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紫甘藍(lán)花色苷分離、純化及抗動(dòng)脈硬化效應(yīng)的研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-13 20:10

  紫甘藍(lán)是結(jié)球甘藍(lán)中的一個(gè)變種,又稱(chēng)紅甘藍(lán)。它富含大量的維生素C、維生素E和維生素B,據(jù)測(cè)定,每100g紫甘藍(lán)里含維生素B1、B2各0.04mg、胡蘿卜素0.11mg、維生素C39mg。紫甘藍(lán)中的色素屬于花色苷類(lèi)物質(zhì),研究報(bào)道,花色苷具有抗氧化、降低肝臟及血清中的脂肪含量、抗腫瘤及抗變異、防止體內(nèi)過(guò)氧化等多種生理功能,尤其是在預(yù)防心血管疾病、抗動(dòng)脈硬化方面起重要作用。本論文針對(duì)我國(guó)紫甘藍(lán)資源豐富,而且其富含花色苷的優(yōu)勢(shì),首先研究了紫甘藍(lán)中花色苷的提取和分離、純化,并著重對(duì)其抗氧化活性以及它在預(yù)防動(dòng)脈硬化方面的作用進(jìn)行研究。 首先,采用超聲波溶劑輔助對(duì)紫甘藍(lán)中的花色苷進(jìn)行提取,在單因素的基礎(chǔ)上,,通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化出超聲波溶劑輔助提取紫甘藍(lán)中花色苷的最佳工藝條件為:乙醇濃度65%,提取溫度32℃,提取時(shí)間8min,在此條件下,紫甘藍(lán)花色苷的得率為2.49mg/g。 其次,在對(duì)紫甘藍(lán)花色苷的分離、純化方面,本文采用高速逆流色譜(HSCCC)對(duì)經(jīng)LSA-21大孔樹(shù)脂初步純化的紫甘藍(lán)花色苷進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化,并結(jié)合紫外-可見(jiàn)全掃描和高效液相色譜(HPLC)對(duì)其分離出來(lái)各組分進(jìn)行鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在25℃條件下,流動(dòng)相流速為2mL/min,溶劑系統(tǒng)比例為正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈-水-三氟乙酸=2:2:1:5:0.01時(shí),固定相保留率為56%,分離效果明顯,得到三個(gè)組分,經(jīng)HPLC檢測(cè)其純度分別為76.28%、45.46%、91.46%。 本文還對(duì)紫甘藍(lán)花色苷的體外抗氧化活性做了研究,通過(guò)采用總還原力的測(cè)定、DPPH·自由基的清除率、ABTS~+自由基的清除率、·OH自由基的清除率、O-2·自由基的清除率等五種方法來(lái)測(cè)定花色苷的抗氧化能力,結(jié)果顯示:紫甘藍(lán)花色苷具有很強(qiáng)的體外抗氧化能力,其抗氧化能力隨著濃度的增大而增加,對(duì)DPPH·自由基的清除、ABTS~+自由基以及·OH自由基的清除達(dá)到了很高的水平,尤其是對(duì)ABTS~+自由基的清除能力,在濃度為150mg/L時(shí),清除率達(dá)到了90.48%。 最后,實(shí)驗(yàn)對(duì)紫甘藍(lán)花色苷的體內(nèi)抗氧化活性進(jìn)行了深入的研究。以紫甘藍(lán)花色苷為試驗(yàn)藥物,以辛伐他汀為陽(yáng)性對(duì)照,探討紫甘藍(lán)花色苷抗動(dòng)脈硬化的效應(yīng),通過(guò)各組間血清指標(biāo)的比較及病理切片的觀察,得到如下結(jié)論:紫甘藍(lán)花色苷在一定的劑量的濃度范圍內(nèi)能降低動(dòng)脈硬化兔體內(nèi)的血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量,起到了降血脂的作用,并且其降血脂的能力與花色苷的劑量之間存在明顯的量效關(guān)系,通過(guò)t檢驗(yàn),各指標(biāo)之間均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外,與紫甘藍(lán)花色苷相比,辛伐他汀降血脂的能力更強(qiáng)。

【學(xué)位授予單位】:陜西科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:TS201.2;R96
【目錄】:

文章目錄
摘要
ABSTRACT
目錄
1 緒論
    1.1 花色苷的研究動(dòng)態(tài)
        1.1.1 花色苷的概述
        1.1.2 花色苷的穩(wěn)定性
        1.1.3 花色苷的抗氧化活性
        1.1.4 花色苷的提取與純化
        1.1.5 花色苷的分離、純化
    1.2 紫甘藍(lán)研究概況
        1.2.1 紫甘藍(lán)概述
        1.2.2 國(guó)內(nèi)外對(duì)紫甘藍(lán)的研究
    1.3 動(dòng)脈硬化研究的動(dòng)態(tài)
        1.3.1 國(guó)內(nèi)外動(dòng)脈硬化機(jī)理的研究
        1.3.2 抗 AS 藥物的研究
    1.4 花色苷抗動(dòng)脈硬化的研究進(jìn)展
    1.5 立題背景與意義
    1.6 本文研究的主要內(nèi)容
2 紫甘藍(lán)花色苷的提取
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 提取溫度對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.3.2 提取時(shí)間對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.3.3 超聲功率對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.3.4 乙醇濃度對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.3.5 料液比對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.3.6 響應(yīng)面優(yōu)化
        2.3.7 pH 示差法測(cè)定紫甘藍(lán)花色苷的含量
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 超聲時(shí)間對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.4.2 提取溫度對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.4.3 超聲功率對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.4.4 乙醇濃度對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取效果的影響
        2.4.5 料液比對(duì)紫甘藍(lán)花色苷提取的影響
        2.4.6 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助溶劑法提取紫甘藍(lán)花色苷的工藝
        2.4.7 pH 示差法測(cè)定紫甘藍(lán)花色苷含量
    2.5 本章小結(jié)
3 紫甘藍(lán)花色苷的分離、純化
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        3.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 大孔吸附樹(shù)脂對(duì)紫甘藍(lán)花色苷的純化
        3.3.2 高速逆流色譜(HSCCC)對(duì)紫甘藍(lán)花色苷的分離、鑒定
        3.3.3 紫外-可見(jiàn)全掃描紫甘藍(lán)花色苷
        3.3.4 高效液相色譜(HPLC)的檢測(cè)分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 HSCCC 對(duì)紫甘藍(lán)花色苷的分離、鑒定
        3.4.2 紫外可見(jiàn)全掃描
        3.4.3 高效液相色譜的檢測(cè)
    3.5 本章小結(jié)
4 紫甘藍(lán)花色苷的抗氧化性的研究
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        4.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 總還原力的測(cè)定
        4.3.2 DPPH·清除率的測(cè)定
        4.3.3 ABTS~+自由基的清除
        4.3.4 羥基自由基(·OH)清除率測(cè)定
        4.3.5 超氧自由基(O_2~-·)清除率測(cè)定
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 紫甘藍(lán)花色苷總還原力的測(cè)定
        4.4.2 紫甘藍(lán)花色苷對(duì) DPPH·自由基清除率的影響
        4.4.3 ABTS 法測(cè)定紫甘藍(lán)花色苷的抗氧化能力
        4.4.4 紫甘藍(lán)花色苷對(duì)·OH 清除率的影響
        4.4.5 紫甘藍(lán)花色苷對(duì) O_2~-·清除率的影響
    4.5 本章小結(jié)
5 紫甘藍(lán)花色苷抗動(dòng)脈硬化效應(yīng)的研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        5.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 動(dòng)脈硬化模型的建立
        5.3.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥
        5.3.3 血清指標(biāo)的測(cè)定
        5.3.4 病理切片的觀察
        5.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 兔子體重的變化
        5.4.2 血清生化指標(biāo)的測(cè)定
        5.4.3 病理切片的觀察
    5.5 本章小結(jié)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):222961

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