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復(fù)方鷓鴣口服液的制備工藝及其抗缺血性神經(jīng)損傷的分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-14 01:42
  目的:腦缺血神經(jīng)損傷發(fā)病率高,嚴(yán)重者可致死亡,嚴(yán)重威脅人類健康。目前臨床缺乏理想的治療手段和藥物,相關(guān)創(chuàng)新藥物研究有重要意義。黎族傳統(tǒng)民族藥鷓鴣方由四味黎族藥材組成,具有健腦促智、清熱解毒之功效,在海南黎族地區(qū)有著悠久的應(yīng)用歷史。以往研究顯示,鷓鴣方具有神經(jīng)保護(hù)和促進(jìn)腦損傷后神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell,NSCs)增殖的作用,具有良好的應(yīng)用前景,但相關(guān)研究尚不充分。本課題利用現(xiàn)代技術(shù)將黎族傳統(tǒng)小復(fù)方研制成服用方便、質(zhì)量可控的口服液,并闡明其藥理作用。課題一方面有助于傳統(tǒng)民族藥物的傳承和發(fā)展,另一方面有助于提高傳統(tǒng)民族藥的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)價(jià)值。本研究旨在將傳統(tǒng)民族藥鷓鴣方制備成復(fù)方鷓鴣口服液,并解決口服液的澄清問題,初步建立復(fù)方鷓鴣口服液質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。建立體內(nèi)和體外模型系統(tǒng)研究民族藥復(fù)方鷓鴣口服液抗缺血性神經(jīng)損傷的藥理作用及分子機(jī)制。方法:1.復(fù)方鷓鴣口服液制備工藝研究。根據(jù)其有效成分的理化性質(zhì)及鷓鴣方的傳統(tǒng)用法,用純化水對(duì)鷓鴣葉等4味藥材進(jìn)行煎煮,考察加純化水體積、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)對(duì)主要活性成分含量的影響,根據(jù)企業(yè)生產(chǎn)成本和活性成分含量等確定最佳提取工藝。2.為了解決口...

【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
中英文縮略詞表
第一章 前言
    第一節(jié) 缺血性神經(jīng)損傷的治療研究現(xiàn)狀
        一、缺血性神經(jīng)損傷概述
        二、缺血性神經(jīng)損傷的治療策略
    第二節(jié) 神經(jīng)干細(xì)胞增殖的Wnt/β-atenin信號(hào)通路
        一、Wnt/β-catenin信號(hào)通路的組成及功能概述
        二、Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)NSCs增殖的調(diào)控作用
    第三節(jié) 復(fù)方鷓鴣口服液的現(xiàn)代研究
第二章 復(fù)方鷓鴣口服液的制備及澄清工藝研究
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)條件
        一、實(shí)驗(yàn)儀器
        二、實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        一、提取工藝研究
        二、澄清工藝研究
    第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、提取工藝研究
        二、澄清工藝研究
    第四節(jié) 總結(jié)與討論
第三章 復(fù)方鷓鴣口服液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究
    第一節(jié) 研究條件
        一、實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        二、藥品與試劑
    第二節(jié) 方法與結(jié)果
        一、復(fù)方鷓鴣口服液HPLC指紋圖譜的建立
        二、有效成分的含量測(cè)定
    第三節(jié) 總結(jié)與討論
第四章 在整體水平研究復(fù)方鷓鴣口服液抗缺血性神經(jīng)損傷的作用
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        二、藥品與試劑
        三、主要儀器設(shè)備
        四、溶液的配制
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        一、KM小鼠腦缺血再灌注動(dòng)物模型的建立
        二、分組和給藥
        三、行為學(xué)研究方法
        四、腦組織病理學(xué)研究方法
        五、免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)Nestin蛋白的含量
    第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、復(fù)方鷓鴣口服液對(duì)小鼠行為學(xué)功能的影響
        二、復(fù)方鷓鴣口服液對(duì)腦缺血再灌注小鼠腦組織病理形態(tài)的影響
        三、復(fù)方鷓鴣口服液對(duì)缺血性神經(jīng)損傷小鼠腦組織Nestin蛋白含量的影響
    第四節(jié) 總結(jié)與討論
第五章 細(xì)胞水平研究復(fù)方鷓鴣口服液促進(jìn)NSCs增殖的作用機(jī)制
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        一、材料與試劑
        二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備與器材
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        一、C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)
        二、C17.2神經(jīng)干細(xì)胞鑒定
        三、利用C17.2神經(jīng)干細(xì)胞復(fù)制氧糖剝奪復(fù)供(OGD/R)模型
        四、分組和給藥
        五、CCK-8法檢測(cè)C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的增殖能力
        六、Western Blot技術(shù)檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路中關(guān)鍵靶蛋白的含量變化
    第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察與鑒定結(jié)果
        二、復(fù)方鷓鴣口服液對(duì)OGD/R損傷的保護(hù)作用研究
        三、C17.2細(xì)胞活力測(cè)定
        四、Western Blot技術(shù)檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路中靶蛋白的表達(dá)變化
    第四節(jié) 總結(jié)與討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
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