本文選題：阿是穴　切入點(diǎn)：電針　出處：《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：骨骼肌損傷約肌肉骨骼系統(tǒng)損傷占60-67%,其中最常見的損傷類型是鈍挫傷,嚴(yán)重影響人們正常生活質(zhì)量。骨骼肌損傷后隨著肌衛(wèi)星細(xì)胞的激活、增殖、遷移以及分化,多數(shù)骨骼肌損傷都能得到不同程度的修復(fù)。然而骨骼肌損傷并不能達(dá)到完全再生,除了因?yàn)槌衫w維細(xì)胞增生導(dǎo)致的過度纖維化之外,就是再生的骨骼肌不能得到神經(jīng)再支配,導(dǎo)致肌肉功能不能完全恢復(fù)。失神經(jīng)支配不但使衛(wèi)星細(xì)胞的功能下降、血管床構(gòu)造異常、誘發(fā)細(xì)胞凋亡,還能影響與骨骼肌再生相關(guān)的調(diào)控因子的功能,從而導(dǎo)致骨骼肌萎縮等不能形成有效的再生,失神經(jīng)支配的骨骼肌無論是在肌纖維的數(shù)量、體積還是功能上都有明顯異常,因此對于骨骼肌損傷的有效治療都應(yīng)立足于最終恢復(fù)神經(jīng)支配。再生肌肉神經(jīng)系統(tǒng)的功能恢復(fù)最終要依賴神經(jīng)肌肉接頭(Neuromuscular junction, NMJ)的再生與重建,因此NMJ的功能狀態(tài)常作為反映骨骼肌的生理功能的重要指標(biāo)。我們前期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),同時(shí)電針足三里和阿是穴能夠有效改善鈍器傷骨骼肌微循環(huán)灌注、激發(fā)線粒體和肌質(zhì)網(wǎng)的功能狀態(tài)和促進(jìn)肌原纖維結(jié)構(gòu)恢復(fù),還可以促進(jìn)骨骼肌損傷后骨骼肌表面肌電圖、神經(jīng)傳導(dǎo)速度等骨骼肌功能指標(biāo)的恢復(fù),而這種修復(fù)很可能與NMJ的重建有關(guān),然而有關(guān)電針對NMJ的修復(fù)重建的影響尚不清楚。另外,根據(jù)中醫(yī)理論中不同穴位功能主治的特異性,要求我們根據(jù)了解各穴位在促進(jìn)骨骼肌修復(fù)中的作用特點(diǎn)以優(yōu)化治療方案。有鑒于此,我們設(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)。目的探究電針足三里穴、電針阿是穴在骨骼肌損傷后再生中,促進(jìn)NMJ重建的作用特點(diǎn)及其機(jī)制,從而為優(yōu)化骨骼肌損傷的電針治療方案提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法75只新西蘭大白兔隨機(jī)平均分成5組：正常組、模型組、電針阿是穴、電針足三里組、電針足三里加阿是穴組(合用組)。采用急性腓腸肌鈍器傷模型,電針各組進(jìn)行穴位電刺激(0.4 mA,2 Hz,15 min),正常組和模型組僅模擬電針各組進(jìn)行固定。每組分別于造模后第7天、14天、28天隨機(jī)取5只大白兔使用耳緣靜脈空氣栓塞法處死,取造模打擊部位腓腸肌樣本,通過HE染色觀察骨骼肌肌纖維形態(tài)(直徑和數(shù)量)、免疫熒光染色觀察NMJ形態(tài)(NMJ平均染色面積和非連續(xù)性),免疫組化檢測肌細(xì)胞生成素(Myogenin)的表達(dá)情況,ELISA法測AChE的表達(dá)；并使用QRT-PCR和ELISA方法檢測肌特異性蛋白激酶(Muscle specific protein kinase, MuSK)以及神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(Neuregulinl, NRG1)的基因和蛋白表達(dá)情況。結(jié)果與模型組比較：合用組新生肌纖維數(shù)量和直徑,NMJ的平均染色面積增加,但是NMJ的非連續(xù)性下降,同時(shí)AChE、Myogenin、MuSK以及NRGl的表達(dá)增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；電針足三里組與電針阿是穴組相互比較：7天時(shí),電針阿是穴組肌纖維直徑、NMJ平均染色面積、AChE的蛋白含量、NRG1的mRNA和NRG1蛋白含量、Myogenin的平均光密度值(Mean optical density, MOD)等參數(shù)均較電針足三里組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；而肌纖維數(shù)量、NMJ非連續(xù)性、AChE的蛋白含量、MuSK的mRNA和蛋白含量等參數(shù)二者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。14天時(shí),電針阿是穴組的肌纖維直徑、NMJ平均染色面積、NMJ非連續(xù)性、NRG1的mRNA和蛋白含量等參數(shù)均較電針足三里組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而電針足三里組的肌纖維數(shù)量、MuSK的mRNA和蛋白含量等參數(shù)較電針阿是穴組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但是AChE的蛋白含量、Myogenin的MOD值二組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。28天時(shí),電針阿是穴組的肌纖維直徑和NMJ非連續(xù)性較電針足三里組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；而電針足三里組的肌纖維數(shù)量、AChE的蛋白含量、MuSK的mRNA和蛋白含量、Myogenin的MOD值等參數(shù)較電針阿是穴組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論電針阿是穴、電針足三里以及同時(shí)電針足三里和阿是穴治療骨骼肌急性鈍挫傷可以促進(jìn)受損肌纖維及其中NMJ的再生,電針治療主要通過促進(jìn)AChE、Myogenin、MuSK以及NRG1的表達(dá)促進(jìn)骨骼肌及其中NMJ的結(jié)構(gòu)重建。電針阿是穴起效較快,早期效果好；而電針足三里穴則發(fā)揮作用滯后,長期治療效果好。兩穴配伍治療效果更佳。
[Abstract]:Objective To study the effects of acupuncture points on the regeneration and regeneration of skeletal muscle and to improve the function of skeletal muscle . In 28 days , five rabbits were sacrificed by ear - edge vein air embolism . The specimens of muscle fibers of skeletal muscle were observed by HE staining . The morphology of skeletal muscle fibers ( diameter and quantity ) was observed by HE staining , the morphology of NMJ was observed by immunofluorescence staining ( NMJ average staining area and non - continuity ) , and the expression of Myogenin was detected by immunohistochemistry .
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本文編號：1710149