發(fā)布時間：2024-03-06 04:12

　　目的:用血清藥理學方法研究不同濃度黃芪補陽還五湯對TLR4及LOX-1的表達影響,探討不同濃度黃芪補陽還五湯防治動脈粥樣硬化的機制。方法:1.12只體重為2kg±0.5kg的實驗用雄性普通級家兔隨機分為空白組、中藥高、中、低劑量組,每組3只,分別以生理鹽水和高、中、低濃度黃芪的補陽還五湯灌胃,每日一次,連續(xù)7天。于末次灌胃給藥1h后,心臟采血,離心后抽取上清液,并用0.22μm一次性濾器無菌過濾,置-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?.在無菌條件下,復蘇第三代人臍靜脈內(nèi)皮細胞,在37℃、5%C02條件下培養(yǎng)。3.人臍靜脈內(nèi)皮細胞,隨機分為6組,即正常組,模型組,西藥對照組,含高、中、低濃度黃芪的補陽還五湯組,用LPS(1μg/ml)刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞,激活TLR4和LOX-1,并用不同濃度黃芪的補陽還五湯含藥血清和阿托伐他汀進行干預,24h后收集細胞。用蛋白免疫印跡方法檢測TLR4和LOX-1的蛋白表達。結果:經(jīng)LPS刺激24h以后,模型組細胞TLR4及LOX-1蛋白表達明顯升高(與空白組比較P<0.01);經(jīng)藥物干預后各治療組細胞TLR4及LOX-1的蛋白明顯下降,其中西藥對照組效果最...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗藥物
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 主要設備和儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗分組
        2.2.2 含藥血清的制備
        2.2.3 人臍靜脈傳代內(nèi)皮細胞的復蘇和培養(yǎng)
        2.2.4 細胞計數(shù)
        2.2.5 分組干預
        2.2.6 蛋白免疫印跡方法
            (1) 主要試劑
            (2) 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的蛋白提取
            (3) 蛋白定量和變性
            (4) 分離膠和濃縮膠的制備
            (5) 具體的電泳操作方法與步驟為:
            (6) 轉膜和操作
            (7) 孵育和顯影
            (8) 量化分析
            (9) 統(tǒng)計學方法
第三章 結果
    3.1 含藥血清制備
    3.2 人臍靜脈傳代內(nèi)皮細胞
    3.3 蛋白免疫印跡法檢測TLR4的表達的影響
    3.4 蛋白免疫印跡法檢測Lox-1的表達的影響
第四章 討論
    4.1 TLR4與動脈粥樣硬化的關聯(lián)
    4.2 內(nèi)皮細胞與動脈粥樣硬化的關聯(lián)
    4.3 中藥含藥血清的研究
    4.4 陽性對照組的選擇
    4.5 中醫(yī)“氣能行血”干預機理
    4.6 不同濃度黃芪的補陽還五湯對TLR4及LOX-1的影響
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3920533