目的:研究異蓮心堿對人肝癌Hep G2細胞周期與凋亡的影響。方法:采取流式細胞術(shù)檢測不同濃度異蓮心堿誘導(dǎo)Hep G2細胞24 h后對周期的影響; Hoechst33258染色觀察異蓮心堿誘導(dǎo)Hep G2細胞凋亡后細胞核形態(tài)的變化; JC-1染色檢測細胞線粒體膜電位變化;蛋白免疫印記法(Western blot)檢測Bax、Bcl-2蛋白的表達量。結(jié)果:流式結(jié)果顯示,G0/G1期和G2/M期比例明顯升高,而S期比例明顯下降,并呈現(xiàn)劑量依賴性; Hoechst33258結(jié)果表明,藥物誘導(dǎo)Hep G2細胞后,細胞數(shù)量減少,形態(tài)皺縮或改變,藍色熒光加深; Western bolt檢測可知,異蓮心堿上調(diào)Bax蛋白并下調(diào)Bcl-2蛋白的表達水平。結(jié)論:異蓮心堿可使Hep G2細胞阻滯于G0/G1期、G2/M期,誘導(dǎo)Hep G2細胞發(fā)生早期凋亡,其作用可能與Bax、Bcl-2兩種凋亡蛋白表達水平變化相關(guān)。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 細胞分組
        1.2.3 細胞給藥
        1.2.4 PI/RNase單染檢測凋亡周期
        1.2.5 Hoechst33258染色觀察細胞凋亡形態(tài)
        1.2.6 線粒體膜電位檢測
        1.2.7 Western blot檢測Bax、Bcl-2的表達量
    1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果
    2.1 細胞周期檢測結(jié)果
    2.2 正置顯微鏡觀察細胞凋亡形態(tài)變化
    2.3 線粒體膜電位變化結(jié)果
    2.4 各組蛋白水平檢測結(jié)果
3 討論



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