發(fā)布時間：2023-11-08 19:40

　　蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai)是一種藥食同源的大型真菌,口感良好營養(yǎng)豐富,多糖是其主要的活性物質(zhì)之一,具有十分重要的研究價值。本研究通過發(fā)酵液醇沉法提取蒙古口蘑菌絲體胞外多糖,酶法去蛋白、凝膠柱和離子交換柱分離純化蒙古口蘑胞外多糖,并結(jié)合UV-Vis、GPC、GC-MS、FTIR進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。確定了醇沉最佳工藝為:醇沉溫度8℃,醇沉?xí)r間36h,乙醇濃度85%;確定最佳去蛋白條件為:酶添加量0.31%,pH 7.0,49.0℃保溫1.40h。多糖保留率為80.81%,蛋白質(zhì)脫除率為80.52%。分離得到分子量分別為273816D、86656D的兩個蒙古口蘑胞外多糖組分TMMEP-1及TMMEP-2。并分析了TMMEP-2的單糖組成,TMMEP-2是由核糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖組成,其摩爾比為0.23:0.41:1.88:1.84:1.47:3.64。對其抗氧化性、降血糖活性及抑菌性進(jìn)行初步研究,得到如下結(jié)果:TMMEP-2具有較強(qiáng)的羥基自由基和DPPH自由基的清除能力,最大分別達(dá)到了71.02%和45.01%,而TMMEP-2的還原力不...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACTE
縮略詞表
一、緒論
    1.1 引言
    1.2 蒙古口蘑的研究進(jìn)展
        1.2.1 蒙古口蘑的形態(tài)特征與分布
        1.2.2 蒙古口蘑活性成分的研究
    1.3 多糖研究進(jìn)展
        1.3.1 多糖提取純化方法
        1.3.2 多糖的生物活性
        1.3.3 應(yīng)用領(lǐng)域
    1.4 本課題研究內(nèi)容和意義
二、材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 原輔材料
        2.1.2 酶制劑和標(biāo)準(zhǔn)品
        2.1.3 主要試劑及其他
        2.1.4 儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 多糖和蛋白含量的測定
        2.2.2 蒙古口蘑胞外多糖的制備
        2.2.3 蒙古口蘑胞外多糖提取工藝優(yōu)化
        2.2.4 中性蛋白酶去蛋白
        2.2.5 Sepharose CL-6B凝膠柱純化
        2.2.6 DEAE-Sepharose Fast Flow離子柱純化
        2.2.7 紫外光譜法測定純度
        2.2.8 分子量測定和單糖組成分析
        2.2.9 紅外色譜法
        2.2.10 抗氧化活性測定
        2.2.11 降血糖活性測定
        2.2.12 抑菌活性測定
三、結(jié)果與分析
    3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.1.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.1.2 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線
    3.2 蒙古口蘑胞外多糖提取工藝優(yōu)化結(jié)果
        3.2.1 醇沉單因素試驗結(jié)果
        3.2.2 醇沉響應(yīng)面工藝優(yōu)化
    3.3 中性蛋白酶去蛋白條件確定
        3.3.1 中性蛋白酶去蛋白單因素試驗結(jié)果
        3.3.2 中性蛋白酶去蛋白響應(yīng)面試驗結(jié)果
    3.4 凝膠層析純化結(jié)果
        3.4.1 Sepharose CL-6B凝膠柱純化結(jié)果
        3.4.2 DEAE-Sepharose Fast Flow離子柱純化結(jié)果
    3.5 紫外純度分析
    3.6 基本結(jié)構(gòu)分析
        3.6.1 GPC 分子量測定
        3.6.2 單糖組成分析
        3.6.3 紅外結(jié)果
    3.7 TMMEP-2 的抗氧化活性
        3.7.1 對·OH清除作用
        3.7.2 對DPPH·的清除作用
        3.7.3 還原力測定
        3.7.4 蒙古口蘑胞外多糖與Vc在0.16mg/mL時在不同體系中的活性比較
    3.8 TMMEP-2 降血糖活性
        3.8.1 對血糖的影響
        3.8.2糖耐量實驗
        3.8.3 對體重,臟器指數(shù)的影響
    3.9 TMMEP-2 抑菌活性
四、結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號：3861618