【摘要】：缺血性腦卒中是腦卒中類疾病中最常見(jiàn)的類型,其發(fā)生過(guò)程具有復(fù)雜的生理、病理機(jī)制。近年來(lái),神經(jīng)血管單元(NVU)概念的提出為缺血性腦卒中的病理機(jī)制及治療策略的研究開(kāi)辟了新的方向,針對(duì)NVU中各結(jié)構(gòu)損傷的多靶向治療方案將對(duì)腦卒中后的神經(jīng)功能恢復(fù)及整體預(yù)后有著更好的影響。頭穴從刺法是于致順教授根據(jù)基礎(chǔ)理論體系,再結(jié)合實(shí)踐中獨(dú)到的臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出來(lái)的一種頭針治療方法,臨床上治療缺血性卒中療效確切,根據(jù)其“場(chǎng)”假說(shuō),頭穴叢刺法對(duì)腦組織具有廣泛的調(diào)節(jié)作用,頭穴叢刺法治療缺血性卒中的作用機(jī)理可能與促進(jìn)神經(jīng)血管單元結(jié)構(gòu)及功能恢復(fù)有關(guān)。神經(jīng)元是NVU的組成部分之一并在其中占主導(dǎo)地位,突觸是神經(jīng)元間或神經(jīng)元與效應(yīng)器細(xì)胞間起神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)作用的部位,對(duì)NVU各組分間的相互聯(lián)系和影響有著重要意義。突觸素(synapsin, SYN)是一種鈣結(jié)合蛋白,其特異性分布于突觸囊泡膜上,缺血性腦卒中后SYN表達(dá)量的回升標(biāo)志著突觸結(jié)構(gòu)及功能的重建,亦標(biāo)志著NVU中神經(jīng)元功能的恢復(fù)。為了驗(yàn)證頭穴叢刺法在缺血性腦卒中的治療作用機(jī)制,本研究設(shè)計(jì)了頭穴叢刺法對(duì)大鼠半暗帶區(qū)突觸素SYN表達(dá)影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課題。目的：觀察頭穴叢刺法對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能評(píng)分和半暗帶區(qū)突觸素SYN陽(yáng)性表達(dá)面積的影響,研究頭穴叢刺法對(duì)缺血性腦卒中后神經(jīng)功能恢復(fù)作用機(jī)制。方法：將54只雄性SD大鼠平均分成頭穴叢刺組(A組),模型組(B組),假手術(shù)組(C組),每組18只大鼠。每組按3個(gè)時(shí)間點(diǎn)(1天、7天、14天)隨機(jī)平均分為3個(gè)子小組,每時(shí)間點(diǎn)每小組6只大鼠。A、B組采用改良線栓法制備MCAO模型,C組僅進(jìn)行假手術(shù)操作。A組大鼠采用頭穴叢刺法,B與C組不予任何治療干預(yù)。按Bederson法對(duì)各組大鼠造模后24h及取材前1h進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分；取材后,大鼠腦組織切片以免疫熒光染色,用熒光顯微鏡尋找半暗帶區(qū),拍攝大鼠腦組織半暗帶區(qū)SYN表達(dá)情況,使用生物圖像分析軟件計(jì)算SYN陽(yáng)性表達(dá)面積百分比。結(jié)果：1.A與B組比較,7天及14天時(shí)神經(jīng)功能評(píng)分均降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)：A組造模后與取材前比較,7天及14天時(shí)神經(jīng)功能評(píng)分降低(P0.05)；B組造模后與取材前比較,14天時(shí)神經(jīng)功能評(píng)分降低(P0.05)；A組與B組比較,7天及14天時(shí),大鼠腦組織半暗帶區(qū)突觸素SYN表達(dá)增加(P0.05)；A組大鼠腦組織半暗帶區(qū)SYN在1天、7天、14天時(shí)表達(dá)量逐漸增加(P0.05);結(jié)論：1.MCAO模型可造成大鼠神經(jīng)功能缺損,降低半暗帶區(qū)突觸素SYN表達(dá)；2.頭穴叢刺法可持續(xù)改善腦缺血大鼠神經(jīng)功能評(píng)分,對(duì)神經(jīng)功能的恢復(fù)有著積極的影響；3.頭穴叢刺法能明顯增加腦缺血大鼠半暗帶區(qū)突觸素SYN表達(dá)水平,促進(jìn)NVU中神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)及功能重建；4.大鼠腦缺血后神經(jīng)功能具有一定自愈性。
[Abstract]:Ischemic stroke is the most common type of stroke disease, and its pathogenesis has complex physiological and pathological mechanisms. In recent years, the concept of neurovascular unit (NVU) has opened up a new direction for the study of pathological mechanism and treatment strategy of ischemic stroke. Multi-target therapy for structural damage in NVU will have a better effect on the recovery of neurological function and overall prognosis after stroke. Scalp acupoint acupuncture is a kind of scalp acupuncture method summarized by Professor Yu Zhishun according to the basic theory system and combined with the unique clinical experience in practice. The therapeutic effect of scalp acupuncture on ischemic stroke is definite. According to its "field" hypothesis, Scalp acupuncture has a wide range of regulatory effects on brain tissue. The mechanism of head acupoint cluster acupuncture in treating ischemic stroke may be related to promoting the recovery of neurovascular unit structure and function. Neuron is one of the components of NVU and plays a leading role in it. Synapse is the site of neural signal transduction between neurons or between neurons and effector cells, which plays an important role in the interrelation and influence of each component of NVU. Synaptophysin (synapsin, SYN) is a calcium binding protein, which is specifically distributed on the synaptic vesicle membrane. The increase of SYN expression after ischemic stroke marks the reconstruction of synaptic structure and function and the recovery of neuronal function in NVU. In order to verify the therapeutic mechanism of cephalic plexus acupuncture on ischemic stroke, this study designed an animal experiment on the effect of scalp cluster acupuncture on synaptophysin SYN expression in the penumbra of rats. Aim: to observe the effect of scalp acupuncture on the neurologic function score and synaptophysin SYN positive area in the penumbra of rats with cerebral ischemia, and to study the mechanism of the recovery of nerve function after ischemic stroke by scalp acupuncture. Methods: 54 male SD rats were divided into three groups: group A (group A), group B (model group) and group C (sham operation group), with 18 rats in each group. Each group was randomly divided into 3 subgroups according to 3 time points (1 day / 7 days / 14 days). At each time point, 6 rats in each group were treated with modified thread embolization method. Group C only performed sham-operation. Group A rats were treated with scalp cluster prick method and group B and C were not treated with any intervention. The nerve function was evaluated by Bederson method at 24 hours after model making and 1 hour before the sample was taken, and the SYN expression in the penumbra of the rat brain tissue was photographed by immunofluorescence staining and fluorescence microscope, and the expression of SYN in the penumbra region of the rat brain tissue was photographed. The area percentage of SYN positive expression was calculated by using biological image analysis software. Results 1. The scores of neurological function in group A were significantly lower than those in group B at day 7 and day 14 (P0.05). The scores of neurological function in group A were significantly lower than those in group A at day 7 and day 14 after modeling (P0.05). The neurologic function scores in group B were significantly lower than those in group B at 14 days after modeling (P0.05). The expression of synaptophysin SYN in the penumbra of rats in group A was significantly higher than that in group B on day 7 and day 14 (P0.05). In group A, the expression of SYN in the penumbra was increased gradually at day 1 and day 14 (P0.05). Conclusion: 1. MCAO model can cause neurologic impairment and decrease the expression of synaptophysin SYN in penumbra. The scalp acupoint cluster method can continuously improve the neurological function score of cerebral ischemia rats and has a positive effect on the recovery of neural function. Cephalic plexus needling can significantly increase the expression of synaptophysin SYN in penumbra of rats with cerebral ischemia and promote the synaptic structure and function reconstruction of neurons in NVU. The neural function of rats after cerebral ischemia has a certain self-healing.
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R245

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本文編號(hào)：2229146