發(fā)布時(shí)間：2023-08-10 20:56

　　目的:動(dòng)脈粥樣硬化(As)作為冠心病、腦中風(fēng)等多種缺血性心腦血管疾病的主要病理基礎(chǔ),控制其發(fā)生、發(fā)展是防治這些心腦血管疾病的根本性戰(zhàn)略措施。目前研究表明,As是一種慢性血管炎癥,血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷是As發(fā)生的關(guān)鍵因素。內(nèi)皮細(xì)胞損傷后會(huì)產(chǎn)生大量的炎癥因子,進(jìn)而促進(jìn)單核細(xì)胞黏附、聚集和激活,啟動(dòng)As的發(fā)生。白花前胡甲素(Pd-Ia)是一種鈣通道阻滯劑和鉀通道開放劑。研究表明,Pd-Ia可以改善急性缺血再灌注心肌中的炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARα)是核受體超家族成員之一,其可通過抑制NF-κB和AP-1信號(hào)通路而發(fā)揮抗炎作用。我們的前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Pd-Ia能夠抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)的炎癥反應(yīng)。本課題主要探究Pd-Ia是否通過PPARα通路抑制LPS誘導(dǎo)的HUVECs的炎癥反應(yīng)。方法:體外培養(yǎng)HUVECs,給予LPS(1μg/mL)和不同濃度的Pd-Ia(10,20,40μM/L),應(yīng)用 Real-time PCR 檢測(cè) Pd-Ia 對(duì) Icam、Vcam、E-selectin、MCP-1、MCP-2表達(dá)的影響;應(yīng)用免疫熒光、W...

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 動(dòng)脈粥樣硬化
        1.1.1 急性滲出性炎癥
        1.1.2 慢性增生性炎癥
    1.2 白花前胡甲素(Pd-Ia)
        1.2.1 Pd-Ia簡(jiǎn)介
        1.2.2 Pd-Ia研究進(jìn)展
    1.3 PPARs
        1.3.1 PPARs簡(jiǎn)介
        1.3.2 PPARα
    1.4 與PPAR-α相關(guān)的信號(hào)通路
        1.4.1 NF-κB信號(hào)通路
        1.4.2 AP-1信號(hào)通路
        1.4.3 cAMP-PKA信號(hào)通路
        1.4.4 MAPK信號(hào)通路
    1.5 立題依據(jù)
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)器材
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 主要溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的提取
        2.2.2 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
        2.2.3 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凍存
        2.2.4 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的復(fù)蘇
        2.2.5 RNA的提取
        2.2.6 RNA濃度的測(cè)定及逆轉(zhuǎn)錄
        2.2.7 Real time PCR
        2.2.8 RT-PCR
        2.2.9 ELISA
        2.2.10 蛋白提取及濃度檢測(cè)(BCA法)
        2.2.11 蛋白免疫印跡(Western Blot)
        2.2.12 免疫熒光
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 Pd-Ia對(duì)炎癥相關(guān)因子表達(dá)的影響
    3.2 Pd-Ia對(duì)PPARα的影響
        3.2.1 Pd-Ia對(duì)PPARα分布的影響
        3.2.2 Pd-Ia對(duì)PPARα表達(dá)的影響
    3.3 Pd-Ia通過PPARα通路調(diào)節(jié)NF-κB活性
        3.3.1 Pd-Ia對(duì)NF-κB分布和表達(dá)的影響
        3.3.2 干擾PPARα基因后,Pd-Ia對(duì)IκBα表達(dá)的影響
        3.3.3 阻斷PPARα后,Pd-Ia對(duì)NF-κB表達(dá)的影響
    3.4 Pd-Ia對(duì)AP-1信號(hào)通路的影響
        3.4.1 阻斷PPARα后,Pd-Ia對(duì)C-JUN表達(dá)的影響
    3.5 阻斷PKA后,Pd-Ia對(duì)PPARα、IL-6表達(dá)的影響
        3.5.1 阻斷PKA后,Pd-Ia對(duì)PPARα、IL-6表達(dá)的影響
    3.6 Pd-Ia對(duì)MAPK信號(hào)通路的影響
        3.6.1 Pd-Ia對(duì)P38信號(hào)通路的影響
        3.6.2 Pd-Ia對(duì)ERK信號(hào)通路的影響
        3.6.3 Pd-Ia對(duì)JNK信號(hào)通路的影響
        3.6.4 阻斷PPARα后,Pd-Ia對(duì)P38信號(hào)通路的影響
第四章 討論
結(jié)論
英文縮略語索引
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3841202