冠心病血瘀證轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究——病證結(jié)合生物標志物研究思路與方法
本文選題:冠心病 切入點:血瘀證 出處:《中國實驗方劑學(xué)雜志》2017年19期
【摘要】:中醫(yī)證候的生物學(xué)基礎(chǔ)研究是影響中醫(yī)學(xué)發(fā)展與創(chuàng)新的重大科學(xué)問題,證候相關(guān)生物標志物及中藥干預(yù)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究對于在證候標準規(guī)范的基礎(chǔ)上進一步提高診斷效能和臨床療效具有重要意義。因此,在前期冠心病證候標準規(guī)范研究的基礎(chǔ)上,本項目組以冠心病心絞痛血瘀證為切入點,從分子生物水平對證候進行了深入研究。第一,通過采集累計312例患者外周血基因信息,運用差異顯示法、實時定量聚合酶鏈式反應(yīng)(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR),斑點雜交法,高通量芯片,測序等方法,確立了冠心病血瘀證長鏈非編碼核糖核酸-微小核糖核酸-信使核糖核酸(long noncoding ribonucleic acid-micro ribonucleic acid-messenger ribonucleic acid,lncRNA-miRNA-mRNA)3個層面的潛在生物標志物。第二,在前期篩選出的差異基因的基礎(chǔ)上,運用生物信息學(xué)分析結(jié)合細胞功能學(xué)驗證的方法,構(gòu)建了冠心病血瘀證基因miRNAmRNA以及l(fā)ncRNA-miRNA-mRNA 2個水平的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。第三,基于血瘀證差異基因及調(diào)控網(wǎng)絡(luò),通過累計202例活血化瘀中藥干預(yù)冠心病心絞痛血瘀證患者的隨機對照試驗,治療前后共計400余人次的基因檢測,以及活血化瘀中藥處理相關(guān)細胞模型的體外實驗,從基因-蛋白-功能3個層面研究中藥作用機制,從分子水平揭示了活血化瘀中藥干預(yù)冠心病血瘀證的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)機制。本研究將相關(guān)的分子生物學(xué)技術(shù)及生物信息學(xué)方法引入證候的生物學(xué)基礎(chǔ)研究,建立了一套證候相關(guān)生物標志物的研究方法,為證候?qū)嵸|(zhì)的研究提供了新思路。
[Abstract]:The biological basic research of TCM syndromes is an important scientific problem affecting the development and innovation of TCM. The study of syndrome-related biomarkers and TCM intervention and control network is of great significance for further improving the diagnostic efficacy and clinical efficacy on the basis of the criteria of syndromes. Therefore, on the basis of the study on the standard norms of coronary heart disease syndrome in the early stage, This project group took angina pectoris and blood stasis syndrome of coronary heart disease as the breakthrough point, carried on the thorough research from the molecular biological level to the syndrome. First, through collecting the cumulative 312 patients' peripheral blood gene information, the differential display method was used. Real-time polymerase chain reactionation real-time PCR, dot blot hybridization, high-throughput microarray, sequencing, etc. The potential biomarkers of long noncoding ribonucleic acid-micro ribonucleic acid-messenger ribonucleic ribonucleic lncRNA-miRNA-mRNA-mRNA-mRNAs in long chain non-coding ribonucleic acids (RNs) and microRNA (RNs) in patients with coronary heart disease (CHD) with blood stasis syndrome were established. Second, based on the differential genes screened in the early stage, the potential biomarkers of long noncoding ribonucleic acid-micro ribonucleic acid-messenger ribonucleic acidincRNA-mRNAs were established. With the method of bioinformatics analysis and cell function verification, the regulatory networks of miRNAmRNA and lncRNA-miRNA-mRNA were constructed. Thirdly, based on the differential genes and regulatory networks of blood stasis syndrome, A randomized controlled trial was conducted in 202 patients with angina pectoris and blood stasis syndrome of coronary heart disease treated with traditional Chinese medicine for promoting blood circulation and removing blood stasis. The gene detection of more than 400 people before and after treatment and the in vitro experiment of treating the related cell model with traditional Chinese medicine for promoting blood circulation and removing blood stasis were carried out. To study the action mechanism of traditional Chinese medicine from three aspects of gene, protein and function. The mechanism of gene regulation network of traditional Chinese medicine for promoting blood circulation and removing blood stasis in patients with coronary heart disease (CHD) was revealed from molecular level. In this study, molecular biological techniques and bioinformatics methods were introduced into the biological basic study of syndrome. A set of research methods of syndromes related biomarkers is established, which provides a new idea for the study of syndromes essence.
【作者單位】: 中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院;北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院;北京中醫(yī)藥大學(xué);
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81473561,81673847)
【分類號】:R259
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本文編號:1657689
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