DNA復(fù)制叉(DNAreplication fork)是DNA復(fù)制的基本結(jié)構(gòu),它的完整性對基因組穩(wěn)定性的維持至關(guān)重要,直接決定了細胞的命運。在機體內(nèi)外各種復(fù)制壓力的作用下,DNA復(fù)制叉極易受到干擾,產(chǎn)生損傷,導(dǎo)致DNA復(fù)制停滯。嚴重者可以影響基因組的穩(wěn)定性,誘發(fā)細胞的癌變、凋亡、壞死等。DNA復(fù)制叉穩(wěn)定性的維持是一個錯綜復(fù)雜的過程,需要多種DNA損傷修復(fù)蛋白的參與。X 線修復(fù)交錯互補基因 1(X-ray repair cross complementing gene 1,XRCC1)是一個重要的DNA損傷修復(fù)基因。它的編碼蛋白XRCC1主要由3個結(jié)構(gòu)域組成,即氨基端的結(jié)構(gòu)域(NTD,1-183氨基酸區(qū)域)、羧基端的乳腺癌易感基因羧基端2結(jié)構(gòu)域(BRCT II)、中間的乳腺癌易感基因羧基端1結(jié)構(gòu)域(BRCT I)。XRCC1可以借助其結(jié)構(gòu)域與DNA聚合酶β、DNA連接酶3α等多種DNA損傷修復(fù)蛋白結(jié)合。XRCC1主要參與DNA的單鏈損傷修復(fù)(Single strand break repair,SSBR)和堿基切除修復(fù)(Base excision repair,BER)。已有研究表明,X...

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【學(xué)位級別】：博士

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圖１．３．１在ＤＮＡ復(fù)制壓力作用下，ＸＲＣＣＩ募集到ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處

圖１．３．１在ＤＮＡ復(fù)制壓力作用下，ＸＲＣＣＩ募集到ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處。（Ａ）在??ＨＵ的作用下，ＧＦＰ－ＸＲＣＣ１焦點陽性的細胞百分比增加；（Ｂ）?ＸＲＣＣ１焦點與??ＥｄＵ共定位情況；（Ｃ）?Ｘ民ＣＣ１焦點只在Ｃｙｃｌｉｎ－Ａ陽性的細胞中表達。??１９??

圖１．３．２?ＸＲＣＣｌ的募集受ＰＡＲＰｌ的調(diào)控

浙江大學(xué)博±學(xué)位論文?第一部分??１．３．２在ＰＡＲＰ１的調(diào)控作用下，ＸＲＣＣ１聚集到ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處??在ＤＮＡ單鏈損傷修復(fù)通路中，ＰＡＲＰ１酶居于ＸＲＣＣ１的上游；旦己有研表明，ＰＡＲＰ１可Ｗ保護停滯的ＤＮＡ復(fù)制叉。為了探討ＸＲＣＣ１在ＤＮＡ復(fù)制叉滯處的聚集是否受ＰＡＲＰ１....

圖１．３．３?ＸＲＣＣｌ保護ＤＮＡ復(fù)制叉的穩(wěn)定性，促進ＤＮＡ復(fù)制叉停滯的重新后動

浙江大學(xué)博±學(xué)位論文?第一部分??的重新啟動情況。如果停滯的ＤＮＡ復(fù)制叉無法重啟，當我們棄去ＨＵ，不會再有??新的綠色巧光標記的ＤＮＡ復(fù)制出現(xiàn)（如圖１．３．３Ａ）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與ＥＭ９－Ｖ細胞??相比，ＥＭ９－ＸＨ細胞的ＤＮＡ復(fù)制叉停滯百分比顯著降低；反之，說明與ＥＭ９－Ｖ??細胞....

圖１．３．４?ＸＲＣＣｌ在ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處的聚集促進細胞的存活

±學(xué)位論文?第ＨＵ的作用下，ＸＲＣＣ１促進細胞的存活??檢測ＸＲＣＣ１在ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處的聚集對細胞存活的影響。我１００，?２００?ｕＭ?）干預(yù)ＥＭ９－Ｖ細胞和ＥＭ９－ＸＨ細胞２４ｈ，然后進行克測細胞的增殖。結(jié)果發(fā)現(xiàn)；與ＥＭ９－ＸＨ細胞先比，隨著藥物濃度的細胞的克隆形成受到的抑....

本文編號：3897817