發(fā)布時間：2023-07-27 09:01

　　紅松籽油是從紅松種籽中提取的一種天然油脂,其中含有豐富的亞油酸,油酸和皮諾斂酸等不飽和脂肪酸,其生物活性極其豐富,其中的皮諾斂酸是松籽油中特有的18個碳的不飽和脂肪酸。本文首次研究了皮諾斂酸抑制油酸誘導HepG2細胞中脂質積累及其初步分子機制。此外左旋肉堿是從紅色肉類中提取出的一種類維生素,對減肥及脂肪的消耗有顯著的作用。為達到最佳的降脂效果,本論文研究了皮諾斂酸/左旋肉堿復配物的最佳降脂濃度配比。本文主要研究成果如下:1.皮諾斂酸具有抑制HepG2細胞脂質累積作用。MTT實驗結果表明0.5 mM油酸對HepG2及L02細胞的生存率沒有顯著的抑制作用,油紅O染色結果表明,0.5 mM油酸處理HepG2細胞24h時,細胞內產生大量的脂滴。因此,采用0.5mM油酸培養(yǎng)HepG2細胞24 h,成功誘導HepG2細胞成脂。MTT實驗表明皮諾斂酸處理HepG2及L02細胞12h時,其細胞生存率較高,40μM濃度以下的皮諾斂酸對HepG2及L02細胞均無顯著的抑制作用。皮諾斂酸(10、15、20、25 μM)預處理12 h后,HepG2細胞內脂滴量、甘油三酯和總膽固醇含量顯著降低(與模型組相比),...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 松籽的研究概況
        1.1.1 松籽簡介
        1.1.2 松籽油的有效成分
        1.1.3 松籽油主要的藥理活性
    1.2 皮諾斂酸的藥理活性
    1.3 肥胖
        1.3.1 肥胖的概述
        1.3.2 肥胖產生的原因
        1.3.3 肥胖相關疾病的危害
        1.3.4 預防及治療肥胖的措施
        1.3.5 天然產物對于減肥降脂的研究
    1.4 研究的目的和意義
2 皮諾斂酸對HepG2細胞脂質積累的抑制作用
    2.1 引言
    2.2 實驗儀器和材料
        2.2.1 細胞株
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 實驗材料
        2.2.4 主要溶液配制
        2.2.5 細胞培養(yǎng)用品的準備
    2.3 實驗方法與步驟
        2.3.1 細胞的復蘇
        2.3.2 細胞的培養(yǎng)與傳代
        2.3.3 MTT法檢測HepG2和L02細胞的存活率
        2.3.4 篩選油酸誘導HepG2細胞脂滴積累的最適濃度
        2.3.5 檢測皮諾斂酸處理后細胞內脂滴的含量
        2.3.6 檢測細胞內總膽固醇及甘油三酯的水平
        2.3.7 實驗數(shù)據(jù)分析
    2.4 實驗結果與討論
        2.4.1 皮諾斂酸對HepG2及L02細胞增殖的影響
        2.4.2 油酸對HepG2及L02細胞增殖的影響
        2.4.3 油酸誘導HepG2細胞脂滴積累條件的確定
        2.4.4 皮諾斂酸對HepG2細胞中脂滴積累的影響
        2.4.5 皮諾斂酸對細胞中總膽固醇及甘油三酯水平的影響
    2.5 本章小結
3 皮諾斂酸降低油酸誘導HepG2細胞脂質積累的分子機制
    3.1 引言
    3.2 實驗儀器和材料
        3.2.1 細胞株
        3.2.2 主要儀器
        3.2.3 實驗材料
        3.2.4 主要溶液配制
    3.3 實驗方法與步驟
        3.3.1 細胞內抗氧化因子含量的檢測
        3.3.2 細胞內MDA含量的檢測
        3.3.3 流式細胞儀檢測細胞內活性氧的水平
        3.3.4 Wester blot檢測細胞內氧化應激及脂質相關蛋白
        3.3.5 Wester blot檢測AMPK通路相關蛋白
        3.3.6 實驗數(shù)據(jù)分析
    3.4 實驗結果與討論
        3.4.1 皮諾斂酸預處理對細胞抗氧化因子含量的影響
        3.4.2 皮諾斂酸預處理對細胞MDA含量的影響
        3.4.3 皮諾斂酸預處理對細胞活性氧水平的影響
        3.4.4 皮諾斂酸預處理對細胞Nrf2和HO-1蛋白的影響
        3.4.5 皮諾斂酸預處理對細胞成脂蛋白的影響
        3.4.6 皮諾斂酸通過激活AMPK/SIRT1通路抑制細胞脂質的積累
    3.5 本章小結
4 皮諾斂酸/左旋肉堿復配物降脂活性評估
    4.1 引言
    4.2 實驗儀器和材料
        4.2.1 細胞株
        4.2.2 主要儀器
        4.2.3 實驗材料
        4.2.4 主要溶液配制
    4.3 實驗方法與步驟
        4.3.1 細胞的復蘇
        4.3.2 細胞的培養(yǎng)與傳代
        4.3.3 MTT法檢測HepG2細胞活性
        4.3.4 油紅O染色法檢測細胞內脂滴含量
        4.3.5 優(yōu)化皮諾斂酸/左旋肉復配物的最佳降脂濃度
        4.3.6 實驗數(shù)據(jù)分析
    4.4 實驗結果與討論
        4.4.1 皮諾斂酸及左旋肉堿對細胞活力的影響
        4.4.2 皮諾斂酸及左旋肉對細胞內脂滴積累的影響
        4.4.3 皮諾斂酸/左旋肉堿復配物最佳降脂濃度的確定
    4.5 本章小結
結論
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝



本文編號：3837723