發(fā)布時間：2024-03-30 01:01

　　目的確定龍膽瀉肝湯對人角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT細(xì)胞內(nèi)STAT3通路的影響,探討JAK-STAT3信號通路與龍膽瀉肝湯治療銀屑病機(jī)制的相關(guān)性。方法使用Western blot檢測細(xì)胞STAT3蛋白的表達(dá)情況,實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測STAT3 mRNA的表達(dá),熒光素酶報告基因檢測STAT3的轉(zhuǎn)錄功能。結(jié)果龍膽瀉肝湯藥物處理組HaCaT細(xì)胞STAT3總蛋白以及磷酸化蛋白水平均有明顯下降,細(xì)胞核內(nèi)的STAT3的表達(dá)也有明顯降低;龍膽瀉肝湯作用后HaCaT細(xì)胞內(nèi)STAT3的轉(zhuǎn)錄功能明顯下降;實時定量PCR結(jié)果顯示龍膽瀉肝湯處理細(xì)胞內(nèi)STAT3的mRNA略有升高。結(jié)論龍膽瀉肝湯能有效抑制HaCaT細(xì)胞內(nèi)STAT3信號通路的活性,其機(jī)制可能與轉(zhuǎn)錄后水平抑制STAT3的表達(dá)有關(guān)。

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圖1龍膽瀉肝湯抑制HaCaT細(xì)胞內(nèi)總蛋白水平以及磷酸化STAT3水平的表達(dá)

為了明確龍膽瀉肝湯對HaCaT細(xì)胞內(nèi)STAT3通路的影響，筆者首先利用Westernblot檢測了龍膽瀉肝湯處理后HaCaT細(xì)胞內(nèi)STAT3的表達(dá)。龍膽瀉肝湯處理HaCaT細(xì)胞48h后，提取總蛋白檢測。結(jié)果顯示與對照組相比，龍膽瀉肝湯處理后細(xì)胞內(nèi)活性STAT3的標(biāo)志-Try7....

圖4龍膽瀉肝湯對STAT3mRNA表達(dá)的影響

圖3龍膽瀉肝湯對STAT3轉(zhuǎn)錄活性的影響3討論

圖2龍膽瀉肝湯抑制HaCaT細(xì)胞核內(nèi)STAT3的表達(dá)

STAT3磷酸化激活后，需要進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子功能，激活下游靶基因的表達(dá)。為了明確龍膽瀉肝湯是否能夠抑制STAT3在細(xì)胞核內(nèi)的含量，筆者提取了龍膽瀉肝湯處理HaCaT細(xì)胞的核蛋白進(jìn)行Westernblot。結(jié)果顯示與對照組相比，龍膽瀉肝湯處理48h的細(xì)胞核內(nèi)STAT3表達(dá)....

圖3龍膽瀉肝湯對STAT3轉(zhuǎn)錄活性的影響

利用實時定量PCR，筆者分析了龍膽瀉肝湯對STAT3mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，與對照組相比，龍膽瀉肝湯處理后48h,HaCaT細(xì)胞內(nèi)STAT3mRNA的有略微的升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.35），見圖4。圖4龍膽瀉肝湯對STAT3mRNA表達(dá)的影響

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