本文關(guān)鍵詞：冠心病心絞痛血瘀證患者血小板微粒功能及與細胞微粒結(jié)合體的研究

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【摘要】：目的：本研究采用流式細胞術(shù)檢測冠心病不穩(wěn)定型心絞痛(UA)患者外周血血小板微粒(PMP)膜表面功能蛋白CD62p、PAC-1、CD42b及CD40L的表達水平,比較上述指標在冠心病UA不同嚴重程度患者中的差異；并采用顯微成像流式細胞術(shù)觀察UA患者外周血PMP與白細胞微粒(LMP)、內(nèi)皮細胞微粒(EMP)、紅細胞微粒(RMP)間形成的結(jié)合體形態(tài),并檢測結(jié)合體在冠心病UA患者中的表達情況。同時,研究PMP表面膜功能蛋白及PMP-LMP結(jié)合體、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體在冠心病UA血瘀證及非血瘀證中的差異,為冠心病血瘀證的形成提供理論基礎(chǔ)。方法：選取2015年8月至2015年12月于中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院心內(nèi)科住院治療的冠心病不穩(wěn)定性心絞痛患者110名,采用同期廣安門醫(yī)院南區(qū)體檢中心正常志愿者20名作為對照組。將冠心病患者分為血瘀證組和非血瘀證組,并按braunwald分級分為Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級。于清晨對所有受試者空腹抽取靜脈血,并由檸檬酸鈉抗凝。運用梯度離心的方法制備無血小板血漿(platelet-free plasma, PFP),將PFP存于-80℃冰箱內(nèi),在2周內(nèi)利用普通流式細胞儀及顯微成像流式細胞儀完成檢測。將檢測PMP及其表面膜功能蛋白CD62p、PAC-1、CD42b、CD40L的表達,以及PMP-LMP結(jié)合體、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體水平并觀察其形態(tài),分析上述指標與冠心病不穩(wěn)定心絞痛嚴重程度的關(guān)系以及冠心病血瘀證的相關(guān)性。結(jié)果：冠心病UA患者外周血PMP及其表面CD62p、PAC-1、CD40L表達水平高于健康人,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；而冠心病UA患者PMP表面CD42b表達水平與健康人相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；冠心病UA血瘀證患者PMP及其表面CD62p、PAC-1、CD40L表達水平明顯高于非血瘀證組(p0.05),并與血瘀證存在相關(guān)性(p0.05)。UAⅢ級患者外周血PMP水平高于UAⅠ級、Ⅱ級患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,UAⅡ級和Ⅲ級患者PMP表面PAC-1、CD40L表達水平均高于UAⅠ級患者(p0.05),UAⅢ級患者PMP表面CD62p表達水平高于UAⅠ級、Ⅱ級患者(p0.05)。有序多分類Logistic回歸分析顯示PMP及其表面CD62p、PAC-1、CD40L表達水平與不穩(wěn)定心絞痛嚴重程度密切相關(guān)。冠心病UA患者外周血PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-LMP結(jié)合體、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體水平高于健康人(p0.01)；UAⅢ級患者PMP、RMP水平高于UA Ⅰ級、Ⅱ級患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01),Ⅱ級、Ⅲ級患者LMP、EMP、PMP-EMP結(jié)合體水平高于Ⅰ級患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；冠心病UA血瘀證患者PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體水平高于非血瘀證患者(p0.05),且與血瘀證存在相關(guān)性(p0.01)。結(jié)論：1、冠心病UA患者外周血PMP及PMP表面CD62p、PAC-1、CD40L表達水平較健康人升高,且CD62p、PAC-1、CD40L表達水平與UA嚴重程度相關(guān),表明PMP的黏附、聚集、促炎癥反應(yīng)作用參與了UA的發(fā)生發(fā)展。2、冠心病UA血瘀證患者PMP及PMP表面CD62p、PAC-1、CD40L表達水平較非血瘀證患者升高,且與血瘀證呈正相關(guān),提示PMP的黏附、聚集、促炎癥反應(yīng)作用與血瘀證的形成有關(guān)。3、冠心病UA患者外周血PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-LMP結(jié)合體、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體水平高于健康人,且PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-EMP結(jié)合體水平與UA嚴重程度相關(guān)。4、冠心病UA血瘀證患者PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體表達水平較非血瘀證患者升高,且與血瘀證呈正相關(guān),提示PMP、LMP、EMP、 RMP、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體參與了冠心病UA血瘀證的形成。
【關(guān)鍵詞】：冠心病 血瘀證 血小板微粒 膜蛋白 結(jié)合體
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R259
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 符號說明9-11
• 第一部分 文獻綜述11-35
• 綜述一 冠心病血瘀證與凝血異常的研究進展11-17
• 綜述二 循環(huán)微粒與細胞的相互作用的研究進展17-24
• 參考文獻24-35
• 前言35-37
• 第二部分 實驗部分37-79
• 實驗一 冠心病UA患者外周血血小板微粒膜CD62p、PAC-1、CD42b、CD40L表達水平的相關(guān)性研究37-51
• 資料與方法37-40
• 結(jié)果40-47
• 小結(jié)47-48
• 討論48-51
• 實驗二 冠心病UA血瘀證患者外周血血小板微粒CD62p、PAC-1、CD42b、CD40L表達水平的相關(guān)性研究51-57
• 資料與方法51-52
• 結(jié)果52-55
• 小結(jié)55-56
• 討論56-57
• 實驗三 冠心病UA患者外周血PMP與PMP-LMP結(jié)合體、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體水平的相關(guān)性研究及形態(tài)觀察57-73
• 資料與方法57-59
• 結(jié)果59-65
• 小結(jié)65-66
• 討論66-73
• 實驗四 冠心病UA血瘀證患者外周血PMP與PMP-LMP結(jié)合體、PMP-EMP結(jié)合體、PMP-RMP結(jié)合體水平的相關(guān)性研究73-79
• 資料與方法73
• 結(jié)果73-77
• 小結(jié)77-78
• 討論78-79
• 結(jié)語79-80
• 參考文獻80-93
• 致謝93-95
• 在學(xué)期間主要研究成果95-97
• 個人簡歷97

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