目的:辣椒素(Cap)是從辣椒植物中提取,具有刺激性氣味的生物堿。近來研究已報道了心血管疾病中辣椒素的保護(hù)作用。線粒體被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡的控制中心,在凋亡信號通路中起著非常重要的作用。14-3-3η可能作為心肌細(xì)胞I/R損傷的保護(hù)因子,參與穩(wěn)定線粒體膜電位,防止線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mPTP)的開放,從而最終減少細(xì)胞凋亡。本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建細(xì)胞水平的A/R模型,旨在確定辣椒素預(yù)處理對抗A/R損傷保護(hù)心肌細(xì)胞的作用是否涉及線粒體凋亡通路,并進(jìn)一步探討辣椒素保護(hù)心肌細(xì)胞的可能機(jī)制。方法:在本研究采用H9c2心肌細(xì)胞株,建立急性心肌A/R損傷模型,將狀態(tài)良好的H9c2心肌細(xì)胞隨機(jī)分為6組:(1)正常對照組(Control);(2)缺氧/復(fù)氧組(A/R);(3)10μM辣椒素預(yù)處理組(Cap+A/R);(4)10μM辣椒素+AD-14-3-3ηRNAi預(yù)處理組(Cap+AD-14-3-3ηRNAi+A/R);(5)10μM辣椒素+ADscrRNAi預(yù)處理組(Cap+ADscrRNAi+A/R);(6)10μM辣椒素+2μM ABT-737預(yù)處理組(Cap+ABT-737+A/R)。MTS比色法檢測細(xì)胞存活...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫及全稱和中文對照表
第1章引言
第2章 材料與方法
    2.1 主要材料及試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 重組腺病毒表達(dá)載體
        2.3.2 H9c2心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3.3 腺病毒感染H9c2細(xì)胞
        2.3.4 H9c2心肌細(xì)胞體外缺氧復(fù)氧（A/R）損傷模型的構(gòu)建
        2.3.5 實(shí)驗(yàn)分組及處理
        2.3.6 MTS法檢測H9c2心肌細(xì)胞存活率
        2.3.7 測定乳酸脫氫酶（LDH）的活性
        2.3.8 Western blotting（免疫印跡）法檢測H9c2心肌細(xì)胞中蛋白的表達(dá)
        3.9 檢測線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP）的開放程度
        2.3.10 測定Caspase-3 的活力
        2.3.12 Annexin V-FITC和PI雙染色法檢測H9c2心肌細(xì)胞凋亡的程度
    2.4 數(shù)據(jù)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞存活率和乳酸脫氫酶的影響
    3.2 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后的 1433η 蛋白表達(dá)的影響20
    3.3 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后的細(xì)胞活性氧ROS水平的影響
    3.4 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后的mPTP開放的影響
    3.5 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后Caspase-3 活力的影響
    3.6 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞凋亡水平的影響
    3.7 辣椒素預(yù)處理對H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后Bcl-2 和Bax蛋白表達(dá)的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3817007