【摘要】：目的：本實驗選用3種不同時長艾灸治療實驗性KOA兔。旨在通過觀察其關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α的含量與關(guān)節(jié)軟骨中Ⅱ型膠原蛋白表達及其mRNA表達水平變化之間的關(guān)系,探討不同時長艾灸治療KOA灸時、效之間的關(guān)系,為艾灸KOA時選擇合適的灸治時長提供實驗依據(jù)。方法：選用50只日本大耳白兔,雌雄各半,體重2.5±0.25 kg。將實驗動物隨機分為空白組、模型組、10min治療組、20min治療組和40min治療組,每組10只。模型組、10min治療組、20min治療組和40min治療組的實驗兔,采用右側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入木瓜蛋白酶溶液的方法復(fù)制實驗性KOA模型,空白組右膝注入0.5ml的生理鹽水。造模后取3個艾灸治療組的“內(nèi)膝眼”、“外膝眼”穴位進行治療。l0min治療組、20min治療組和40min治療組每天治療一次,5次為一療程,療程之間間隔2天,一共治療4個療程。治療結(jié)束后取各組動物右側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨內(nèi)側(cè)髁的軟骨和滑膜及相關(guān)周圍組織,用HE染色法和Masson染色法進病理形態(tài)學分析,用免疫組化法測定Ⅱ型膠原蛋白表達水平,用RT-PCR方法檢測Ⅱ型膠原mRNA表達水平；抽取各組動物右側(cè)膝關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)液,用Elisa法檢測IL-1β、TNF-α的含量。實驗過程中所得數(shù)據(jù)采用SPSS21.0進行單因素方差分析的統(tǒng)計學分析,組間比較采用LSD,數(shù)據(jù)都用“均數(shù)±標準差”來表示,P0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)果：1.HE染色：與空白組比較,模型組均呈明顯的炎癥細胞浸潤；與模型組比較,10min、20min和40min組中明顯的炎癥細胞浸潤標本顯著減少；10min、 20min和40min組比較,以40min組少量炎癥細胞浸潤的標本顯著多于其他兩組；l0min組和20min組無顯著差異。2. Masson染色的OD值：與空白組比較,模型組經(jīng)Masson染色后測得OD值顯著下降(p0.01)；與模型組比較,10min、20min和40min組OD值顯著升高(p0.05); 10min、20min和40min組比較,40min組的OD值升高較其他兩組更顯著(p0.01)；與l0min組比較,20min組無統(tǒng)計學差異(p0.05)。3.關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α含量的檢測：與空白組比較,模型組關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α含量顯著升高(p0.01)；與模型組比較,10min、20min和40min組關(guān)節(jié)液中的IL-1β、TNF-α含量顯著降低(p0.01)；10min、20min和40min組相比較,40min組降低IL-1β、TNF-α含量較其他兩組更加顯著(p0.01)。4.關(guān)節(jié)軟骨中Ⅱ型膠原蛋白表達及其mRNA表達水平檢測：與空白組比較,模型組中Ⅱ型膠原蛋白表達及其mRNA表達水平顯著降低(p0.01)；與模型組比較,10min、20min和40min組中Ⅱ型膠原蛋白表達及其mRNA表達水平顯著升高(p0.05);10min,20min和40min組比較,40min組中的Ⅱ型膠原蛋白表達及其mRNA表達水平較其他兩組更加顯著(p0.05)；與l0min組比較,20min組無統(tǒng)計學差異(p0.05)。結(jié)論：1、本實驗采用向兔的膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射木瓜蛋白酶溶液的方法可以成功復(fù)制實驗性KOA模型。2.在KOA的病理發(fā)展中,滑膜的炎癥浸潤是加速軟骨基質(zhì)分解,破壞關(guān)節(jié)軟骨的重要因素。3、10min、20min和40min艾灸“內(nèi)膝眼”、“外膝眼”穴,通過降低實驗性KOA兔關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α含量,以控制滑膜的炎癥浸潤,增加Ⅱ型膠原蛋白表達及其mRNA表達水平,延緩關(guān)節(jié)軟骨的退變。以40min組最為顯著。
[Abstract]:Objective:To observe the relationship between the content of IL-1 beta and TNF-a in the joint fluid and the expression of type II collagen protein and its mRNA in the articular cartilage of experimental KOA rabbits treated with Moxibustion of three different time lengths, and to explore the relationship between the effects of moxibustion of different time lengths on the treatment of KOA rabbits. Methods: Fifty Japanese white rabbits were randomly divided into blank group, model group, 10 min treatment group, 20 min treatment group and 40 min treatment group with 10 rabbits in each group. The experimental KOA model was duplicated by intracavitary injection of papain. The blank group was injected 0.5ml saline into the right knee. After modeling, the "inner knee eye" and "outer knee eye" acupoints of three moxibustion treatment groups were treated. The treatment group was treated for l0 minutes, the treatment group for 20 minutes and the treatment group for 40 minutes once a day, five times a course of treatment, with an interval of 2 days. The cartilage and synovium of the medial femoral condyle of the right knee joint and the adjacent tissues were taken out after 4 courses of treatment. The pathological morphology was analyzed by HE staining and Masson staining. The expression of type II collagen protein was detected by immunohistochemistry. The expression of type II collagen mRNA was detected by RT-PCR. The contents of IL-1beta and TNF-alpha in the joint fluid of the right knee joint were detected by Elisa method.The data obtained during the experiment were analyzed by SPSS21.0 and LSD was used for comparison among groups.The data were expressed by mean (+standard deviation) and P 0.05 respectively. Compared with the model group, the inflammatory cell infiltration in the model group was obvious; compared with the model group, the obvious inflammatory cell infiltration in the 10 minutes, 20 minutes and 40 minutes group was significantly reduced; compared with the 10 minutes, 20 minutes and 40 minutes group, the small amount of inflammatory cell infiltration in the 40 minutes group was significantly more than the other two groups; there was no significant difference between the l0 minutes group and 20 minutes group.2. Masson staining. OD value: Compared with the blank group, the OD value of the model group decreased significantly after Masson staining (p0.01); compared with the model group, the OD value of the 10 min, 20 min and 40 min group increased significantly (p0.05); compared with the 10 min, 20 min and 40 min group, the OD value of the 40 min group increased more significantly than the other two groups (p0.01); compared with the l0 min group, 20 min group had no statistical difference (p0.05). 3. Detection of IL-1beta and TNF-alpha in synovial fluid: Compared with the blank group, the levels of IL-1beta and TNF-alpha in the synovial fluid of the model group increased significantly (p0.01); Compared with the model group, the levels of IL-1beta and TNF-alpha in the synovial fluid of the 10 min, 20 min and 40 min groups decreased significantly (p0.01); Compared with the other two groups, the levels of IL-1beta and TNF-alpha in the 40 min group decreased significantly (p0.01). Detection of type II collagen protein expression and its mRNA expression level in articular cartilage: Compared with the blank group, the expression level of type II collagen protein and its mRNA in the model group was significantly lower (p0.01); compared with the model group, the expression level of type II collagen protein and its mRNA in the 10 min, 20 min and 40 min groups were significantly higher (p0.05). Compared with the other two groups, the expression of collagen type II protein and its mRNA in the 40-minute group were more significant (p0.05); there was no significant difference between the 20-minute group and the l0-minute group (p0.05). Conclusion: 1. The experimental KOA model could be successfully reproduced by intraarticular injection of papain into the knee joint of rabbits. Type 2. Inflammatory infiltration of synovium is an important factor in accelerating cartilage matrix decomposition and destroying articular cartilage during the pathological development of KOA. Moxibustion at "inner knee eye" and "outer knee eye" points for 3, 10, 20 and 40 minutes can control the inflammatory infiltration of synovium, increase the expression of type II collagen protein and decrease the content of IL-1beta and TNF-alpha in the joint fluid of experimental KOA rabbits. The expression level of mRNA delayed the degeneration of articular cartilage, the most significant in group 40min.
【學位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R245.81

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊玉紅;亢靈芝;;莫高艾灸法治療產(chǎn)后痹證256例[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學專業(yè));2010年23期

2 龔亞莉;;艾灸法 從中醫(yī)來,向萬家去[J];醫(yī)學美學美容(財智);2011年08期

3 單桂敏;;上班族的艾灸法[J];中華養(yǎng)生保健;2011年01期

4 胡先明;艾灸法在兒童防病保健中的體會[J];針灸臨床雜志;2005年04期

5 羅子華;;艾灸減輕血栓閉塞性脈管炎疼痛的臨床觀察[J];護理研究;2007年19期

6 岳全;孫云芳;;固定式艾灸盒的制作及應(yīng)用[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2008年08期

7 陳伊;張慶;;腧穴熱敏化艾灸法治療慢性非細菌性前列腺炎的臨床觀察[J];現(xiàn)代診斷與治療;2008年05期

8 陳光;陳玉瓊;劉曉琴;劉煥蘋;廖紹彬;;改良艾灸法應(yīng)用于小兒輪狀病毒腸炎的護理體會[J];四川醫(yī)學;2011年03期

9 林紹瓊;劉艷;黃鶯;康碧;廖述霞;;改良艾灸法治療小兒輪狀病毒腸炎臨床分析[J];四川中醫(yī);2012年02期

10 田永明;范明文;江瑜;;艾灸防治化療惡心嘔吐58例[J];光明中醫(yī);2012年10期

相關(guān)會議論文 前10條

1 林穎;;艾灸在美容方面的運用[A];中華中醫(yī)藥學會中醫(yī)美容分會學術(shù)年會論文集[C];2009年

2 馮玉俊;;近來年艾灸在臨床應(yīng)用及進展[A];中國針灸學會臨床分會第八次學術(shù)大會論文集[C];2000年

3 田紅梅;;艾灸減輕痹癥疼痛的治療與護理[A];2012年河南省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合護理學術(shù)交流會論文集[C];2012年

4 陳秀敏;;艾滋病腹瀉的艾灸應(yīng)用及護理觀察[A];中華中醫(yī)藥學會防治艾滋病分會第六屆學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

5 韓慧;李杰;;艾灸法治驗案五則[A];第十五屆針灸對機體功能的調(diào)節(jié)機制及針灸臨床獨特經(jīng)驗研討會暨第十一屆針灸經(jīng)絡(luò)學術(shù)研討會會議論文集[C];2010年

6 陳秀敏;劉靜靜;田愛玲;;艾滋病腹瀉的艾灸應(yīng)用及護理觀察[A];河南省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合護理暨中西醫(yī)骨傷護理研討觀摩交流會議論文集[C];2009年

7 崔瑾;謝小硯;胡瑩;孔露;;耳壓、艾灸預(yù)防肛腸病術(shù)后尿潴留200例臨床研究[A];全國第16屆針灸臨床學術(shù)研討會、全國第11屆耳穴診治學術(shù)研討會、當代臨床治驗論壇暨中西部十省區(qū)學術(shù)研討會論文集[C];2008年

8 吳中朝;陳仲杰;;艾灸祛瘀凈血治未病臨床多層面效應(yīng)研究[A];中國針灸學會2009學術(shù)年會論文集（上集）[C];2009年

9 郭麗霞;;腧穴熱敏化艾灸緩解胸部術(shù)后疼痛效果觀察[A];全國中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合護理學術(shù)交流會議論文匯編[C];2011年

10 華金雙;;淺談艾灸的作用機理[A];全國第16屆針灸臨床學術(shù)研討會、全國第11屆耳穴診治學術(shù)研討會、當代臨床治驗論壇暨中西部十省區(qū)學術(shù)研討會論文集[C];2008年

相關(guān)重要報紙文章 前9條

1 山西省洪洞縣中醫(yī)醫(yī)院針灸科 蔡曉剛;拯救艾灸先研究艾煙[N];健康報;2010年

2 山西省洪洞縣中醫(yī)醫(yī)院 蔡曉剛;傳承艾灸要研究艾煙安全性[N];中國中醫(yī)藥報;2010年

3 李正安;艾灸自我保健三法[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

4 王繼珍;艾灸強壯胃氣[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

5 身體周刊記者 肖蓓　許珈 汪錫卿;無病自灸[N];東方早報;2012年

6 本報記者 李永紅;艾灸穴位補腎陽[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2005年

7 劉建英（主治醫(yī)師）;實用簡方防流感[N];上海中醫(yī)藥報;2006年

8 本報記者 王晶;喚醒身體的健康密碼[N];人民政協(xié)報;2011年

9 段煦;理血避穢的艾[N];健康報;2006年

相關(guān)博士學位論文 前8條

1 楊佳;艾灸調(diào)控APOE~(-/-)動脈硬化小鼠的血小板活化及其嘌呤能受體信號轉(zhuǎn)導的作用機制研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2016年

2 彭亮;艾灸預(yù)處理對神經(jīng)通路切斷/損毀術(shù)后大鼠胃黏膜保護作用機制的研究[D];湖南中醫(yī)藥大學;2012年

3 崔瑩雪;艾灸及艾煙對ApoE~(-/-)小鼠動脈粥樣硬化膽固醇代謝和炎性反應(yīng)的影響[D];北京中醫(yī)藥大學;2014年

4 雷毅軍;基于PAR/TFF介導的ERK信號轉(zhuǎn)導途徑研究艾灸預(yù)處理對急性胃黏膜損傷的保護機制[D];湖南中醫(yī)藥大學;2015年

5 郁潔;艾灸通過誘導熱休克蛋白70表達抑制大鼠胃黏膜細胞凋亡線粒體信號轉(zhuǎn)導途徑的研究[D];湖南中醫(yī)藥大學;2008年

6 戚曙光;不同年份蘄艾的理化效應(yīng)差異研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

7 彭艷;艾灸健脾作用及其與腸上皮細胞線粒體結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)性的實驗研究[D];湖南中醫(yī)藥大學;2011年

8 張麗束;艾灸對氣虛血瘀型慢性粒細胞白血病骨髓白細胞染色體和細胞免疫調(diào)節(jié)的影響[D];南京中醫(yī)藥大學;2004年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 李眾毅;艾灸紅外治療床治療腰肌勞損病的臨床對照研究[D];河南中醫(yī)學院;2015年

2 周艷;基于“疏通肺絡(luò)法”研究艾灸對肺纖維化大鼠上皮細胞-間質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化機制的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2015年

3 張斐;腹部艾灸配合針刺治療虛證型中心性肥胖癥的臨床研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2015年

4 張偉;艾灸不同穴對寒凝證類痛經(jīng)大鼠子宮等體表紅外溫度的影響[D];北京中醫(yī)藥大學;2016年

5 哈略;艾灸對動脈粥樣硬化小鼠炎性因子及MMP-9作用的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2016年

6 陳楙如;艾灸神闕穴治療寒凝血瘀型原發(fā)性痛經(jīng)的實驗和臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2016年

7 閆穎;穴位艾灸預(yù)防子宮收縮乏力導致產(chǎn)后后出血的臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2016年

8 施睿;TRPV1介導的艾灸血管效應(yīng)的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2016年

9 李梅;艾灸神闕穴對高脂血癥小鼠調(diào)脂控炎的效應(yīng)研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2016年

10 何海明;艾灸法對哮喘大鼠模型外周血CD4~+、CD8~+T細胞及血清IL-1、IL-1Ra的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學;2016年

，

本文編號：2207549