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基于斑馬魚(yú)模型的消癌平發(fā)育毒性和抗炎作用研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-17 21:15
  目的:1、比較消癌平及其單體通關(guān)藤皂苷G、H、I的胚胎發(fā)育毒性大小,闡述消癌平的胚胎發(fā)育毒性機(jī)制;2、評(píng)價(jià)消癌平的抗腫瘤活性和比較消癌平及其單體通關(guān)藤皂苷G、H、I的抗炎活性大小;3、通關(guān)藤皂苷H的毒/效的相關(guān)性分析。方法:1、發(fā)育毒性研究。(1)胚胎發(fā)育量-毒關(guān)系。將發(fā)育至受精后6小時(shí)(6 hours post fertilization,hpf)的野生型AB系斑馬魚(yú)胚胎,按照預(yù)實(shí)驗(yàn)設(shè)定不同暴露濃度,持續(xù)暴露120小時(shí),分別于暴露后24、48、72、96、120小時(shí)(hour post exposure,hpe)觀察并記錄死亡率和孵化率。消癌平和通關(guān)藤皂苷G、H、I均按照上述同樣方法處理。(2)消癌平發(fā)育毒性機(jī)制研究。消癌平暴露6 hpf的胚胎持續(xù)120小時(shí),進(jìn)行斑馬魚(yú)畸形率的統(tǒng)計(jì)、體長(zhǎng)測(cè)量、心率測(cè)定、形態(tài)評(píng)分和行為學(xué)檢測(cè),同樣時(shí)間點(diǎn)收集樣本用于病理切片觀察心臟、肝臟的變化,透射掃描電鏡觀察心肌纖維和心肌細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的變化,實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time Quantitative PCR,RT-PCR)檢測(cè)氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、凋亡和wnt/β-cetanin通路相關(guān)基因...

【文章頁(yè)數(shù)】:93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 消癌平和通關(guān)藤皂苷G、H和I的發(fā)育毒性研究
    第一節(jié) 消癌平和通關(guān)藤皂苷G、H和I對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的發(fā)育毒性研究
        1 材料與方法
            1.1 材料與設(shè)備
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 通關(guān)藤皂苷G、H、I的含量測(cè)定結(jié)果
            2.2 消癌平暴露后對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育毒性的影響
            2.3 通關(guān)藤皂苷G的對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育毒性的影響
            2.4 通關(guān)藤皂苷H對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育毒性的影響
            2.5 通關(guān)藤皂苷I對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育毒性的影響
        3 討論
        4 結(jié)論
    第二節(jié) 消癌平對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的發(fā)育毒性作用機(jī)制研究
        1 材料與方法
            1.1 材料與設(shè)備
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 消癌平連續(xù)暴露120h后對(duì)斑馬魚(yú)發(fā)育的影響
            2.2 消癌平連續(xù)暴露120h后對(duì)斑馬魚(yú)行為學(xué)的影響
            2.3 消癌平連續(xù)暴露120h后對(duì)斑馬魚(yú)體內(nèi)ROS的含量檢測(cè)
            2.4 消癌平連續(xù)暴露120h后對(duì)斑馬魚(yú)體內(nèi)MDA、CAT、GSH和T-SOD的檢測(cè)
            2.5 從組織病理切片角度考察消癌平對(duì)斑馬魚(yú)不同器官的毒性
            2.6 消癌平連續(xù)暴露120h后對(duì)斑馬魚(yú)產(chǎn)生的心臟毒性
            2.7 消癌平連續(xù)暴露120h后對(duì)斑馬魚(yú)發(fā)育毒性相關(guān)基因表達(dá)的影響
                2.7.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因的變化
                2.7.2 氧化應(yīng)激相關(guān)基因的變化
                2.7.3 凋亡相關(guān)基因的變化
                2.7.4 wnt通路相關(guān)基因的變化
        3 討論
        4 結(jié)論
第二章 消癌平和通關(guān)藤皂苷G、H、I的抗炎作用研究
    1 材料與方法
        1.1 材料與設(shè)備
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 染色前后MDA-MB-231細(xì)胞形態(tài)圖
        2.2 注射腫瘤細(xì)胞后48小時(shí)的斑馬魚(yú)形態(tài)
        2.3 消癌平抑制斑馬魚(yú)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞遷移
        2.4 消癌平和通關(guān)藤皂苷G、H、I的抗炎活性評(píng)價(jià)
    3 討論
    4 結(jié)論
第三章 通關(guān)藤皂苷H的毒/效相關(guān)性研究
    1 材料與方法
        1.1 材料與設(shè)備
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 TH對(duì)正常生理狀態(tài)下斑馬魚(yú)幼魚(yú)的發(fā)育影響
        2.2 TH對(duì)LPS誘導(dǎo)的炎癥狀態(tài)下斑馬魚(yú)幼魚(yú)的發(fā)育影響
        2.3 TH的毒效相關(guān)性
        2.4 TH的抗炎效應(yīng)
        2.5 TH對(duì)抗炎相關(guān)基因的表達(dá)影響
    3 討論
    4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
展望
全文創(chuàng)新點(diǎn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):3818016

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