【摘要】：目的探討溫陽利水方含藥血清對特發(fā)性膜性腎病(IMN)脾腎陽虛證足細胞凋亡的作用。方法CCK-8檢測不同濃度脾腎陽虛型IMN患者血清對體外培養(yǎng)小鼠永生化足細胞增殖能力的影響,構(gòu)建脾腎陽虛型IMN血清損傷足細胞體外模型。SPF級大鼠予不同濃度溫陽利水方水提物灌胃,腹主動脈取血,分離血清并滅菌后備用。設(shè)正常對照組、模型組、低、中、高濃度含藥血清組,溫陽利水方含藥血清與脾腎陽虛型IMN血清損傷足細胞共孵育48 h,qRT-PCR檢測凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bcl-2 mRNA相對表達量。結(jié)果 10%脾腎陽虛型IMN患者血清造成足細胞損傷模型,加入不同濃度溫陽利水方含藥血清共孵育48 h后,Caspase-3 mRNA相對表達量,與正常對照組比較,模型組增多,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義;含藥血清組Caspase-3 mRNA相對表達量無明顯增減。Bcl-2 mRNA相對表達量,與模型組比較,低、中、高濃度含藥血清組Bcl-2 mRNA相對表達量均增加,組間比較,模型組與中、高濃度含藥血清組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);含藥血清組間比較,中、高濃度組Bcl-2mRNA相對表達量均較低濃度組增加,且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);中、高濃度組間,Bcl-2 mRNA相對表達量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論對脾腎陽虛型IMN患者血清損傷足細胞,溫陽利水方含藥血清共孵育48 h,可能通過上調(diào)Bcl-2的水平,發(fā)揮抗凋亡效應(yīng)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Wenyang Lishui prescription on apoptosis of podocyte in idiopathic membranous nephropathy (IMN) with deficiency of spleen and kidney yang. Methods CCK-8 was used to detect the effect of serum of IMN patients with different concentrations of spleen and kidney yang deficiency on the proliferation of immortalized podocytes in vitro. The model of podocyte injury with IMN serum of spleen and kidney yang deficiency type was established in vitro. Rats of grade SPF were perfused with water extract of different concentrations of Wenyangli water prescription, blood was taken from abdominal aorta, serum was separated and sterilized. Normal control group, model group, low, medium and high concentration serum group, Wenyang Lishui prescription drug serum and spleen and kidney yang deficiency type IMN serum injured podocytes were incubated for 48 h to detect the relative expression of apoptosis-related gene Caspase-3 and Bcl-2 mRNA by qRT-PCR. Results the model of podocyte injury was induced by 10% serum of IMN patients with deficiency of spleen and kidney yang. The relative expression of Caspase-3 mRNA was increased in the model group after 48 h incubation with different concentrations of WYLW serum. Compared with the normal control group, the expression of Caspase-3 was increased in the model group. However, there was no significant difference in the relative expression of Caspase-3 mRNA and Bcl-2 mRNA in the drug serum group. Compared with the model group, the relative expression of Bcl-2 mRNA was increased in the low, middle and high concentration groups, and there were significant differences between the two groups, and between the two groups, between the model group and the middle and middle groups, there was no significant difference in the relative expression of Bcl-2 mRNA between the two groups. The relative expression of Bcl-2mRNA in the middle and high concentration groups was significantly higher than that in the low concentration group (P0.01), and the difference was statistically significant (P0.01), the difference was significant (P0.01), and the relative expression of Bcl-2mRNA in the middle and high concentration groups was significantly higher than that in the low concentration group (P0.01). There was significant difference in the relative expression of Bcl-2 mRNA between high concentration groups (P0.01). Conclusion for 48 h, podocyte injury in serum of IMN patients with deficiency of spleen and kidney yang and co-incubation of serum containing Wenyang Lishui prescription for 48 h may play an anti-apoptotic effect by upregulating the level of Bcl-2.
【作者單位】： 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎病科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81373568)
【分類號】：R277.5

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