本文關(guān)鍵詞：姜黃素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注apoE及RXR、LXR表達(dá)的影響　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:本研究旨在從在體實(shí)驗(yàn)和離體實(shí)驗(yàn)兩部分,分別觀察中藥姜黃素(Curcumin,Cur)對(duì)在體實(shí)驗(yàn)中大鼠局灶性腦缺血再灌注(ischemia/reperfusion,IR)模型,以及對(duì)離體實(shí)驗(yàn)中原代星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocyte,ast)的“糖氧剝奪/再灌注”(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/Reoxygenation)模型,其載脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)、類(lèi)視黃醇X受體(Retinoic X receptor,RXR)和肝X受體(Liver X receptor,LXR)的影響。方法:在體實(shí)驗(yàn),采用“插線法”使SD大鼠的大腦中動(dòng)脈閉塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)制作局灶性的I/R模型。將60只SD(雄性)大鼠隨機(jī)地分為五個(gè)小組:假手術(shù)組(簡(jiǎn)稱(chēng)SH);模型組(簡(jiǎn)稱(chēng)IR);姜黃素劑量組(100 mg/kg、300 mg/kg);尼莫地平陽(yáng)性對(duì)照組(10 mg/kg)。再灌注24 h后,采用“盲評(píng)的方法”進(jìn)行神經(jīng)功能缺損的評(píng)分估計(jì);測(cè)定其腦含水量;用Western印跡法檢測(cè)apoE及LXR、RXR的表達(dá);觀察各組,其腦組織形態(tài)學(xué)改變及運(yùn)用原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)法(簡(jiǎn)稱(chēng):TUNEL法)來(lái)檢測(cè)每組大鼠海馬中的CA1區(qū)域神經(jīng)元發(fā)生凋亡的情況。離體實(shí)驗(yàn)則選取新出世SD大鼠,將其大腦皮層的星膠細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),用“糖氧剝奪/再灌注”的方法來(lái)構(gòu)建離體的腦缺血再灌注模型。運(yùn)用免疫熒光的方法,來(lái)觀察神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(簡(jiǎn)稱(chēng):GFAP)的表達(dá),從而鑒定astrocyte。本實(shí)驗(yàn)隨機(jī)地將培養(yǎng)的細(xì)胞分成七個(gè)小組:正常對(duì)照組;模型組;姜黃素劑量組:2.5 umol/L,5 umol/L,10 umol/L,20 umol/L;尼莫地平陽(yáng)性對(duì)照組:0.5 umol/L。采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)兩個(gè)指標(biāo)分別對(duì)細(xì)胞的活力以及其毒性進(jìn)行評(píng)定。用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)對(duì)星膠細(xì)胞apoE、RXR、LXR的表達(dá)程度進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果:在體實(shí)驗(yàn)中,姜黃素(100 mg/kg、300 mg/kg)組可顯著改善MCAO大鼠的行為學(xué)體征;降低腦含水量;減輕腦組織形態(tài)學(xué)變化以及神經(jīng)元凋亡;上調(diào)apoE及LXR、RXR的表達(dá)。其中,姜黃素(300mg/kg)組治療效果最是顯著。離體實(shí)驗(yàn)中,姜黃素可使細(xì)胞活力明顯增高,LDH釋放量顯著降低,并使apoE及LXR、RXR的表達(dá)上調(diào)。其中20 umol/L效果最為明顯,而最低劑量2.5 umol/L幾乎為無(wú)效劑量。結(jié)論:姜黃素對(duì)大鼠的I/R損傷和對(duì)糖氧剝奪/再灌注條件下離體星形膠質(zhì)細(xì)胞具有保護(hù)作用,此保護(hù)作用可能是通過(guò)上調(diào)apo E及LXR、RXR的表達(dá)所引起的。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of curcumin ( curcumin , Cur ) on focal cerebral ischemia / reperfusion ( IR ) models in vivo and in vitro experiments . Sixty SD rats were randomly divided into five groups : sham operation group ( SH ) , model group ( IR ) , curcumin dose group ( 100 mg / kg , 300 mg / kg ) , nimodipine positive control group ( 10 mg / kg ) . The expression of apoE , RXR and LXR was measured by Western blot . The results showed that curcumin ( 100 mg / kg , 300 mg / kg ) could significantly improve the expression of apoE , RXR and LXR in rats . Conclusion : The protective effect of curcumin on I / R injury in rats and in vitro astrocytes under oxygen deprivation / reperfusion may be caused by up - regulation of the expression of apo E and LXR and RXR .

【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R277.7

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