目的研究歸術(shù)益坤方對(duì)多囊卵巢綜合征(PCOS)大鼠顆粒細(xì)胞自噬通路P53/AMPK中關(guān)鍵基因表達(dá)的影響。方法以丙酸睪丸酮和自噬誘導(dǎo)劑(C2-神經(jīng)酰胺)干預(yù)顆粒細(xì)胞,通過(guò)透射電鏡檢測(cè)顆粒細(xì)胞的自噬情況,建立大鼠PCOS顆粒細(xì)胞的自噬模型。實(shí)驗(yàn)分為空白組、模型組(10-5mol/L丙酸睪丸酮、10μmol/L C2-神經(jīng)酰胺)、歸術(shù)益坤方高、中、低劑量組(濃度分別為0.1、0.01、0.001 mg/mL)及自噬阻斷劑3MA組(10 mmol/L),采用Real-time PCR法檢測(cè)各組顆粒細(xì)胞中P53、mT OR、AMPK基因的表達(dá)。結(jié)果 10-5mol/L TP、10μmol/LC2-神經(jīng)酰胺作用顆粒細(xì)胞24 h后,細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中可觀察到自噬小體。與模型組相比,高、中、低劑量歸術(shù)益坤方可顯著上調(diào)P53基因的表達(dá)(P <0.01,P <0.05),下調(diào)AMPK基因的表達(dá)(P <0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組相比,高、中劑量歸術(shù)益坤方可顯著上調(diào)mT OR基因的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)。中藥低劑量組與模型組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> ...

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圖1透射電鏡觀察自噬小體

模型組大鼠顆粒細(xì)胞以10-5mol/LTP、10μmol/LC2-神經(jīng)酰胺作用24h，并設(shè)置空白對(duì)照組，以透射電鏡觀察兩組顆粒細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果如圖1所示，A為對(duì)照組顆粒細(xì)胞，其內(nèi)未見(jiàn)自噬小體，B為模型組顆粒細(xì)胞，內(nèi)可見(jiàn)多個(gè)自噬小體———圓形或橢圓形的膜結(jié)構(gòu)，膜內(nèi)包裹密度不....

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