目的:動脈粥樣硬化(As)作為冠心病、腦中風等多種缺血性心腦血管疾病的主要病理基礎,控制其發(fā)生、發(fā)展是防治這些心腦血管疾病的根本性戰(zhàn)略措施。目前研究表明,As是一種慢性血管炎癥,血管內皮細胞損傷是As發(fā)生的關鍵因素。內皮細胞損傷后會產生大量的炎癥因子,進而促進單核細胞黏附、聚集和激活,啟動As的發(fā)生。白花前胡甲素(Pd-Ia)是一種鈣通道阻滯劑和鉀通道開放劑。研究表明,Pd-Ia可以改善急性缺血再灌注心肌中的炎癥反應和細胞凋亡。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARα)是核受體超家族成員之一,其可通過抑制NF-κB和AP-1信號通路而發(fā)揮抗炎作用。我們的前期實驗結果表明,Pd-Ia能夠抑制脂多糖(LPS)誘導的人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)的炎癥反應。本課題主要探究Pd-Ia是否通過PPARα通路抑制LPS誘導的HUVECs的炎癥反應。方法:體外培養(yǎng)HUVECs,給予LPS(1μg/mL)和不同濃度的Pd-Ia(10,20,40μM/L),應用 Real-time PCR 檢測 Pd-Ia 對 Icam、Vcam、E-selectin、MCP-1、MCP-2表達的影響;應用免疫熒光、W...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 動脈粥樣硬化
        1.1.1 急性滲出性炎癥
        1.1.2 慢性增生性炎癥
    1.2 白花前胡甲素(Pd-Ia)
        1.2.1 Pd-Ia簡介
        1.2.2 Pd-Ia研究進展
    1.3 PPARs
        1.3.1 PPARs簡介
        1.3.2 PPARα
    1.4 與PPAR-α相關的信號通路
        1.4.1 NF-κB信號通路
        1.4.2 AP-1信號通路
        1.4.3 cAMP-PKA信號通路
        1.4.4 MAPK信號通路
    1.5 立題依據
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗細胞
        2.1.2 實驗器材
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 主要溶液的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 人臍靜脈內皮細胞的提取
        2.2.2 人臍靜脈內皮細胞的傳代培養(yǎng)
        2.2.3 人臍靜脈內皮細胞的凍存
        2.2.4 人臍靜脈內皮細胞的復蘇
        2.2.5 RNA的提取
        2.2.6 RNA濃度的測定及逆轉錄
        2.2.7 Real time PCR
        2.2.8 RT-PCR
        2.2.9 ELISA
        2.2.10 蛋白提取及濃度檢測(BCA法)
        2.2.11 蛋白免疫印跡(Western Blot)
        2.2.12 免疫熒光
    2.3 數據統(tǒng)計分析
第三章 實驗結果
    3.1 Pd-Ia對炎癥相關因子表達的影響
    3.2 Pd-Ia對PPARα的影響
        3.2.1 Pd-Ia對PPARα分布的影響
        3.2.2 Pd-Ia對PPARα表達的影響
    3.3 Pd-Ia通過PPARα通路調節(jié)NF-κB活性
        3.3.1 Pd-Ia對NF-κB分布和表達的影響
        3.3.2 干擾PPARα基因后,Pd-Ia對IκBα表達的影響
        3.3.3 阻斷PPARα后,Pd-Ia對NF-κB表達的影響
    3.4 Pd-Ia對AP-1信號通路的影響
        3.4.1 阻斷PPARα后,Pd-Ia對C-JUN表達的影響
    3.5 阻斷PKA后,Pd-Ia對PPARα、IL-6表達的影響
        3.5.1 阻斷PKA后,Pd-Ia對PPARα、IL-6表達的影響
    3.6 Pd-Ia對MAPK信號通路的影響
        3.6.1 Pd-Ia對P38信號通路的影響
        3.6.2 Pd-Ia對ERK信號通路的影響
        3.6.3 Pd-Ia對JNK信號通路的影響
        3.6.4 阻斷PPARα后,Pd-Ia對P38信號通路的影響
第四章 討論
結論
英文縮略語索引
參考文獻
致謝



本文編號：3841202