發(fā)布時間：2023-05-21 22:24

　　近年來,胃病發(fā)病率逐年升高,而許多胃病都與胃黏膜損傷有關(guān)。大量或長期酗酒是引起胃腸道疾病的主要原因之一,因此,建立乙醇型胃黏膜損傷模型很有意義。植物多糖毒副作用小,具有保護胃黏膜的功效。白及多糖(BSP)是植物多糖的一種,已有研究表明,白及多糖對小鼠醋酸型和應(yīng)激型胃潰瘍具有良好的保護和治療作用,但對于乙醇型胃黏膜損傷模型的研究較少,其作用機制也有待進一步的研究。且BSP在細胞上的作用也未見報道。本實驗室前期已經(jīng)對白及資源現(xiàn)狀進行了分析,并對白及多糖的結(jié)構(gòu)做了鑒定。在此基礎(chǔ)上,本課題從體內(nèi)、體外兩方面建立乙醇型胃黏膜損傷模型,研究白及多糖對胃黏膜的保護作用,并對機制做進一步研究。本研究以期開發(fā)白及多糖作為保健性藥品,并在飲酒的人群中得以應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1.白及多糖的制取采用水提醇沉的方法提取白及粗多糖,經(jīng)過脫脂、反復(fù)凍融法除蛋白、透析得到白及粗多糖。進一步經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析、葡聚糖凝膠G-150柱層析分離純化,篩選超純水作為洗脫劑,得到分子量均一的中性多糖,苯酚-濃硫酸法檢測BSP含量為92.7%。2.BSP對乙醇誘導(dǎo)的人胃黏膜上皮細胞株(GES-1...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞匯表
第1章 緒論
    1.1 白及的研究概況
        1.1.1 白及簡介
        1.1.2 白及的化學(xué)成分
        1.1.3 白及的藥理作用
    1.2 白及多糖的研究進展
        1.2.1 白及多糖的提取
        1.2.2 白及多糖除雜
        1.2.3 白及多糖純化
        1.2.4 白及多糖的藥理作用
    1.3 胃黏膜損傷模型的建立
    1.4 胃黏膜損傷與氧化應(yīng)激
    1.5 多糖保護胃黏膜損傷的研究
    1.6 研究目的及意義
第2章 白及多糖的提取、分離及純化
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 材料
        2.1.2 試劑
        2.1.3 儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 白及多糖的提取
        2.2.2 白及粗多糖的分離、純化
        2.2.3 白及多糖含量測定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 白及粗多糖提取得率
        2.3.2 白及多糖柱層析純化結(jié)果
        2.3.3 白及多糖含量測定
    2.4 討論
第3章 白及多糖對乙醇誘導(dǎo)的人胃黏膜上皮細胞株(GES-1)的保護作用研究
    3.1 材料與試劑
        3.1.1 材料
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器
        3.1.4 試劑配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 乙醇對GES-1細胞損傷模型的建立
        3.2.2 白及多糖對GES-1細胞毒性的影響
        3.2.3 檢測白及多糖對GES-1細胞的增殖作用
        3.2.4 白及多糖對GES-1細胞保護作用的研究
        3.2.5 數(shù)據(jù)處理
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 乙醇對GES-1細胞損傷模型的建立
        3.3.2 LDH檢測BSP對細胞毒性的結(jié)果
        3.3.3 白及多糖對GES-1細胞增殖作用的影響
        3.3.4 白及多糖對細胞保護作用的研究
    3.4 討論
第4章 白及多糖對小鼠急性胃黏膜損傷的保護作用研究
    4.1 材料與試劑
        4.1.1 材料
        4.1.2 實驗動物
        4.1.3 試劑
        4.1.4 儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 乙醇型急性胃黏膜損傷模型的建立
        4.2.2 胃黏膜損傷指數(shù)的測定
        4.2.3 病理學(xué)檢查(胃組織H&E染色)
        4.2.4 BCA法測定樣本蛋白含量
        4.2.5 胃蛋白酶含量測定
        4.2.6 白及多糖對胃黏膜保護作用的抗氧化能力測定
        4.2.7 白及多糖對乙醇型胃黏膜損傷小鼠胃黏膜細胞凋亡的影響
        4.2.8 小鼠胃組織中PGC-1α、HO-1、Bcl-2、Bax、NF-κB mRNA的表達
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 白及多糖對小鼠乙醇性胃黏膜損傷保護作用的形態(tài)學(xué)觀察
        4.3.2 白及多糖對小鼠胃黏膜損傷指數(shù)的影響
        4.3.3 H&E染色結(jié)果
        4.3.4 胃黏膜蛋白含量測定結(jié)果
        4.3.5 胃蛋白酶含量測定結(jié)果
        4.3.6 氧化指標(biāo)測定
        4.3.7 Tunel染色測定胃黏膜細胞凋亡結(jié)果
        4.3.8 小鼠胃組織中PGC-1α、HO-1、Bcl-2、Bax、NF-κB mRNA的表達結(jié)果
    4.4 討論
第5章 實驗結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間研究成果



本文編號：3821536