目的:探討健脾補(bǔ)土組方對體外神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)低氧/復(fù)氧損傷后的凋亡情況以及PI3K、AKT、caspase3、caspase8表達(dá)的影響。方法:原代分離新生SD鼠神經(jīng)元,接種于六孔板中培養(yǎng),并分為正常血清對照組、正常血清+低氧組、低氧+正常血清+神經(jīng)生長因子組、低氧+健脾補(bǔ)土組方含藥血清組。采用培養(yǎng)箱低氧/復(fù)氧的方法誘導(dǎo)神經(jīng)元以形成腦缺血再灌注損傷模型,將后三組標(biāo)本放入37℃三氣培養(yǎng)箱中,低氧誘導(dǎo)24h后,恢復(fù)正常條件培養(yǎng)4h。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測神經(jīng)元凋亡情況,RT-q PCR法檢測PI3K、AKT、caspase3、caspase8 m RNA的表達(dá),免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western blot法檢測PI3K、AKT、caspase3、caspase8蛋白的表達(dá)。結(jié)果:(1)神經(jīng)元凋亡率:與正常對照組相比,低氧模型組神經(jīng)元凋亡率顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);與低氧模型組比較,神經(jīng)因子組、健脾補(bǔ)土組神經(jīng)元凋亡率均顯著減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);與神經(jīng)生長因子組比較,健脾補(bǔ)土組神經(jīng)元凋亡率顯著減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01).(2)PI3K、AK...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖6PI3K-AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路圖

圖6PI3K-AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路圖本實驗研究結(jié)果表明，與正常對照組比較，模型組神經(jīng)元凋亡率顯著升高，而PI3K、AKTmRNA及蛋白表達(dá)顯著降低。與模型組比較，健脾補(bǔ)土組與神經(jīng)因

圖7Caspase家族在細(xì)胞凋亡中的信號傳導(dǎo)本實驗研究結(jié)果表明，與正常對照組比較，模型組神經(jīng)元凋亡率顯著升高，

圖7Caspase家族在細(xì)胞凋亡中的信號傳導(dǎo)本實驗研究結(jié)果表明，與正常對照組比較，模型組神經(jīng)元凋亡率顯著升高，而Caspase3、Caspase8mRNA及蛋白表達(dá)顯著增加。與模型組比較，健脾補(bǔ)土組

圖1細(xì)胞培養(yǎng)

圖1細(xì)胞培養(yǎng)

圖2免疫細(xì)胞化學(xué)法細(xì)胞鑒定(×400)

29圖2免疫細(xì)胞化學(xué)法細(xì)胞鑒定(×400)

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