實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過建立單側(cè)輸尿管梗阻(Unilateral ureteral obst ruction,UUO)誘導(dǎo)的大鼠腎纖維化動物模型,觀察六味地黃丸對大鼠腎臟自噬水平的影響,探討六味地黃丸治療腎纖維化的作用機(jī)制是否與調(diào)節(jié)腎臟自噬水平有關(guān)。實(shí)驗(yàn)方法:將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、UUO模型組、UUO模型+六味地黃丸組(3g/kg.d)、UUO模型+纈沙坦陽性對照組(30mg/kg.d),每組10只。通過游離并結(jié)扎離斷左側(cè)輸尿管建立UUO模型,假手術(shù)組只游離不結(jié)扎離斷左側(cè)輸尿管,于術(shù)后第二天開始給藥,分別給藥6周,假手術(shù)組和模型組每只每天給2ml生理鹽水。6周后處死大鼠,處死前一天收集24h尿液測24h尿蛋白定量。測量體重,用10%水合氯醛以0.35ml/100g的劑量腹腔麻醉成功后解剖大鼠胸腹部立即采集心臟動脈血和腎臟組織學(xué)標(biāo)本,用全自動生化分析儀檢測各組大鼠的肝功能、腎功能電解質(zhì)、24h尿蛋白定量等指標(biāo),通過HE染色和Masson染色觀察腎臟組織病理學(xué)變化,并進(jìn)行半定量評估腎間質(zhì)纖維化相對面積百分比;用Western blot蛋白質(zhì)印跡法檢測腎臟自噬標(biāo)志蛋白LC3和Becli...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
abstract
引言
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
第一部分 基礎(chǔ)理論研究
第二部分 動物實(shí)驗(yàn)研究
    1.材料與方法
        1.1 藥物、試劑和儀器
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥物
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)主要配制試劑
            1.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 實(shí)驗(yàn)動物
            1.2.2 動物建模步驟設(shè)計(jì)
            1.2.3 分組和給藥
            1.2.4 標(biāo)本采集
        1.3 檢測指標(biāo)和檢測方法
            1.3.1 生化指標(biāo)
            1.3.2 病理觀察
            1.3.3 自噬標(biāo)志蛋白檢測
            1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.結(jié)果與分析
        2.1 生活狀態(tài)及體態(tài)觀察
        2.2 體重變化
        2.3 腎臟形態(tài)變化
        2.4 生化指標(biāo)結(jié)果
            2.4.1 各組大鼠肝功能情況
            2.4.2 腎功能情況
            2.4.3 電解質(zhì)
            2.4.4 24 h尿蛋白定量
        2.5 腎臟病理變化
            2.5.1 HE染色
            2.5.2 Masson染色
            2.5.3 腎間質(zhì)纖維化半定量估
        2.6 腎臟自噬標(biāo)志蛋白LC3和Beclin1 水平的表達(dá)
            2.6.1 LC3 水平的檢測結(jié)果
            2.6.2 Beclin1 水平的檢測結(jié)果
    3.討論
        3.1 對腎纖維化模型選擇的認(rèn)識
        3.2 腎纖維化發(fā)生機(jī)制
            3.2.1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對腎纖維化發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識
            3.2.2 傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對腎纖維化發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識
        3.3 陽性對照組藥物選擇分析
        3.4 六味地黃丸對腎纖維化影響
        3.5 六味地黃丸與自噬的關(guān)系
        3.6 自噬與腎纖維化的關(guān)系
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
附錄 答辯委員會名單



本文編號：3854038