【摘要】：目的:通過建立大鼠坐骨神經鉗夾損傷模型,采用不同頻率(2Hz、100Hz)電針針刺“環(huán)跳”穴,進而比較分析2種電針頻率在坐骨神經損傷修復中的作用差異。從坐骨神經功能指數、神經HE染色證實針刺治療坐骨神經損傷的有效性;從抑制核轉錄因子κB(Nuclear Factor kappa B,NF-κB)信號通路傳導角度出發(fā),以炎性因子白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)為指標,評價針刺對炎癥反應和神經損傷的抑制作用。綜合以上指標,分析不同頻率電針對坐骨神經損傷后炎癥抑制、神經修復的影響及機理。材料與方法:選用SPF級SD大鼠48只,雌雄各半,體重300±50g,7~9周齡,雌雄各半,大鼠購入后于遼寧中醫(yī)藥大學動物實驗中心飼養(yǎng)。飼養(yǎng)1周后,采用隨機數字表法將48只SD大鼠分為空白組、模型組、2Hz組、100Hz組,每組各12只�？瞻捉M:不做任何處理,正常喂養(yǎng),保持其他條件不變;模型組:動物造模成功后,保持其他條件不變,正常喂養(yǎng);2Hz組:造模第8天開始電針干預,針刺“環(huán)跳”穴得氣后,大鼠出現瞬間肌肉震顫、足趾抖動,連接電針儀,選用連續(xù)波,頻率2Hz,電流為1m A,作用強度以針刺部位局部輕微抽動為準,治療時間15min,1次/d,連續(xù)治療14d;100Hz組除電針頻率選擇100Hz外,一切皆同2Hz組。在造模第8天(針刺治療前)和末次治療結束(造模第22天)后,分別對模型組、2Hz組和100Hz組大鼠行坐骨神經功能指數(Sciatic Function Index,SFI)檢測,評價各組大鼠在治療前后的神經肌肉及運動功能恢復情況。末次治療結束(造模第22天)后進行取材,采用過量麻醉法處死大鼠,包括損傷段在內的上下各2mm的坐骨神經組織及L4-5節(jié)段脊髓,分別進行蘇木精-伊紅(HE)染色,采用免疫組織化學法檢測受損神經中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量;用蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測脊髓內NF-κB蛋白的表達水平。最后,將所得結果進行統(tǒng)計分析。結果:1.各組大鼠坐骨神經功能指數結果顯示:造模第8天(針刺治療前),模型組、2Hz組、100Hz組SFI數值均顯著下降,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);造模第22天,經14次針刺治療,2電針組指數雖未回復至正常水平,但相比模型組SFI數值顯著回升(P0.01),且二者比較差異有顯著性統(tǒng)計學意義(P0.01)。說明電針治療可以促進坐骨神經損傷大鼠運動功能的恢復,2Hz組優(yōu)于100Hz組。2.各組大鼠坐骨神經HE染色結果顯示:空白組軸突、雪旺細胞排列整齊,神經纖維連續(xù);模型組神經纖維排列紊亂,雪旺細胞增多、腫脹,軸突、髓鞘崩解;2Hz組較模型組雪旺細胞減少,神經纖維逐漸連續(xù),軸突生長良好;電針100Hz組神經纖維紊亂程度較模型組減輕,雪旺細胞減少,神經纖維數量增多。從病理圖片觀察,2Hz組坐骨神經修復程度優(yōu)于100Hz組。3.各組大鼠受損神經中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的免疫組化結果顯示:免疫組織化學法檢測受損神經中TNF-α、IL-1β、IL-6的陽性表達為棕褐色,主要出現在胞漿內,無著色為陰性表達。與空白組比較,模型組中TNF-α、IL-1β、IL-6陽性表達顯著增加,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);與模型組比較,2電針組中TNF-α、IL-1β、IL-6的陽性表達顯著減少,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);與2Hz組比較,100Hz組TNF-α、IL-1β、IL-6陽性表達偏高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。4.各組大鼠脊髓內NF-κB蛋白的表達結果顯示:與空白組比較,其余3組大鼠脊髓內NF-κB蛋白的表達明顯偏高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);與模型組比較,2Hz組、100Hz組大鼠脊髓內NF-κB蛋白的表達明顯偏低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);與2Hz組比較,100Hz組大鼠脊髓內NF-κB蛋白的表達明顯偏高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。結論:1.電針針刺治療可以促進坐骨神經損傷大鼠受損神經的修復,促進坐骨神經損傷大鼠運動功能的恢復,2Hz優(yōu)于100Hz;2.電針針刺治療可以有效抑制炎癥反應,促進受損神經的修復,2Hz優(yōu)于100Hz;3.電針針刺治療可有效抑制NF-κB信號通路表達,減少炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,利于神經再生和修復,2Hz優(yōu)于100Hz;4.有效抑制NF-κB信號通路表達,減少炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,有效抑制炎癥反應,可能是針刺促進周圍神經損傷功能恢復的作用機制之一。
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【學位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R245
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本文編號：2257489