目的研究大黃素促進(jìn)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116細(xì)胞凋亡的作用及其分子機(jī)制。方法通過CCK8法檢測大黃素對細(xì)胞活力的影響,并計算出IC₅₀。Annexin-V/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期和熒光探針DCF-DA細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的水平,Western blot法檢測Bax、Bcl-2、p-ERK1/2、ERK1/2和c-Myc的表達(dá)。結(jié)果不同濃度的大黃素抑制HCT116細(xì)胞的活力,并且具有濃度依賴性。大黃素將HCT116細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期(P<0.05),并且能夠明顯誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生(P<0.01),Western blot結(jié)果顯示大黃素能夠引起B(yǎng)ax/Bcl-2表達(dá)的上調(diào),p-ERK1/2和c-Myc表達(dá)的降低(P<0.05)。結(jié)論大黃素可以通過上調(diào)Bax/Bcl-2,下調(diào)c-Myc和p-ERK/ERK的表達(dá)從而促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的凋亡,阻滯細(xì)胞周期和增加ROS的產(chǎn)生。

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 藥物
        1.1.2 細(xì)胞株
        1.1.3 主要試劑
        1.1.4 主要儀器
    1.2 方法
        1.2.1 CCK8法測定大黃素對HCT116細(xì)胞活力的影響
        1.2.2 Annexin-V/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測大黃素對HCT116細(xì)胞凋亡的影響
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測大黃素對HCT116細(xì)胞周期的影響
        1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測大黃素對HCT116細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響
        1.2.5 Western blot檢測大黃素對HCT116細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大黃素抑制HCT116細(xì)胞增殖
    2.2 大黃素對HCT116細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 大黃素對HCT116細(xì)胞周期的影響
    2.4 大黃素對HCT116細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響
    2.5 大黃素對HCT116細(xì)胞中Bax/Bcl-2、c-Myc、p-ERK/ERK蛋白表達(dá)的影響
3 討論



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