癌細(xì)胞與正常細(xì)胞相比,呈現(xiàn)出許多不同的生化特征,例如過(guò)度表達(dá)的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferases,GSTs)和升高的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。一方面,癌細(xì)胞可利用高表達(dá)的GSTs實(shí)現(xiàn)其耐藥性,因此,發(fā)展GSTs抑制劑作為敏化劑是一種克服癌細(xì)胞多藥耐藥性的有效策略。另一方面,癌細(xì)胞利用提高水平的ROS來(lái)維持其惡性表型,同時(shí)也更加依賴于一種還原適應(yīng)的機(jī)制控制ROS水平的進(jìn)一步提高,避免達(dá)到“ROS死亡閾值”。也正因?yàn)槿绱?癌細(xì)胞更加容易受損于進(jìn)一步ROS的生成。癌細(xì)胞既依賴又受損于ROS生成的矛盾角色被稱之為“成也蕭何,敗也蕭何”(live by the sword,die by the sword)(Cancer cells,2006,10,175)。癌細(xì)胞的這一特征衍生出一種與傳統(tǒng)的抗氧化治療完全相反的促氧化抗癌策略:通過(guò)促進(jìn)胞內(nèi)ROS的生成,實(shí)現(xiàn)選擇性殺死癌細(xì)胞。親電性和親核性的概念是有機(jī)化學(xué)的基礎(chǔ)理論之一。一個(gè)親核體的親核中心進(jìn)攻另一個(gè)親電體的親電中心構(gòu)筑了一個(gè)新共價(jià)鍵。然而,在自然界中,親電體和親...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
第一章 研究背景
    1.1 癌癥-世界性難題
    1.2 癌癥及其耐藥性
        1.2.1 GSTs的分類
        1.2.2 GSTs的結(jié)構(gòu)
        1.2.3 GSTs的功能
        1.2.4 GSTs抑制劑研究進(jìn)展
    1.3 癌癥與氧化應(yīng)激
        1.3.1 ROS—生命過(guò)程中的“兩面性”物質(zhì)
        1.3.2 ROS與氧化應(yīng)激
        1.3.3 ROS的產(chǎn)生
        1.3.4 促氧化策略
    1.4 癌癥與自噬
        1.4.1 自噬的機(jī)制
        1.4.2 自噬與癌治療
        1.4.3 自噬激活劑/抑制劑研究進(jìn)展
    1.5 課題設(shè)計(jì)依據(jù)及其意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 基于親電修飾的策略設(shè)計(jì)蓽茇酰胺導(dǎo)向的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶抑制劑
    2.1 引言
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 蓽茇酰胺及其類似物的合成
        2.2.2 蓽茇酰胺及其類似物對(duì)馬肝GST的抑制活性及構(gòu)效關(guān)系
        2.2.3 測(cè)定蓽茇酰胺及其類似物對(duì)馬肝GST抑制的IC50值
        2.2.4 蓽茇酰胺及其類似物的親電性貢獻(xiàn)于它們的GST抑制的活性
        2.2.5 化合物的幾何構(gòu)象影響了它們的GST抑制活性和親電性
        2.2.6 PL-13 通過(guò)抑制馬肝GST的G-位點(diǎn)導(dǎo)致其失活
        2.2.7 PL-13 以Michael受體單元依賴的方式實(shí)現(xiàn)對(duì)順鉑耐藥的肺癌A549細(xì)胞的敏化
        2.2.8 PL-13 憑借其Michael受體單元抑制A549細(xì)胞內(nèi)的GSTs來(lái)克服細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥
    2.3 小結(jié)
    2.4 材料與方法
        2.4.1 儀器與試劑
        2.4.2 蓽茇酰胺及其類似物對(duì)馬肝GST抑制活性篩選
        2.4.3 測(cè)定蓽茇酰胺及其類似物與半胱胺反應(yīng)的速率常數(shù)k2值
        2.4.4 PL-13 對(duì)馬肝GST抑制機(jī)理及抑制常數(shù)(Ki)的測(cè)定
        2.4.5 GSTs熒光探針DNs-CV的合成
        2.4.6 化合物細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià)
        2.4.7 可視化細(xì)胞內(nèi)GSTs活性
        2.4.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    參考文獻(xiàn)
第三章 基于親電性的促氧化策略設(shè)計(jì)蓽茇酰胺導(dǎo)向的細(xì)胞自噬性死亡激活劑
    3.1 引言
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 細(xì)胞毒性及其構(gòu)效關(guān)系
        3.2.2 化合物的親電性在一定程度上影響了它們的細(xì)胞毒性
        3.2.3 PL-13 以Michael受體單元依賴的方式誘導(dǎo)U2OS自噬性細(xì)胞死亡
        3.2.4 PL-13 以Michael受體單元依賴的方式激活MAPKs通路從而激活U2OS細(xì)胞自噬
        3.2.5 PL-13 以Michael受體單元依賴的方式誘導(dǎo)H₂O₂的富集
        3.2.6 PL-13 激活U2OS細(xì)胞中MAPKs通路是通過(guò)H₂O₂的富集來(lái)實(shí)現(xiàn)的
        3.2.7 PL-13 誘導(dǎo)的H₂O₂的富集導(dǎo)致U2OS細(xì)胞自噬性死亡
    3.3 小結(jié)
    3.4 材料與方法
        3.4.1 材料與試劑
        3.4.2 化合物合成
        3.4.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.4.4 化合物的細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià)
        3.4.5 測(cè)定胞內(nèi)ROS的含量
        3.4.6 蛋白印跡法測(cè)定胞內(nèi)蛋白的表達(dá)水平
        3.4.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    參考文獻(xiàn)
第四章 姜黃素導(dǎo)向的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶抑制劑的設(shè)計(jì)和構(gòu)效關(guān)系研究
    4.1 引言
    4.2 結(jié)果與討論
        4.2.1 化合物合成
        4.2.2 姜黃素及其類似物作為GST抑制劑的構(gòu)效關(guān)系
        4.2.3 GST抑制活性的影響因素：親電性和幾何構(gòu)型
        4.2.4 NC-3 對(duì)順鉑耐藥的A549細(xì)胞的敏化
        4.2.5 NC-3 與順鉑以協(xié)同作用的方式誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡
        4.2.6 NC-3憑借其Michael受體單元抑制順鉑耐藥的A549細(xì)胞內(nèi)的GSTs來(lái)實(shí)現(xiàn)敏化效果
        4.2.7 NC-3 能夠通過(guò)抑制A549細(xì)胞內(nèi)的GSTM1來(lái)活化ASK1-JNK/p38信號(hào)通路從而增強(qiáng)順鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
    4.3 小結(jié)
    4.4 材料與方法
        4.4.1 儀器與試劑
        4.4.2 CP和CH系列姜黃素類似物的合成及其譜圖數(shù)據(jù)
        4.4.3 姜黃素及其類似物對(duì)馬肝GST抑制活性的測(cè)定
        4.4.4 姜黃素及其類似物親電性的評(píng)價(jià)(k2值的測(cè)定)
        4.4.5 姜黃素及其類似物和順鉑在A549細(xì)胞內(nèi)的協(xié)同作用
        4.4.6 可視化細(xì)胞內(nèi)GSTs活性
        4.4.7 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        4.4.8 蛋白印跡法測(cè)定胞內(nèi)蛋白的表達(dá)水平
        4.4.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    參考文獻(xiàn)
第五章 基于親電性的促氧化策略設(shè)計(jì)姜黃素導(dǎo)向的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑和自噬性死亡激活劑
    5.1 引言
    5.2 結(jié)果和討論
        5.2.1 單羰基姜黃素類似物的合成
        5.2.2 單羰基姜黃素類似物對(duì)NCI-H460細(xì)胞的毒性和構(gòu)效關(guān)系
        5.2.3 穩(wěn)定性和親電性的提高貢獻(xiàn)于CNH-3 的細(xì)胞毒性
        5.2.4 CNH-3 以Michael受體單元依賴的方式誘導(dǎo)NCI-H460細(xì)胞凋亡
        5.2.5 CNH-3 以Michael受體依賴的方式誘導(dǎo)NCI-H460細(xì)胞自噬性死亡
        5.2.6 CNH-3 憑借其Michael受體單元誘導(dǎo)NCI-H460細(xì)胞內(nèi)ROS的富集從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡
        5.2.7 CNH-3 以ROS依賴的方式誘導(dǎo)線粒體介導(dǎo)的NCI-H460細(xì)胞凋亡
        5.2.8 CNH-3 以ROS依賴的方式誘導(dǎo)p38的磷酸化從而導(dǎo)致NCI-H460細(xì)胞自噬
        5.2.9 CNH-3 誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬并沒(méi)有作用于它所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
    5.3 小結(jié)
    5.4 材料與方法
        5.4.1 材料與試劑
        5.4.2 單羰基姜黃素類似物的合成及其譜圖數(shù)據(jù)
        5.4.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        5.4.4 化合物的細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià)
        5.4.5 化合物穩(wěn)定性評(píng)價(jià)
        5.4.6 化合物親電性評(píng)價(jià)
        5.4.7 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        5.4.8 測(cè)定胞內(nèi)ROS的含量
        5.4.9 蛋白印跡法測(cè)定胞內(nèi)蛋白的表達(dá)水平
        5.4.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    參考文獻(xiàn)
第六章 通過(guò)促氧化策略設(shè)計(jì)姜黃素導(dǎo)向的細(xì)胞周期阻滯試劑
    6.1 引言
    6.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        6.2.1 單羰基姜黃素類似物的合成
        6.2.2 單羰基姜黃素類似物對(duì)NCI-H460細(xì)胞毒性的評(píng)價(jià)
        6.2.3 CP-5 穩(wěn)定性的提高貢獻(xiàn)于它的細(xì)胞毒性
        6.2.4 CP-5 以Michael受體單元依賴的方式誘導(dǎo)NCI-H460細(xì)胞內(nèi)ROS的富集
        6.2.5 CP-5 憑借其Michael受體單元促進(jìn)胞內(nèi)ROS的富集，從而誘導(dǎo)NCI-H460細(xì)胞G2/M周期阻滯
        6.2.6 CP-5 在NCI-H460細(xì)胞中對(duì)有關(guān)G2/M期蛋白的調(diào)控
    6.3 討論
    6.4 小結(jié)
    6.5 材料與方法
        6.5.1 材料與試劑
        6.5.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        6.5.3 化合物的細(xì)胞毒活性評(píng)價(jià)
        6.5.4 化合物穩(wěn)定性測(cè)定
        6.5.5 化合物誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯的測(cè)定
        6.5.6 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        6.5.7 測(cè)定胞內(nèi)ROS的含量
        6.5.8 蛋白印跡法測(cè)定胞內(nèi)蛋白的表達(dá)水平
        6.5.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    參考文獻(xiàn)
第七章 全文總結(jié)
代表性化合物譜圖
化合物表征一覽表
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3871310