本文關(guān)鍵詞：牡荊素對(duì)人肝細(xì)胞癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖抑制作用及其機(jī)制的探討　出處：《桂林醫(yī)學(xué)院》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 牡荊素 SMMC-7721細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 抗腫瘤

【摘要】：目的:研究牡荊素(Vitexin)對(duì)人肝細(xì)胞癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖抑制作用及其作用機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)采用體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721,用MTT法檢測(cè)不同濃度牡荊素(Vitexin)作用于人肝癌SMMC-7721細(xì)胞48h,72h,96h后的細(xì)胞活力,并計(jì)算生長(zhǎng)抑制率和半數(shù)抑制濃度(IC50);選取牡荊素(0,25,50,100μmol·L-1)作用于SMMC-7721細(xì)胞72h后,應(yīng)用Hoechst33258核染色,觀察SMMC-7721細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)形態(tài)學(xué)變化;FITC-Annexin V-PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化;JC-1染色觀察細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位(ΔΨm)變化;qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)P53、Bcl-2、Bax等相關(guān)凋亡基因的表達(dá)情況;蛋白免疫印跡法檢測(cè)p53、Bcl-2、Bax等相關(guān)凋亡蛋白水平的表達(dá)情況。結(jié)果:終濃度為0,25,50,100,120,150μmol·L-1的牡荊素處理SMMC-7721細(xì)胞48h,72h,96h后,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率分別為150.372μmol·L-1,116.242μmol·L-1,90.192μmol·L-1,呈時(shí)間-劑量依賴性(P0.05);牡荊素作用于SMMC-7721細(xì)胞72h后,Hoechst33258核染色,細(xì)胞核有明顯的凋亡形態(tài)學(xué)變化,與空白對(duì)照組相比,凋亡細(xì)胞比率隨著藥物濃度逐漸增加;FITC-Annexin V-PI雙染流式細(xì)胞儀發(fā)現(xiàn)牡荊素能誘導(dǎo)SMMC-7721細(xì)胞凋亡,且細(xì)胞早凋比例隨藥物濃度而增加,細(xì)胞總凋亡率也逐漸增加;JC-1染色發(fā)現(xiàn)線粒體膜電位隨著藥物濃度增加而下降;qRT-PCR顯示,與陰性對(duì)照組相比,P53、Bax、Casepase-3、PARP等基因表達(dá)上調(diào),而Bcl-2表達(dá)下調(diào),且變化趨勢(shì)呈一定的濃度依賴關(guān)系。蛋白免疫印跡法顯示,與陰性對(duì)照組相比,p53、Bax、casepase-3、PARP等蛋白表達(dá)上調(diào),而Bcl-2表達(dá)下調(diào),且變化趨勢(shì)呈一定的濃度依賴關(guān)系。結(jié)論:牡荊素能抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721增殖誘導(dǎo)凋亡而發(fā)揮抗腫瘤作用,呈時(shí)間-劑量依賴性,其作用機(jī)制可能通過降低線粒體膜電位,依賴p53途徑下調(diào)Bcl-2,上調(diào)Bax、Casepase-3、PARP等基因表達(dá)激活caspase通路,進(jìn)而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To study the effect of vitexin on the proliferation and apoptosis of human hepatocellular carcinoma cell line - 7721 cells after 48h , 72h , 96h .

【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R273

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本文編號(hào)：1370183