目的:探究知母皂苷BⅡ(TBⅡ)對(duì)破骨細(xì)胞分化過(guò)程中核轉(zhuǎn)錄因子-κB受體活化因子配基(RANKL),RANK,原癌基因(C-FOS)基因表達(dá)量的影響。方法:利用分子對(duì)接軟件LeDock對(duì)TBⅡ分別與RANKL,RANK和C-FOS進(jìn)行分子對(duì)接打分。RAW264.7細(xì)給予可溶性RANKL(sRANKL)干預(yù),設(shè)立空白組,sRANKL組(模型組),淫羊藿苷(Ica)組,TBⅡ低劑量組(2μmol·L-1),TBⅡ中劑量組(4μmol·L-1),TBⅡ高劑量組(8μmol·L-1)。相應(yīng)試劑盒檢測(cè)破骨細(xì)胞分化的標(biāo)志性酶(TRAP),實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)檢測(cè)C-FOS,與其上游RANKL/RANK和下游活化T細(xì)胞核因子胞質(zhì)1型(NFATC1)表達(dá)量,以及骨保護(hù)素OPG的表達(dá)量。結(jié)果:分子對(duì)接打分結(jié)果分別為-11.86,-11.38,-12.34 kcal·mol-1,TBⅡ能夠與RANKL,RANK和C-FOS結(jié)合。與正常組比較,模型組TRAP含量顯著升高(P<0.01);與模型組比較,各給藥組顯著降低TRAP含量(P<0.01),且TBⅡ呈劑量...

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 單體和試劑
    1.2 細(xì)胞
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 分子對(duì)接
    2.2 主要試劑的配置
        2.2.1 sRANKL母液的配制
        2.2.2 MTT母液的配制
        2.2.3 TBⅡ母液的配制
        2.2.4 Ica母液的配制
    2.3實(shí)驗(yàn)細(xì)胞的分組與給藥
    2.4 MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞存活率
    2.5 RAW264.7細(xì)胞的抗酒石酸酸性磷酸酶含量的測(cè)定
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 分子對(duì)接結(jié)果
    3.2 sRANKL誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分化條件的確定
    3.3 對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖活性的影響
    3.4 對(duì)RAW264.7細(xì)胞TRAP水平的影響
    3.5 對(duì)RAW264.7細(xì)胞RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1,OPG mRNA表達(dá)的影響
4 討論



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