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新型蝎毒多肽類鈉通道調(diào)制劑的分離純化與細胞電生理功能初探

發(fā)布時間:2024-02-24 23:32
  東亞鉗蝎在我國分布廣泛,其中陜北黃土高原由于地理環(huán)境獨特,造就了豐富的蝎資源。蝎子作為傳統(tǒng)中藥材,有著悠久的應(yīng)用歷史,但對其藥效組分及藥效機理仍知之甚少,F(xiàn)代研究表明,蝎子的藥用價值主要在于含有大量神經(jīng)毒素的蝎毒多肽,蝎毒多肽能夠特異性作用于鈉通道,影響通道的門控特性,而鈉通道在生理和病理過程中發(fā)揮重要作用,所以,蝎毒多肽作為鈉通道門控調(diào)節(jié)劑具有研究價值;诖,本論文利用色譜分離純化技術(shù)從蝎粗毒中獲得系列單一活性多肽組分,再利用全細胞膜片鉗技術(shù)記錄檢測不同活性多肽組分對鈉通道的調(diào)控作用。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:(1)蝎毒多肽的分離純化及分子量測定蝎粗毒通過SephadexTM G-50 Fine凝膠色譜柱等度洗脫,獲得三個色譜峰,分別命名為H-1、H-2和H-3。H-2經(jīng)反相高效液相Atlantis T3柱梯度洗脫,獲得28個色譜峰。其中H-2-10H-2-15六個組分各自再經(jīng)反相高效液相分析純化后共獲得14個單體組分。其中5個得率和純度較高的單體組分,冷凍干燥后用電噴霧離子化質(zhì)譜(ESI-MS)技術(shù)測定分別得到了分子量為3766 Da和3...

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1電壓門控鈉通道亞基的主要結(jié)構(gòu)

圖1-1電壓門控鈉通道亞基的主要結(jié)構(gòu)

圖1-1電壓門控鈉通道亞基的主要結(jié)構(gòu)Fig.1-1Theprimarystructuresofthesubunitsofthevoltage-gatedsodiumchannels表1-1哺乳動物鈉通道α亞基Tab.1-1Mammalian....


圖1-2鈉通道受體位點示意圖

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圖1-2鈉通道受體位點示意圖[59]Fig.1-2Sodiumchannelreceptorsite鈉通道神經(jīng)毒素結(jié)合位點1是由四個結(jié)構(gòu)域中鏈接S5~S6的P區(qū)構(gòu)成,是河豚毒素(TTX)和蛤蚌毒素(STX)還有μ-芋螺毒素的結(jié)合位點。雖然TTX和....


圖2-1蝎粗毒SephadexG-50分子篩的分離Fig.2-1SeparationofCrudePoisonSephadexG-50MolecularSieve注:等度洗脫,流動相為0.05mol/L乙酸銨,流速為2mL/min,280nm紫外檢測

圖2-1蝎粗毒SephadexG-50分子篩的分離Fig.2-1SeparationofCrudePoisonSephadexG-50MolecularSieve注:等度洗脫,流動相為0.05mol/L乙酸銨,流速為2mL/min,280nm紫外檢測

圖2-1蝎粗毒SephadexG-50分子篩的分離Fig.2-1SeparationofCrudePoisonSephadexG-50MolecularSieve注:等度洗脫,流動相為0.05mol/L乙酸銨,流速為2mL/min,280n....


圖2-2條件優(yōu)化前H-2的HPLC圖譜

圖2-2條件優(yōu)化前H-2的HPLC圖譜

圖2-2條件優(yōu)化前H-2的HPLC圖譜Fig.2-3HPLCchromatogramofH-2beforeconditionoptimization



本文編號:3909732

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