目的:本研究通過制備大腦中動(dòng)脈阻塞(Middle cerebral artery occlusions,MCAO)大鼠模型,研究栝樓桂枝湯(Gualou-Guizhi Decoction,GLGZD)對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用,并深入探究GLGZD是否通過調(diào)控蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(Proteinkinase R(PKR)-like ERkinase,PERK)/轉(zhuǎn)錄活化因子 4(Activating transcription factor 4,ATF4)信號(hào)通路以改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激進(jìn)而減輕腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞損傷,為腦卒中后神經(jīng)功能康復(fù)的臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。方法:(1)模型的建立、分組及給藥:采用線栓法制備大鼠MCAO大鼠模型,并進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,將評(píng)分為2～4分的大鼠隨機(jī)分為MCAO組、GLGZD低、中、高劑量組以及尼莫地平組,另設(shè)假手術(shù)組。各組大鼠于手術(shù)當(dāng)日給予相應(yīng)的藥物,1次/d,連續(xù)干預(yù)7d。(2)GLGZD對(duì)MCAO大鼠的治療作用:GLGZD干預(yù)7d后,采用longa神經(jīng)功能評(píng)分評(píng)價(jià)大鼠的神經(jīng)行為障礙;TTC染色法檢測大鼠腦梗死體積;HE染色法觀察大鼠缺血側(cè)大腦皮層神...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
引言
第一章 栝樓桂枝湯對(duì)腦缺血再灌注損傷模型大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 栝樓桂枝湯的制備
        2.2 大鼠腦缺血再灌注損傷模型的建立
        2.3 實(shí)驗(yàn)分組與給藥方法
        2.4 神經(jīng)功能評(píng)分
        2.5 TTC染色法
        2.6 組織石蠟切片的制作
        2.7 組織病理觀察(HE染色)
        2.8 細(xì)胞凋亡率檢測(Tunel法)
        2.9 實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 GLGZD對(duì)MCAO模型大鼠神經(jīng)功能評(píng)分的影響
        3.2 GLGZD對(duì)MCAO缺血再灌注損傷大鼠腦梗死體積的影響
        3.3 GLGZD對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠缺血側(cè)大腦皮層組織病理變化的影響
        3.4 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
第二章 栝樓桂枝湯對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激PERK/ATF4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 動(dòng)物組織取材
        2.2 實(shí)時(shí)熒光定量qRT-PCR模板DNA的制備及相應(yīng)指標(biāo)的定量檢測
        2.3 蛋白樣品的制備
        2.4 Western-Blot法測定PERK/ATF4相關(guān)蛋白的表達(dá)
        2.5 免疫組織化學(xué)法檢測IP3R蛋白表達(dá)水平
        2.6 免疫熒光法檢測GRP78蛋白表達(dá)水平
        2.7 熒光探針法檢測缺血皮層組織中Ca²⁺、ROS含量
        2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層GRP78 mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        3.2 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血皮層中PERK、eIF2α蛋白磷酸化水平的影響
        3.3 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血皮層中ATF4 mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        3.4 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血皮層中CHOP mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        3.5 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血皮層中Ero-1α mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        3.6 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層中Bcl-2 mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        3.7 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層中Bax mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
        3.8 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層中Caspase-3激活的影響
        3.9 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層中ROS和Ca²⁺含量的影響
        3.10 GLGZD對(duì)MCAO大鼠缺血側(cè)皮層中SERCA2α、IP3R mRNA和總蛋白表達(dá)的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號(hào)：3842150