本文關(guān)鍵詞：益氣活血方治療大鼠脊髓型頸椎病的實驗研究　出處：《南京中醫(yī)藥大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的： 采用急性毒性試驗評價臨床經(jīng)驗方“益氣活血方"的安全性,采用耳廓腫試驗、醋酸扭體法研究該方的抗炎鎮(zhèn)痛作用,采用大鼠脊髓型頸椎病模型研究該方對大鼠受損脊髓神經(jīng)功能恢復(fù)的影響,闡明其促進脊髓功能恢復(fù)的相關(guān)作用機制,為中藥“益氣活血方”的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)及指導(dǎo)。方法： 1、20只ICR小鼠隨機選取5只為對照組,余15只為實驗組,采用最大給藥量的方法研究益氣活血方的急性毒性反應(yīng)；2、以二甲苯致小鼠耳腫脹法以及醋酸扭體法等作為基礎(chǔ)研究方法,以高、中、低濃度益氣活血方灌胃小鼠5天,研究該方的抗炎鎮(zhèn)痛效果；3、60只SD大鼠,隨機選取10只作為假手術(shù)組：僅暴露椎板,未造成脊髓壓迫,以生理鹽水(Normal Saline, NS)進行灌胃；其余的SD大鼠采用“自體第七頸椎棘突椎間移植法”制造大鼠脊髓型頸椎病模型,術(shù)后第1天根據(jù)脊髓功能的評分將其分為：A組：造模后,以高、中、低濃度益氣活血方進行灌胃；B組：造模后,以頸復(fù)康進行灌胃；C組：造模后,以NS進行灌胃。造模后對大鼠進行為期4周的連續(xù)灌胃,每周均采用改進Rivaling的斜板試驗、改良Tarlov評分、BBB評分等方法評估大鼠運動功能的恢復(fù)程度。灌胃結(jié)束后,采用HE染色法觀察受損脊髓組織的形態(tài)學改變和ELISA方法測定大鼠受損節(jié)段中SOD、MDA、PGE2、PLA2的含量。結(jié) 果： 1、小鼠的日最大給藥量是臨床成人日用量的315倍,相當于生藥的892.5g·kg-1,在該劑量下未見明顯毒性反應(yīng),7天內(nèi)未出現(xiàn)動物死亡現(xiàn)象；2、發(fā)現(xiàn)高、中、低濃度的益氣活血方均能顯著抑制二甲苯致小鼠耳腫脹的作用,能減輕冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)。3、行為學觀察：高、中、低濃度益氣活血方及頸復(fù)康均能顯著增加Rivaling的斜板試驗的平均度數(shù)、Tarlov評分、BBB評分,與NS組相比效果顯著(P0.05)。4、HE染色：受損脊髓組織形態(tài)學的觀察結(jié)果顯示,中藥高、中、低濃度組以及頸復(fù)康組的受損脊髓組織內(nèi)均可見膠質(zhì)瘢痕和空洞形成,且空洞總面積均明顯小于NS組。5、ELISA方法：通過檢測大鼠受損脊髓組織中的炎癥因子發(fā)現(xiàn),高、中濃度益氣活血方及頸復(fù)康均能顯著降低受損脊髓組織內(nèi)PGE2的含量(P0.05)；高、中、低濃度益氣活血方及頸復(fù)康均能顯著減低受損脊髓組織內(nèi)PLA2的含量(P0.05)；高、中、低濃度益氣活血方及頸復(fù)康顆粒均能顯著增加大鼠受損脊髓組織內(nèi)SOD的含量(P0.05)；高、中濃度的益氣活血方以及頸復(fù)康顆粒均能顯著降低脊髓組織內(nèi)的MDA含量(P0.05)；低濃度益氣活血方亦可降低其組織內(nèi)PGE2、 MDA含量,但與對照組相比,無顯著性差異(P0.05)。結(jié)論： 益氣活血方是安全的,并具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用,且能通過提高受損脊髓組織細胞中氧自由基的清除率以及抑制受損脊髓組織的炎癥反應(yīng)來促進脊髓功能的恢復(fù)。
[Abstract]:Objective: to evaluate the safety of clinical experience prescription "Yiqi Huoxue recipe" by acute toxicity test, and to study the anti-inflammatory and analgesic effect of the prescription by auricle swelling test and acetic acid writhing method. The effect of the prescription on the recovery of injured spinal cord nerve function in rats was studied by using the rat model of cervical Spondylotic myelopathy, and the related mechanism of promoting the recovery of spinal cord function was clarified. Methods: 1Twenty ICR mice were randomly selected as control group and 15 as experimental group. To study the acute toxicity of Yiqi Huoxue prescription by the method of maximum dosage; (2) taking xylene induced mouse ear swelling and acetic acid writhing as basic research methods, the anti-inflammatory and analgesic effect of this prescription was studied by oral administration of high, middle and low concentration of Yiqi Huoxue recipe for 5 days in mice. (3) 60 SD rats were randomly selected as sham-operated group (n = 10): normal Saline (NSN) was perfused with normal saline to expose vertebral lamina without spinal cord compression. The other Sprague-Dawley rats were divided into two groups according to the score of spinal cord function on the first day after operation. The low concentration Yiqi Huoxue prescription was perfused by stomach; Group B: after the model was made, the rats were perfused with Jingfukang. Group C: after the model was made, the rats were perfused with NS for 4 weeks. The modified Rivaling slant test was used every week to improve the Tarlov score. The degree of recovery of motor function in rats was evaluated by BBB score. After gastric perfusion, morphological changes of injured spinal cord tissues were observed by HE staining method and SOD in injured segments of rats were measured by ELISA method. Fruit setting: 1. The maximum daily dose of mice was 315 times that of clinical adults, equivalent to 892.5 g 路kg-1 of crude drugs. There was no obvious toxic reaction at this dose and no animal death occurred within 7 days. 2, found that high, medium and low concentrations of Yiqi Huoxue prescription can significantly inhibit xylene induced mouse ear swelling, can reduce the number of acetic acid-induced mice writhing reaction times .3.Behavioral observation: high, medium. The low concentration of Yiqi Huoxue recipe and Jingfukang could significantly increase the mean degree of Rivaling inclined board test and the BBB score. Compared with NS group, the results of HE staining showed that the histomorphology of injured spinal cord was high and moderate. The formation of glial scar and cavity were found in the injured spinal cord tissue of low concentration group and Jingfukang group, and the total area of cavity was significantly smaller than that of NS group (.5%). ELISA method: by detecting inflammatory factors in injured spinal cord tissue of rats, high levels of inflammatory cytokines were found. The medium concentration of Yiqi Huoxue recipe and Jingfukang could significantly reduce the content of PGE2 in injured spinal cord tissue. High, medium and low concentrations of Yiqi Huoxue prescription and Jingfukang can significantly reduce the content of PLA2 in injured spinal cord tissue. High, medium and low concentrations of Yiqi Huoxue prescription and Jingfukang granule could significantly increase the content of SOD in injured spinal cord tissue of rats. High and medium concentration of Yiqi Huoxue recipe and Jingfukang granule could significantly reduce the content of MDA in spinal cord tissue. Low concentration Yiqi Huoxue prescription can also reduce the content of PGE2 and MDA in its tissue, but there is no significant difference compared with the control group. Conclusion: Yiqi Huoxue prescription is safe. It also has obvious anti-inflammatory and analgesic effect and can promote the recovery of spinal cord function by increasing the clearance rate of oxygen free radicals in the cells of injured spinal cord tissue and inhibiting the inflammatory response of injured spinal cord tissue.
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R274.9

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3 宋e，

本文編號：1414009