目的探究紫草素對睪丸癌細胞I-10和精原細胞瘤TCAM-2死亡形式的影響,并從線粒體功能和糖酵解方面探討其可能機制。方法 I-10細胞組加入濃度分別為0μmol/L(對照組)、1.2、1.4、1.6μmol/L的紫草素,TCAM-2細胞組加入濃度分別為0μmol/L(對照組)、0.5、1、1.5μmol/L的紫草素,JC-1試劑盒和ROS試劑盒分別用來檢測線粒體膜電位和活性氧的變化;乳酸試劑盒檢測胞內(nèi)乳酸變化;MTT法檢測細胞增殖抑制;透射電鏡觀察細胞死亡形式;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡;Western blot法檢測線粒體通路相關凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3和自噬相關蛋白LC3B以及糖酵解相關蛋白PKM2、GLUT1、HK2的相對表達水平。結(jié)果 MTT結(jié)果表明,紫草素能夠隨時間和劑量依賴性的抑制I-10和TCAM-2細胞的增殖(P<0.05),I-10組24、48、72 h的IC₅₀值分別為1.8、1.36和1.16μmol/L,TCAM-2組24、48、72 h的IC₅₀值...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 實驗材料、試劑
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 JC-1染色檢測細胞線粒體膜電位差
    1.4 細胞內(nèi)ATP水平檢測
    1.5 活性氧（ROS）檢測
    1.6 乳酸的測定
    1.7 MTT測定
    1.8 透射電子顯微鏡觀察細胞死亡的方式
    1.9 Western blot法檢測蛋白表達水平
    1.1 0 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡
    1.1 1 統(tǒng)計分析方法
2 結(jié)果
    2.1 紫草素對I-10和TCAM-2細胞線粒體功能的影響
    2.2 紫草素對I-10和TCAM-2細胞糖酵解的影響
    2.3 紫草素對I-10和TCAM-2細胞增殖和凋亡的抑制作用
    2.4 紫草素誘導I-10和TCAM-2細胞增加自噬
3 討論



本文編號：3810001