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牛至葉提取物的體外降糖活性及其作用機制研究

發(fā)布時間:2023-05-13 05:30
  糖尿病是一種全球性的慢性疾病,隨著生活水平的逐漸提高,糖尿病的發(fā)病率也逐漸上升。目前治療糖尿病的藥物,臨床上主要有雙胍類,磺酰脲類,α-糖苷酶抑制劑類等類型,但其均會產(chǎn)生一系列不良反應(yīng)。目前尚無根治糖尿病的藥物及方法,所以尋找低毒,高效的預(yù)防和治療糖尿病的功能性食品或藥物成為糖尿病研究的重要任務(wù)。牛至(Origanum vulgareL.)是一種藥食兩用的的傳統(tǒng)中藥,以全草入藥。傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論認(rèn)為其具有“清暑解表,利水消腫”的功效。牛至中化學(xué)成分主要有機酚酸、牛至苷類、黃酮、三萜與留醇等類代謝物,具有抗菌,抗氧化、抗黑色素沉積、抗癌等多種藥理作用。本論文在體外活性篩選的指導(dǎo)下,用高相液相色譜和飛行時間質(zhì)譜儀聯(lián)用(HPLC-ESI-QTOF-MS)分析比較鑒定了不同采收期牛至葉提取物中的生物活性和主要化學(xué)成分,并進一步在HepG2細胞和HepG2-GFP-CYP2E1(CYP2E1過表達的HepG2細胞,E47細胞)細胞模型上,深入探討了 10月份采收的牛至葉提取物的降糖活性及其作用機制,具體內(nèi)容主要包括以下3個方面:1.采摘不同采收期(4月份-10月份)的牛至葉,晾干,粉碎過篩。采用乙...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 糖尿病的概況
        1.1.1 糖尿病的流行及危害
        1.1.2 糖尿病的發(fā)病機制
        1.1.3 糖尿病藥物的研究現(xiàn)狀
    1.2 牛至的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 牛至的化學(xué)成分研究現(xiàn)狀
        1.2.2 牛至的藥理作用研究現(xiàn)狀
    1.3 本論文的研究意義,目的和內(nèi)容
        1.3.1 本論文的研究意義和目的
        1.3.2 本論文的研究內(nèi)容
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 細胞
        2.1.3 植物來源
    2.2 儀器設(shè)備
    2.3 溶液的配制
        2.3.1 DMEM培養(yǎng)基
        2.3.2 PBS溶液的配制
        2.3.3 細胞凍存液
        2.3.4 DEPC水的配制
        2.3.5 TAE電泳緩沖液
        2.3.6 過硫酸銨(APS)
        2.3.7 丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺
        2.3.8 SDS-PAGE電泳緩沖液
        2.3.9 電轉(zhuǎn)緩沖液
        2.3.10 TBS緩沖液
        2.3.11 TBST緩沖溶液
        2.3.12 封閉液
    2.4 實驗方法
        2.4.1 HepG2和E47細胞的培養(yǎng)
        2.4.2 牛至葉提取物的制備
        2.4.3 牛至葉提取物對細胞的增殖/毒性作用
        2.4.4 牛至葉提取物體外降糖活性研究
        2.4.5 牛至葉提取物體外抗氧化活性研究
        2.4.6 牛至葉提取物的主要成分分離與鑒定
        2.4.7 牛至葉提取物中總酚含量
        2.4.8 牛至葉提取物中總黃酮含量
        2.4.9 牛至葉提取物對氧化應(yīng)激損傷的保護作用
        2.4.10 雙熒光報告基因?qū)嶒?br>        2.4.11 總RNA的提取和qRT-PCR檢測
        2.4.12 總蛋白的提取及其檢測
        2.4.13 數(shù)理統(tǒng)計
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 不同采收期牛至葉提取物活性及其化學(xué)成分比較
        3.1.1 不同采收期牛至葉提取物的細胞增殖/毒性作用
        3.1.2 不同采收期牛至葉提取物的體外降糖活性
        3.1.3 不同采收期牛至葉提取物體外抗氧化活性比較
        3.1.4 不同采收期牛至葉提取物主要化學(xué)成分及其總酚和總黃酮含量比較
    3.2 牛至葉提取物降糖活性研究
        3.2.1 牛至葉提取物對葡萄糖攝取的影響
        3.2.2 牛至葉提取物對糖基化的影響
        3.2.3 牛至葉提取物保護氧化應(yīng)激損傷
    3.3 牛至葉提取物降糖作用機制研究
        3.3.1 牛至葉提取物對糖異生通路的影響
        3.3.2 牛至葉提取物對脂代謝通路的影響
        3.3.3 牛至葉提取物對氧化應(yīng)激通路的影響
第4章 討論
參考文獻
附錄
致謝



本文編號:3815401

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