【摘要】：目的探討穴位埋線對缺血再灌注損傷高脂血癥合并2型糖尿病(ZDF)大鼠心肌保護作用的機制,為臨床治療提供理論依據(jù)。方法 2015年1月—2016年5月選取ZDF大鼠24只,隨機分為對照組、缺血再灌注組、缺血預(yù)處理組和穴位埋線組,每組6只。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后第7天,對照組直接開胸取材,其余3組均結(jié)扎冠狀動脈左前降支,建立缺血再灌注損傷模型。缺血再灌注組缺血30 min,再灌注60 min;缺血預(yù)處理組缺血5 min、再灌注5 min,重復(fù)3次,之后操作同缺血再灌注組;穴位埋線組在適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后第1天,"內(nèi)關(guān)""膻中""心俞"穴進行穴位埋線,之后操作同缺血再灌注組。采用透射電鏡觀察各組ZDF大鼠心肌組織超微結(jié)構(gòu)及自噬水平,Western blotting法檢測心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)、自噬相關(guān)蛋白Beclin-1水平,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法檢測髓過氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平。結(jié)果透射電鏡下對照組線粒體和心肌細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,未見明顯自噬體;缺血再灌注組線粒體和心肌細胞腫脹明顯,細胞膜破裂、內(nèi)容物泄漏,僅見空泡或空腔及少量自噬泡;缺血預(yù)處理組、穴位埋線組與缺血再灌注組相比,心肌細胞超微結(jié)構(gòu)損傷較輕,且自噬泡數(shù)量明顯增多;缺血再灌注組心肌細胞超微結(jié)構(gòu)破壞最為嚴重,且未見明顯自噬泡。缺血再灌注組、缺血預(yù)處理組、穴位埋線組GRP78、Beclin-1、MPO、MDA水平高于對照組(P0.05);缺血預(yù)處理組、穴位埋線組GRP78、Beclin-1水平高于缺血再灌注組,但MPO、MDA水平低于缺血再灌注組(P0.05)。結(jié)論穴位埋線可能通過促進GRP78、Beclin-1水平升高,進而起到對再灌注損傷心肌的保護作用。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of catgut embedding at acupoints on myocardial protection of hyperlipidemic rats with type 2 diabetes mellitus (ZDF) after ischemia-reperfusion injury, and to provide theoretical basis for clinical treatment. Methods from January 2015 to May 2016, 24 ZDF rats were randomly divided into three groups: control group, ischemia reperfusion group, ischemic preconditioning group and acupoint catgut embedding group with 6 rats in each group. On the 7th day after adaptive feeding, the patients in the control group were directly thoracotomy and the other three groups were ligating the left anterior descending branch of coronary artery to establish the model of ischemia reperfusion injury. The rats in the ischemia reperfusion group were subjected to ischemia for 30 minutes and reperfusion for 60 minutes, the ischemic preconditioning group for 5 minutes and the reperfusion group for 5 min, repeated for 3 times, and then operated the same as the ischemic reperfusion group. On the first day after adaptive feeding for 1 week, the acupoints of "Neiguan" Shanzhong "and" Xinshu "were treated with catgut embedding at the acupoint, and then operated the same as the ischemia-reperfusion group. The ultrastructure and autophagy level of myocardial tissue were observed by transmission electron microscope (TEM) in ZDF rats. The levels of glucose-regulated protein 78 (GRP78) and autophagy associated protein Beclin-1 (Beclin-1) were detected by Western blotting method. The level of malondialdehyde (MDA) of myeloperoxidase (MPO),) was detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Results the morphology and structure of mitochondria and cardiomyocytes in the control group were normal under transmission electron microscope, and no autophagy was found in the control group, while in the ischemia reperfusion group, the mitochondria and myocardial cells were swollen, the cell membrane was ruptured, and the contents were leaking. Only cavitation or cavity and a small amount of autophagy were found in the ischemic preconditioning group and acupoint embedding group compared with the ischemia-reperfusion group the ultrastructural damage of myocardial cells was lighter and the number of autophagy was significantly increased. Myocardial ultrastructure damage was the most serious in ischemia reperfusion group, and no obvious autophagy was found. The MDA level of GRP78 Beclin-1 MPOO in ischemic preconditioning group, ischemic preconditioning group and acupoint embedding group was higher than that in control group (P0.05); in ischemic preconditioning group, GRP78 Beclin-1 level was higher than that in ischemia reperfusion group, but MPOO MDA level was lower than that in ischemia reperfusion group (P0.05). Conclusion Acupoint catgut implantation may protect myocardium from reperfusion injury by promoting the elevation of GRP78 and Beclin-1 levels.
【作者單位】： 江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院針灸科;江蘇大學(xué)職工醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目(81303037)
【分類號】：R245

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本文編號：2184219