糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic Retinopathy,DR)是最為多見的糖尿病并發(fā)癥,也是成年人獲得性致盲的一種主要原因。在疾病早期,視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞在高血糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激刺激下發(fā)生活化,大量表達(dá)血管生長因子及促炎因子。通過膳食補(bǔ)充抗氧化劑是預(yù)防及緩解糖尿病視網(wǎng)膜病變的重要手段,葡萄籽提取物(Grape Seed Extract,GSE)中富含多酚類化合物,具有很強(qiáng)的抗氧化、抗炎作用,但其抑制糖尿病視網(wǎng)膜炎癥反應(yīng)的作用及機(jī)制尚未闡明。本文通過構(gòu)建高糖誘導(dǎo)視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞活化模型、糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠模型,研究葡萄籽提取物對(duì)高糖刺激視網(wǎng)膜Müller炎癥反應(yīng)的抑制作用,探討葡萄籽提取物對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變的保護(hù)作用及機(jī)制。主要研究內(nèi)容及結(jié)果包括:1.葡萄籽提取物對(duì)高糖誘導(dǎo)原代培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的炎癥反應(yīng)具有顯著的抑制作用。Real-time PCR和ELISA檢測(cè)結(jié)果表明,10μg/mL GSE能夠顯著抑制高糖誘導(dǎo)Müller細(xì)胞表達(dá)、分泌血管內(nèi)皮生長因子(VEGF);此外,GSE顯著降低促炎因子IL-6和Müller細(xì)胞活化標(biāo)志性分子GFAP在mRNA水平的...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 糖尿病視網(wǎng)膜病變
        1.1.1 糖尿病視網(wǎng)膜病變概述
        1.1.2 糖尿病視網(wǎng)膜病變與視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞
    1.2 葡萄籽提取物
        1.2.1 葡萄籽提取物主要成分及其生物活性
        1.2.2 低聚原花青素及其生物活性
    1.3 課題的研究內(nèi)容及研究意義
第二章 葡萄籽提取物對(duì)高糖誘導(dǎo)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞炎癥反應(yīng)抑制作用
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 主要材料與試劑
        2.2.2 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 原代培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞鑒定
        2.3.3 不同濃度葡萄糖處理大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞模型
        2.3.4 Müller細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 ELISA檢測(cè)VEGF表達(dá)
        2.3.6 Real-time PCR檢測(cè)基因表達(dá)
        2.3.7 數(shù)據(jù)處理
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 原代培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞免疫熒光鑒定
        2.4.2 培養(yǎng)基中糖濃度對(duì)Müller細(xì)胞表達(dá)VEGF的影響
        2.4.3 葡萄籽提取物對(duì)高糖刺激Müller細(xì)胞表達(dá)炎癥因子的影響
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 葡萄籽提取物對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織損傷的保護(hù)作用及機(jī)制
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.2 主要材料與試劑
        3.2.3 主要儀器
    3.3 研究方法
        3.3.1 糖尿病大鼠模型的建立與評(píng)估
        3.3.2 動(dòng)物分組干預(yù)
        3.3.3 動(dòng)物標(biāo)本采集
        3.3.4 視網(wǎng)膜組織切片HE染色
        3.3.5 大鼠視網(wǎng)膜組織Real-time PCR檢測(cè)
        3.3.6 視網(wǎng)膜組織切片免疫組化分析
        3.3.7 視網(wǎng)膜組織切片免疫熒光分析
        3.3.8 數(shù)據(jù)處理
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 糖尿病大鼠模型的構(gòu)建及葡萄籽提取物對(duì)血糖、體重的影響
        3.4.2 葡萄籽提取物對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)的影響
        3.4.3 葡萄籽提取物對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)Müller細(xì)胞活化的影響
        3.4.4 葡萄籽提取物對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)炎癥因子表達(dá)的影響
        3.4.5 葡萄籽提取物對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)機(jī)制探討
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 主要結(jié)論
    4.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
附錄1 葡萄籽提取物的成分檢測(cè)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表、錄用的論文



本文編號(hào)：3877551