性,從而降低大鼠氣道炎癥反應,改善呼吸肌疲勞癥狀,以延緩COPD進一步惡化。本實驗研究從細胞生化角度及炎癥機制闡述了腹針治療COPD呼吸肌疲勞的作用機理,說明腹針療法的有效性與安全性,為進一步推廣腹針療法在肺系疾病的應用提供可靠的動物實驗證據。
[Abstract]:The aim of this study was to observe the 鈥渞espiratory muscle fatigue in chronic obstructive pulmonary disease鈥，

本文編號：2287373