發(fā)布時(shí)間：2018-04-12 22:24

  本文選題：腸泰 + 結(jié)直腸癌��； 參考：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的：腸泰是江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院治療結(jié)直腸癌的經(jīng)驗(yàn)方。本文通過3PLC對腸泰進(jìn)行質(zhì)量控制;建立異位移植瘤動物模型,研究腸泰對人結(jié)直腸癌HT-29細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制作用并探索其機(jī)制。方法：1)采用HPLC方法對腸泰進(jìn)行質(zhì)量控制。2)采用異位移植瘤動物模型,研究腸泰對人結(jié)直腸癌HT-29細(xì)胞裸鼠體內(nèi)異位移植瘤生長的影響,檢測經(jīng)不同濃度的腸泰作用后裸鼠體內(nèi)腫瘤的體積大小及生長情況；采用一步法TUNEL檢測荷瘤小鼠不同濃度腸泰作用下腫瘤組織凋亡水平。3)提取人結(jié)直腸癌HT-29細(xì)胞荷瘤小鼠腫瘤蛋白,采用Western-Blot技術(shù),檢測腫瘤細(xì)胞中Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、PARP、Cleaved PARP、 Bcl-XL、Bax、LC3 Ⅰ、LC3 Ⅱ的蛋白表達(dá)水平,評估腫瘤細(xì)胞凋亡、自噬情況。結(jié)果：1)采用外標(biāo)一點(diǎn)法,分析出腸泰中人參皂苷Rg1、苦參堿、人參皂苷Rb1、黃芪甲苷、阿魏酸和毛蕊異黃酮苷的含量分別為0.273、0.457、0.492、0.791、0.008、0.166mg/g生藥量。2)腸泰能夠顯著抑制裸鼠異位移植瘤的生長,且隨藥物濃度增高抑瘤率明顯增高；TUNEL檢測隨藥物濃度增高,移植瘤腫瘤細(xì)胞凋亡程度增高。3)腸泰能夠激活Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3和PARP,增加促凋亡因子Bax的表達(dá),抑制抗凋亡因子Bcl-XL的表達(dá)；同時(shí)可增加自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ的表達(dá),并呈濃度依賴性。結(jié)論：1)可采用HPLC法對腸泰進(jìn)行質(zhì)量控制,質(zhì)控成分為人參皂苷Rg1、苦參堿、人參皂苷Rb1、黃芪甲苷、阿魏酸和毛蕊異黃酮苷,其含量分別為0.273、0.457、0.492、0.791、0.008、0.166 mg/g生藥量；2)腸泰能抑制人結(jié)直腸癌HT-29細(xì)胞裸鼠移植瘤的生長,促進(jìn)移植瘤腫瘤細(xì)胞凋亡；3)腸泰通過誘導(dǎo)HT_29移植瘤細(xì)胞發(fā)生自噬和凋亡來抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。
[Abstract]:Objective: Changtai is the experience of hospital treatment of colorectal cancer combined with Chinese and Western medicine in Jiangsu province. This thesis uses 3PLC to control the quality of Changtai; heterotopic transplantation tumor animal model, inhibition of Changtai on human colorectal cancer HT-29 cells in nude mice and explore its mechanism. Methods: 1) by using HPLC method quality control of.2 of Changtai) using xenograft animal model of Changtai of node influence the growth of colorectal cancer cells HT-29 in nude mice xenograft tumor, detection of the size and growth of different concentrations of Changtai after in vivo tumor; by one-step TUNEL.3 levels of apoptosis in tumor tissue was detected in tumor bearing mice under the action of different concentration of Changtai) extraction of human colon tumor bearing mice colorectal cancer cells HT-29 protein, using Western-Blot technology, detection of Cleaved Caspase-9 in tumor cells, Cleaved, Caspase-3, PARP, C Leaved PARP, Bcl-XL, Bax, LC3 I, the expression level of LC3 II protein, apoptosis, evaluation of autophagy in tumor cells. Results: 1) by using one point external standard method, analysis of intestinal Thailand matrine, ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1, astragaloside and ferulic acid and calycosin glycoside were 0.273,0.457,0.492,0.791,0.008,0.166mg/g crude drug.2) Changtai can significantly inhibit the growth of xenograft tumor in nude mice, and the inhibition rate increased with the drug concentration increased significantly; TUNEL detection with the drug concentration increased, xenograft tumor cell apoptosis increased.3) Changtai can activate Cleaved Caspase-9, Cleaved Caspase-3 and PARP, increase the expression of Pro apoptotic factor Bax the expression of anti apoptosis factor Bcl-XL; at the same time can increase the expression of autophagy related protein LC3 II, which was dose-dependent. Conclusion: 1) can be used to control the quality of Changtai by HPLC method, quality control Composition of matrine, ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1, astragaloside and ferulic acid and campanulin, their contents were 0.273,0.457,0.492,0.791,0.008,0.166 mg/g crude drug; 2) inhibition of intestinal Tienam HT-29 human colorectal cancer cell growth in nude mice, promote the apoptosis of tumor cell transplantation; 3) Changtai to inhibit tumor cell proliferation by inducing tumor cell transplantation HT_29 autophagy and apoptosis.

【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R273

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本文編號：1741705