在我國(guó),隨著人們生活水平的極大提高,酒精類飲品的消耗量不斷遞增,酒精性肝病(ALD)的發(fā)生率也在逐年攀升。近年來(lái),酒精性肝病受到越來(lái)越多的關(guān)注,酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制也被廣泛研究,但酒精性肝病的治療手段并沒(méi)有突破性進(jìn)展,精確的發(fā)病機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。丹皮酚是從毛茛科植物牡丹的干燥根皮中提取出來(lái)的一種有效成分,學(xué)名是2’-羥基-4’-甲氧基苯乙酮,文獻(xiàn)報(bào)道其具有鎮(zhèn)痛、抗炎、解熱和抑制變態(tài)反應(yīng)等多種藥理活性。本論文分別以HepG2細(xì)胞和C57BL/6小鼠為體外和體內(nèi)模型探究丹皮酚對(duì)急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用及初步分子機(jī)制。本文研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:1.丹皮酚預(yù)處理對(duì)酒精誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。MTT試驗(yàn)結(jié)果顯示300 mM的酒精沒(méi)有明顯降低HepG2細(xì)胞的生存率,但后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,300 mM的酒精使HepG2細(xì)胞內(nèi)的ROS和炎癥因子水平明顯升高,這說(shuō)明300 mM的酒精雖然不能大量殺死HepG2細(xì)胞,但已經(jīng)破壞了細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡并引起炎癥反應(yīng)。丹皮酚(2、6、18 μM)預(yù)處理濃度依賴性抑制酒精引起的HepG2細(xì)胞內(nèi)的ROS和炎癥因子水平的提高。細(xì)胞形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)也表明丹皮酚...

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 酒精性肝病概況
        1.1.1 酒精性肝病流行病學(xué)現(xiàn)狀
        1.1.2 酒精性肝損傷機(jī)制
        1.1.3 酒精性肝病的治療
    1.2 丹皮酚的研究概況
        1.2.1 簡(jiǎn)介
        1.2.2 丹皮中有效成分
        1.2.3 丹皮的主要藥理活性
        1.2.4 丹皮酚的藥理活性分析
    1.3 研究目的和意義
2 丹皮酚對(duì)酒精誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞損傷的影響
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        2.3.1 細(xì)胞的復(fù)蘇
        2.3.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代
        2.3.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞生存率
        2.3.4 MTT法檢測(cè)丹皮酚對(duì)HepG2細(xì)胞生存率的影響
        2.3.5 MTT法檢測(cè)不同濃度酒精對(duì)HepG2細(xì)胞的影響
        2.3.6 DPPH法篩選丹皮酚的最佳抗氧化濃度
        2.3.7 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察丹皮酚對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用
        2.3.8 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平
        2.3.9 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)炎癥因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平
        2.3.10 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)NO水平
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 MTT法檢測(cè)丹皮酚對(duì)HepG2細(xì)胞生存率的影響
        2.4.2 MTT法檢測(cè)酒精對(duì)HepG2細(xì)胞生存率的影響
        2.4.3 丹皮酚總抗氧化能力檢測(cè)
        2.4.4 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察丹皮酚對(duì)HepG2細(xì)胞的保護(hù)作用
        2.4.5 丹皮酚對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)酒精誘導(dǎo)的ROS的影響
        2.4.6 丹皮酚對(duì)酒精誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞內(nèi)炎癥因子TNF-α、IL-6和IL-1β影響
        2.4.7 丹皮酚對(duì)酒精誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞NO水平的的影響
    2.5 本章小結(jié)
3 丹皮酚拮抗酒精誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞損傷的分子機(jī)制
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        3.3.1 Western blotting檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 丹皮酚對(duì)SIRT1/Nrf2信號(hào)通路的影響
        3.4.2 丹皮酚對(duì)SIRT1/NF-κB信號(hào)通路的影響
        3.4.3 丹皮酚對(duì)GSH/GSSG比率的影響
        3.4.4 丹皮酚對(duì)MDA水平的影響
    3.5 本章小結(jié)
4 丹皮酚對(duì)C57BL/6小鼠急性酒精肝損傷保護(hù)作用研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        4.3.1 小鼠急性酒精性肝損傷模型的建立
        4.3.2 小鼠樣本收集
        4.3.3 小鼠血清中ALT、AST、GSH和TNF-α水平檢測(cè)
        4.3.4 小鼠肝臟組織病理學(xué)分析
        4.3.5 小鼠肝臟勻漿中氧化還原與炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白檢測(cè)
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 丹皮酚對(duì)小鼠血清中ALT、AST、GSH和TNF-α水平的影響
        4.4.2 小鼠肝臟組織病理學(xué)觀察
        4.4.3 丹皮酚對(duì)小鼠肝臟勻漿中SIRT1、Nrf2和NF-κB蛋白的影響
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3849471