[目的]探討咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)對3T3-L1小鼠成纖維細(xì)胞(前脂肪細(xì)胞)向脂肪細(xì)胞分化的抑制作用并闡明其作用機制。[方法]3T3-L1前脂肪細(xì)胞用含10%小牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)。用0.5μM的異丁基甲基黃嘌呤,1μM的地塞米松及10μg/mL胰島素誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化成脂肪細(xì)胞。采用油紅O染色細(xì)胞內(nèi)的脂滴,測定甘油三酯(TG)的含量,測定甘油-3-磷酸脫氫酶(GPDH)的活性,采用熒光素酶活性測定、逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)和蛋白質(zhì)印跡(Western blot)等方法研究了 2.5-10μM CAPE對3T3-L1前脂肪細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化的抑制作用及對特定脂肪生成因子表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。[結(jié)果]CAPE顯著抑制脂滴的積累,顯著地降低了細(xì)胞中TG含量和GPDH的活性,并呈劑量依賴性,顯示CAPE有效地抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞向脂肪細(xì)胞的分化,具有潛在的抗肥胖作用;CAPE濃度依賴的方式顯著降低了過氧化體增殖物活化型受體-γ(PPAR-γ)和CCAAT/增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)的mRNA...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1咖啡酸苯乙酯對脂肪細(xì)胞分化的影響注:﹡﹡P＜0.01

文見第4－7頁注:﹡﹡P＜0.01，﹡﹡﹡P＜0.001圖1咖啡酸苯乙酯對脂肪細(xì)胞分化的影響注:﹡﹡P＜0.01，﹡﹡﹡P＜0.001圖2咖啡酸苯乙酯對脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響附頁2錦州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報2019年2月，40(1)

圖2咖啡酸苯乙酯對脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響注:﹡﹡P＜0.01

文見第4－7頁注:﹡﹡P＜0.01，﹡﹡﹡P＜0.001圖1咖啡酸苯乙酯對脂肪細(xì)胞分化的影響注:﹡﹡P＜0.01，﹡﹡﹡P＜0.001圖2咖啡酸苯乙酯對脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響附頁2錦州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報2019年2月，40(1)

圖4咖啡酸苯乙酯抑制脂肪細(xì)胞分化作用機制模式圖

圖3咖啡酸苯乙酯對TGF－β/Smad2、3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響圖4咖啡酸苯乙酯抑制脂肪細(xì)胞分化作用機制模式圖錦州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報2019年2月，40(1)附頁3

圖２咖啡酸苯乙酯對脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響??注：＊表示，＊＊尸＜０．０１，＊＊＊尸＜０．００１??

ＳＣＤ－１、ＬＰＬ）等在ｍＲＮＡ水平上的表達(dá)。其中ＰＰＡＲ－ｙ和Ｃ／ＥＢＰｃｔ在脂??肪生成中發(fā)揮重要作用［１８］，可以通過反式激活ＦＡＳ在內(nèi)的及其下游脂肪??細(xì)胞特異基因的表達(dá)而促進分化［１３］。圖２Ａ結(jié)果所示，ＣＡＰＥ濃度依賴型??的顯著抑制ＰＰＡＲ－ｙ和Ｃ／ＥＢＰａ的ｍＲＮ....

本文編號：3978817