目的研究異甘草素對氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧損傷SH-SY5Y細胞的保護作用。方法細胞SH-SY5Y建立OGD/R損傷細胞模型。NC Nrf2-siRNA、siRNA-Nrf2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細胞,并培養(yǎng)48 h,20μmol/L異甘草素預(yù)處理2 h后構(gòu)建OGD/R損傷,24 h后繼續(xù)加入20μmol/L異甘草素再培養(yǎng)24 h。OGD/R損傷48 h后,測定細胞活力,LDH水平,caspase-3、caspase活性,ROS、MDA、SOD、GSH水平;RT-PCR檢測Bcl-2、Bax、NQO1、HO-1 mRNA表達;Western blot檢測HO-1蛋白表達。結(jié)果 OGD/R誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞活力降低,caspase-3、caspase活性升高,ROS、MDA水平升高,SOD、GSH-Px水平降低,Bcl-2、NQO1、HO-1 mRNA及HO-1蛋白表達降低,Bax mRNA表達增高(P<0.01);經(jīng)異甘草素干預(yù)后,OGD/R SY5Y細胞活力升高,caspase-3、caspase活性降低,ROS、MDA水平降低,SOD、GSH水平及Bcl-2、NQO1、HO-1...

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細胞株
    1.2 藥物與試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 Nrf2-siRNA轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細胞
    2.2 OGD/R模型及細胞分組
    2.3 MTT檢測細胞活力
    2.4 LDH檢測
    2.5 caspase-3、caspase9活性檢測
    2.6 細胞內(nèi)ROS檢測
    2.7 細胞內(nèi)MDA、SOD、GSH活性檢測
    2.8 RT-PCR檢測Bcl-2、Bax、NQO1、HO-1 mRNA表達
    2.9 Western blot檢測HO-1蛋白表達
    2.10 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 異甘草素對細胞活力的影響
    3.2 異甘草素對培養(yǎng)液中LDH水平及caspase-3、caspase-9活性的影響
    3.3 異甘草素對細胞內(nèi)ROS的影響
    3.4 異甘草素對細胞內(nèi)MDA、SOD、GSH水平的影響
    3.5 異甘草素對Bcl-2、Bax、NQO1、HO-1mRNA的表達
    3.6 異甘草素對HO-1蛋白表達的影響
4 討論



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