目的:探究雷公藤紅素對人肺癌H460細(xì)胞的體外抑制作用。方法:使用MTT法檢測雷公藤紅素對H460細(xì)胞生長的影響;使用細(xì)胞集落實(shí)驗(yàn)檢測雷公藤紅素對H460細(xì)胞集落形成的影響;采用細(xì)胞流式儀檢測雷公藤紅素及雷公藤紅素聯(lián)用N-乙酰半胱氨酸(NAC)對活性氧(ROS)水平的影響;采用MTT法檢測雷公藤紅素聯(lián)用NAC對H460細(xì)胞生長的影響;蛋白質(zhì)印跡法檢測雷公藤紅素及聯(lián)用NAC后對凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax的表達(dá)水平影響。同時(shí),進(jìn)一步使用蛋白質(zhì)印跡法檢測雷公藤紅素對核因子κB(NF-κB)通路中IκBα表達(dá)水平的影響。結(jié)果:雷公藤紅素濃度依賴性的抑制H460細(xì)胞的生長和集落形成(P<0.05或P<0.01),濃度依賴性的促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)ROS水平(P<0.01),同時(shí)能夠通過升高ROS水平誘導(dǎo)H460細(xì)胞死亡(P<0.01),升高Bax蛋白及抑制Bcl-2蛋白的表達(dá)(P<0.05或P<0.01或P<0.001),促進(jìn)IκBα的表達(dá)(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:雷公藤紅素表現(xiàn)出高效抗肺癌作用,能升高ROS水平介導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)以及...

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圖1雷公藤紅素對H460細(xì)胞生長的影響

不同濃度(0,0.5,1,1.5和2.5μmol·L-1)的雷公藤紅素對H460細(xì)胞的抑制呈濃度依賴性(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見圖1。2.2雷公藤紅素抑制H460細(xì)胞集落的形成

圖2雷公藤紅素對H460細(xì)胞集落形成的影響

用不同濃度(0.5,1.5,2.5μmol·L-1)的雷公藤紅素處理H460細(xì)胞后，ROS水平呈濃度依賴性升高(P<0.01)。見圖3Ⅰ。使用NAC檢測其對雷公藤紅素介導(dǎo)的ROS水平影響，當(dāng)NAC和雷公藤紅素(2.5μmol·L-1)聯(lián)合使用后，NAC有效降低H460細(xì)胞內(nèi)ROS....

圖3雷公藤紅素升高ROS對H460細(xì)胞死亡的影響

相比于對照組，在不同濃度(0.5,1.5和2.5μmol·L-1)雷公藤紅素作用下，促凋亡蛋白Bax表達(dá)隨雷公藤紅素濃度的增加而增加(P<0.05或P<0.01或P<0.001)，而抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)隨雷公藤紅素濃度的增加而降低(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見圖4。2....

圖4雷公藤紅素對細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的影響

與雷公藤紅素處理組相比，聯(lián)用NAC和雷公藤紅素后的促凋亡蛋白Bax表達(dá)水平降低(P<0.01或P<0.001)，同時(shí)抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)升高(P<0.01)。見圖5。圖5雷公藤紅素升高ROS對H460細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的影響

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