本實驗中所用肉蓯蓉苯乙醇苷(Phenylethanoid Glycoside-rich extract from Cistanche deserticola,PhG-RE)是提取自列當(dāng)科藥用植物肉蓯蓉中的一類化學(xué)成分。前期研究發(fā)現(xiàn)PhG-RE能夠?qū)θ毖俟嘧⒁鸬男募〖?xì)胞凋亡發(fā)揮良好的保護(hù)作用,然而究其對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用是否與調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡機制有關(guān)尚未得到證實。故本實驗通過使用H₂O₂誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞發(fā)生ERS,建立細(xì)胞損傷模型,觀察PhG-RE預(yù)處理對ERS引起心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及相關(guān)分子機制。研究內(nèi)容如下:1.實驗方法:分別使用濃度為50、100、150、200、250和300μg·mL^-1的PhG-RE處理H9c2細(xì)胞24 h,通過CCK-8法檢測不同濃度PhG-RE對細(xì)胞存活的影響,用以確定安全的藥物濃度范圍;根據(jù)藥物安全濃度范圍設(shè)置藥物濃度梯度,選擇濃度為50、100、150、200及250μg·mL^-1的P...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮寫表
第1篇 緒論 綜述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在心血管疾病中的研究及概述
    1.1 引言
    1.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)概述
    1.3 未折疊的蛋白質(zhì)反應(yīng)
    1.4 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子概述
        1.4.1 促凋亡CCAAT/增強子結(jié)合蛋白同源蛋白
        1.4.2 c-Jun氨基端激酶
        1.4.3 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-
    1.5 心血管疾病與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷
        1.5.1 缺血性心臟病
        1.5.2 心力衰竭
        1.5.3 糖尿病性心臟病
第2篇 肉蓯蓉苯乙醇苷對H₂O₂誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起心肌細(xì)胞凋亡的拮抗作用及機制研究
    第1章
        1.1 引言
        1.2 材料與方法
            1.2.1 主要藥品試劑與實驗設(shè)備
            1.2.2 主要實驗設(shè)備
        1.3 實驗藥物及試劑的配制
        1.4 實驗方法
            1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)及處理
            1.4.2 CCK-8 法檢測細(xì)胞存活率
            1.4.3 實驗分組及處理
            1.4.4 乳酸脫氫酶(LDH)活性測定
            1.4.5 Annexin V/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)檢測心肌細(xì)胞的凋亡
            1.4.6 RT-qPCR檢測H9c2 心肌細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷凋亡機制相關(guān)基因的表達(dá)
            1.4.7 Western Blot檢測H9c2 心肌細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷凋亡機制相關(guān)蛋白的表達(dá)
            1.4.8 統(tǒng)計方法
        1.5 實驗結(jié)果
            1.5.1 CCK-8 法檢測各組間H9c2 細(xì)胞存活率
            1.5.2 PhG-RE對 H2O2 誘導(dǎo)細(xì)胞損傷LDH釋放量的影響
            1.5.3 Annexin V/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)檢測心肌細(xì)胞的凋亡
            1.5.4 RT-qPCR檢測H9c2 心肌細(xì)胞中ERS損傷凋亡機制相關(guān)基因(GRP78?CHOP?JNK及 Caspase-12)m RNA的表達(dá)
            1.5.5 免疫印跡試驗檢測H9c2 心肌細(xì)胞中ERS損傷凋亡機制相關(guān)蛋白(GRP78?CHOP?p-JNK及 Caspase-12)的表達(dá)
    第2章 討論
    第3章 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性
參考文獻(xiàn)
作者簡介及在學(xué)期間取得科研成果
致謝



本文編號：3975943