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《昆明醫(yī)科大學(xué)》 2014年

生熟三七炮制及其部分藥理評價研究

周新惠  

【摘要】：三七為五加科植物三七Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen的干燥根,性溫,味甘、微苦,歸肝、胃經(jīng)；具有散瘀止血,消腫定痛之功,用于咯血,吐血,衄血,便血,崩漏,外傷出血,胸腹刺痛,跌撲腫痛等癥。熟三七則有補氣補血、強身健體之功,在臨床和民間多藥食兩用,主要用于血虛證,產(chǎn)后虛弱,氣血不足等；也可用于身體虛弱,氣血不足,癥見面色蒼白、頭昏眼花、四肢無力、食欲不振。 目前生三七的相關(guān)研究不少,但對三七炮制品的研究不多。作為一種常用中藥,2010版《藥典》中只有三七生品。三七的炮制方法多是高壓蒸制,對常壓蒸制、油炸以及其他炮制方法的研究不多。本實驗通過對三七進行含量測定、炮制、指紋圖譜、藥理研究,系統(tǒng)闡述三七炮制前后化學(xué)成分變化和藥理差異,為深入研究三七炮制機理奠定基礎(chǔ)。研究方法及結(jié)果如下： 1三七中五種皂苷類成分和三七素的含量測定 1.1HPLC法同時測定三七中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd的含量 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流動相：水-乙腈,梯度洗脫,0～21min80:20,21～30min80:20～75:25,30～1min75:25～59:41,41～51min59:41～55:45,51～56min55:45～80:20,56～66min80:20(體積比)：柱溫：20℃；進樣量：10μL；流速：1mL/min;檢測波長：203nm。五種成分的線性方程分別是三七皂苷R1Y=304.60X-1.1457,人參皂苷Rgi Y=371.97X-29.646,人參皂苷ReY=391.18X-6.7571,人參皂苷Rb1Y=270.76X+1.0893,人參皂苷Rd Y=329.50X+1.3643; r=0.9997～0.9998,加樣回收率為97.6～101.7%。 1.2HPLC法測定三七中三七素的含量 色譜柱：Agilent Zorbax SB-Aq (250mmx4.6mm,5μm),流動相：甲醇：0.05%冰乙酸=35：75,柱溫：20℃,檢測波長：213nm,流速：0.8mL/min,進樣量：101μL。線性方程Y=1980.4X-83.431,r=0.9999o 比較了生三七和蒸制熟三七中三七素的含量,其中生三七中三七素含量0.59%,蒸制熟三七中三七素含量為0.29%。 2生熟三七的炮制研究 2.1三七的炮制工藝研究 考察了三七潤制溫度、時間,干燥溫度,蒸制時間這幾個因素,以潤制效果、五種皂苷類成分含量為指標(biāo),最終確定三七潤制溫度為60℃,潤制時間24-27h,干燥溫度40℃,蒸制時間6h。 2.2三七加熱炮制方法研究 考察了蒸制法、油炸法、砂炒法三種加熱炮制方法炮制前后三七中五種皂苷類成分的含量。HPLC法測定結(jié)果為生品中三七皂苷R10.98%、人參皂苷Rgl3.27%、人參皂苷Re0.38%、人參皂苷Rbl2.72%、人參皂苷Rd0.66%；蒸制三七中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd含量依次為0.79%、2.69%、0.33%、2.49%、0.61%；油炸三七中此五種成分含量依次為1.09%、2.56%、0.18%、2.44%、0.57%；砂炒三七中依次為0.30%、1.15%、0.11%、1.00%、0.24%。 對三七炮制前后HPLC色譜圖比較發(fā)現(xiàn),三七炮制后一些成分含量減少或消失,同時生成了一些新成分,其中某些新產(chǎn)生成分隨炮制溫度升高含量增加。 3三七皂苷類成分指紋圖譜研究 3.1指紋圖譜的建立和方法驗證 主要考察了提取方法、洗脫梯度對指紋圖譜的影響。確定色譜條件為色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18(4.6mm×250mm);流動相：水-乙腈,梯度洗脫,0～25min80:20,25～30min80:20～75:25,30～41min75:25～59:41,41～51min59:41～55:45,51～56min55:45～80:20,56～70min,80：20(體積比)；柱溫：20℃；進樣量：10μL；流速：1mL/min；檢測波長：203nnm。精密度實驗、重復(fù)性實驗、穩(wěn)定性實驗中10個共有峰相對峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于3%。 3.2不同蒸制時間炮制品指紋圖譜研究 三七常壓蒸制Oh、2h、4h、6h、8h,建立不同蒸制時間制品的指紋圖譜,標(biāo)定11個共有峰,0h、2h、4h制品指紋圖譜相似度0.99,6h、8h制品相似度0.76,6h相似度低于8h。對不同時間制品指紋圖譜進行聚類分析,Oh、2h、4h、8h歸為一類,6h歸為一類。由相似度和聚類分析結(jié)果可看出6h制品指紋圖譜特征與其它蒸制時間制品差異最大,可以得出三七常壓蒸制最佳時間為6h,與炮制工藝中確定的蒸制時間一致。 4生三七和蒸制熟三七部分藥理作用比較研究 4.1生熟三七的止血作用比較 用斷尾法和毛細(xì)玻管法測定小鼠的出血時間和凝血時間,各給藥組均能顯著縮短小鼠出血時間；生三七能顯著縮短小鼠凝血時間,熟三七則對凝血時間有縮短趨勢,但影響不顯著。表明在止血作用方面,生三七好于熟三七。 4.2生熟三七的活血作用比較 高分子右旋糖酐-冰水浴建立小鼠血瘀模型,測定小鼠耳廓微循環(huán)和血液流變學(xué)指標(biāo)評價生熟三七的活血作用。生三七、蒸制熟三七對微循環(huán)障礙小鼠耳廓微動脈口徑影響不顯著,對微靜脈口徑10min、20min時影響不顯著,生三七高、低劑量組均能顯著增加微循環(huán)障礙小鼠30min時微靜脈口徑、毛細(xì)血管開放量和20min時毛細(xì)血管開放量；復(fù)方丹參片組可顯著降低微循環(huán)障礙小鼠的全血黏度,熟三七高劑量組有降低的趨勢,但作用不顯著。表明在改善微循環(huán)方面,生三七好于熟三七,熟三七組僅高劑量組有一定作用,而且起效較慢；在改善血液黏度方面,熟三七好于生三七。 4.3生熟三七的補血作用比較 建立小鼠失血性貧血模型,測定血常規(guī)指標(biāo)和重要臟器(胸腺、脾臟、腎上腺)指數(shù),評價生熟三七的補血作用。生三七、蒸制熟三七均能極顯著升高失血性貧血小鼠紅細(xì)胞總數(shù)、血紅蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù),熟三七作用略好于生三七,但無顯著性差異;對失血性貧血小鼠臟器重量的影響不顯著。表明生三七、蒸制熟三七對失血性貧血小鼠均有顯著的補血作用,熟三七作用略好于生三七,但生、熟三七比較差異無顯著性。 4.4生熟三七的補虛作用比較 環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠氣血虛弱、免疫力低下模型,測定血常規(guī)指標(biāo)和重要臟器(胸腺、脾臟、腎上腺)指數(shù),評價生熟三七補虛作用。生三七、蒸制熟三七對環(huán)磷酰胺所致氣虛小鼠紅細(xì)胞總數(shù)影響不顯著,熟三七高劑量組能顯著增加氣虛小鼠血紅蛋白含量,各給藥組顯著增加氣虛小鼠白細(xì)胞總數(shù)(尤以復(fù)方阿膠漿組和熟三七高劑量組作用更顯著)；與模型組比較,熟三七高、低劑量組各臟器指數(shù)均極顯著升高,生三七高、低劑量組有升高的趨勢,但作用不顯著。表明在提高免疫、補氣作用方面熟三七好于生三七。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R283
【目錄】：

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7 季選秀;王和德;張文高;;不同劑量三七微粉治療不穩(wěn)定性心絞痛臨床研究及保護急性心肌損傷作用實驗研究[A];第八次全國中西醫(yī)結(jié)合心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

8 毛奇;徐寒松;;三七粉治療單純型糖尿病性視網(wǎng)膜病變臨床觀察[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第一次內(nèi)分泌代謝學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

9 李家旺;司民真;;用傅立葉變換紅外光譜法研究核輻照對三七粉成分的影響[A];第十五屆全國光散射學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

10 張文綱;楊驍;胡燕;;三七的藥理作用與臨床應(yīng)用進展[A];2013年全國醫(yī)藥學(xué)術(shù)交流會暨臨床藥學(xué)與藥學(xué)服務(wù)研究進展培訓(xùn)班論文集[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔡祥榮　周新宇;[N];中國中醫(yī)藥報;2009年

2 上海龍華醫(yī)院脾胃病科 戴彥成;[N];上海中醫(yī)藥報;2013年

3 王方升;[N];中國醫(yī)藥報;2002年

4 韋為;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

5 廣西南寧 呂斌;[N];上海中醫(yī)藥報;2012年

6 ;[N];中國中醫(yī)藥報;2013年

7 湖南省中醫(yī)院藥劑科 主任藥師 王竹鑫;[N];大眾衛(wèi)生報;2013年

8 ;[N];云南日報;2002年

9 段煦;[N];健康報;2006年

10 尹萸;[N];家庭醫(yī)生報;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉東平;三七有效部位對雌激素干預(yù)下大鼠子宮內(nèi)膜止血、修復(fù)機制的研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2012年

2 楊志剛;三七中皂苷的抗腫瘤及免疫佐劑活性研究[D];浙江大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊海峰;改進三七加工技術(shù)的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 季選秀;三七微粉治療不穩(wěn)定性心絞痛臨床研究及保護急性心肌損傷作用實驗研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2006年

3 唐嬌;三七的安全性毒理學(xué)評價[D];蘭州大學(xué);2012年

4 鄧雯;三七、西洋參兩味中藥材超微粉的制備工藝與質(zhì)量評價研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2008年

5 張云龍;普洱茶三七含片的研制及其輔助降血脂作用研究[D];云南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

6 劉剛;三七剪口的化學(xué)成分研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

7 周新惠;生熟三七炮制及其部分藥理評價研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

8 吳同啟;中藥何首烏、三七干預(yù)家兔髂動脈球囊損傷術(shù)后狹窄的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2006年

9 王永嬌;苦碟三七飲對冠心病—穩(wěn)定型心絞痛（痰瘀阻絡(luò)證）的臨床研究[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2013年

10 王艷艷;三七活血止血有效物質(zhì)基礎(chǔ)表征研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2006年

  本文關(guān)鍵詞：生熟三七炮制及其部分藥理評價研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：159811