目的:探討姜黃素類似物Cur20對血管性癡呆小鼠模型的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究。方法:(1)將小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、血管性癡呆動(dòng)物模型組(Model)、姜黃素組(Curcumin)、姜黃素類似物組(Cur20)。利用右側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎制備血管性癡呆動(dòng)物模型,造模24 h后Curcumin組、Cur20組分別給予相應(yīng)的藥物治療,而Model組、Sham組給予相應(yīng)的溶劑。術(shù)后第14 d對小鼠進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn),測試各組小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的差異;術(shù)后第19 d對小鼠進(jìn)行Y迷宮實(shí)驗(yàn),檢測各組小鼠工作記憶能力的差異。術(shù)后第20 d處死小鼠,取腦,尼氏染色觀察腦組織海馬區(qū)組織形態(tài)學(xué)變化;腦組織勻漿檢測腦內(nèi)氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)ROS、MDA、GSH和SOD的含量;免疫組化檢測血管生成相關(guān)因子VEGF、CD34、Ang-2、HIF-1α、TFEB的表達(dá)。(2)原代提取及培養(yǎng)大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(rBMECs);MTT法檢測不同濃度Cur20對rBMECs存活率的影響;用缺氧小室構(gòu)建糖氧剝奪模型(OGD)體外模擬腦缺血,顯微鏡觀察正常組、模型組及給藥組對擬缺血模型誘導(dǎo)rBMECs損傷形態(tài)學(xué)變化的影...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
前言
第一章 Cur20對血管性癡呆小鼠模型的保護(hù)作用
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2 試劑與溶液配制
        2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.2 血管性癡呆小鼠模型的構(gòu)建
        3.3 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)
        3.4 Y迷宮實(shí)驗(yàn)
        3.5 組織形態(tài)學(xué)評價(jià)
        3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 水迷宮實(shí)驗(yàn)
        4.2 Y迷宮實(shí)驗(yàn)
        4.3 尼氏染色
    5 討論
    6 小結(jié)
第二章 Cur20對血管性癡呆小鼠模型保護(hù)機(jī)制的研究
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 試劑與材料
        2.2 試劑配制
        2.3 儀器設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 血管性癡呆小鼠模型的建立
        3.2 氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的檢測
        3.3 免疫組化法檢測血管生成相關(guān)因子的表達(dá)
        3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 腦內(nèi)ROS的含量的變化
        4.2 腦內(nèi)脂質(zhì)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量的變化
        4.3 腦內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)含量的變化
        4.4 腦內(nèi)GSH含量的變化
        4.5 免疫組化檢測血管生成相關(guān)因子
    5 討論
    6 小結(jié)
第三章 Cur20對擬缺血誘導(dǎo)rBMECs損傷的保護(hù)作用
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 試劑與溶液配制
        2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 原代大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        3.2 Cur20對rBMECs細(xì)胞活力的影響
        3.3 擬缺血模型的制備
        3.4 Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響
        3.5 Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞存活率的影響
        3.6 Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞凋亡率的影響
        3.7 免疫熒光法檢測Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞增殖的影響
        3.8 高內(nèi)涵檢測Cur20對擬缺血損傷rBMECs細(xì)胞中ROS含量的影響
        3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 Cur20對腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響
        4.2 Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響
        4.3 Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞存活率的影響
        4.4 Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞凋亡率的影響
        4.5 免疫熒光法檢測Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞增殖的影響
        4.6 高內(nèi)涵檢測Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞內(nèi)ROS含量的影響
    5 討論
    6 小結(jié)
第四章 Cur20對擬缺血損傷rBMECs細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 試劑與溶液配制
        2.2 主要儀器
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 Western Blot檢測相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 結(jié)果
        4.1 Western Blot檢測Cur20對擬缺血損傷的rBMECs細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白的表達(dá)
    5 討論
    6 小結(jié)
綜述 活性氧簇促進(jìn)血管生成的作用及其腦內(nèi)意義
    1 反應(yīng)氧族與腦缺血
        1.1 腦缺血的抗氧化治療
        1.2 ROS的來源及生理環(huán)境
        1.3 ROS生理作用的特殊量效關(guān)系
    2 腦缺血后的血管新生途徑
        2.1 VEGF與血管生成
        2.2 Notch信號(hào)通路與血管生成
        2.3 血管生成素與血管生成
        2.4 缺氧誘導(dǎo)因子-1與血管生成
        2.5 NF-κB與血管生成
    3 ROS促進(jìn)血管生成的分子機(jī)制
        3.1 血管內(nèi)皮細(xì)胞中ROS的來源及作用
        3.2 ROS可激活PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)血管生成
        3.3 ROS可調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α促進(jìn)血管生成
        3.4 ROS可激活Nrf2信號(hào)通路促進(jìn)血管生成
        3.5 ROS對VEGF的直接作用
    4 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間成果



本文編號(hào)：4040551