1目的:1本實(shí)驗(yàn)通過體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),建立一種提取培養(yǎng)人脂肪來源干細(xì)胞(human adipose derived stem cells,hADSCs)的高效方法,在使細(xì)胞大量擴(kuò)增的同時(shí)保持其潛在的分化能力,為下一步實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定的hADSCs培養(yǎng)體系。2通過研究中藥單體川續(xù)斷皂苷Ⅵ(Asperosaponin Ⅵ,ASD)對(duì)h ADSCs增殖及向成骨細(xì)胞分化的影響,評(píng)價(jià)ASD在誘導(dǎo)hADSCs向成骨分化過程中的作用,探索ASD作為一種生長因子應(yīng)用于骨組織工程的可能性,同時(shí)為骨組織工程種子細(xì)胞的誘導(dǎo)劑的優(yōu)化選擇提供試驗(yàn)依據(jù)。2方法:1應(yīng)用酶消化加離心方法分離、培養(yǎng)hADSCs,并通過倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn);酶標(biāo)儀檢測各時(shí)段吸光度值并分析細(xì)胞生長曲線特點(diǎn);向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化并行茜素紅染色、油紅O染色,鑒定所獲得的細(xì)胞為hADSCs,作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的種子細(xì)胞。2把ASD溶解到含10%FBS L-DMEM培養(yǎng)基中,配制成10-4 mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L四個(gè)濃度組的細(xì)胞培養(yǎng)液,同時(shí)用成骨誘導(dǎo)液(即陽性對(duì)照組由0.1mol/L的β-...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
前言
    1 脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特點(diǎn)及在再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
    2 川續(xù)斷及川續(xù)斷皂苷Ⅵ的研究進(jìn)展
    3 中醫(yī)對(duì)骨生長的認(rèn)識(shí)
第一部分 人脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定
    1 研究目的
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 研究對(duì)象
        2.2 主要試劑
        2.3 主要儀器和設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 主要試劑的配制
        3.2 人脂肪干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        3.3 hADSCs的傳代
        3.4 細(xì)胞凍存
        3.5 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.6 檢測細(xì)胞活性
        3.7 hADSCs鑒定
    4 結(jié)果
        4.1 顯微鏡下hADSCs的形態(tài)觀察
        4.2 hADSCs的增殖曲線
        4.3 hADSCs分化能力的鑒定
    5 討論
    6 小結(jié)
第二部分 ASD對(duì)hADSCs增殖與成骨分化的影響
    1 研究目的
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 細(xì)胞來源
        2.2 主要儀器和試劑
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 主要試劑的配制
        3.2 觀察ASD對(duì)hADSCs增殖的影響
        3.3 觀察ASD對(duì)hADSCs向成骨細(xì)胞分化的影響
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 ASD及成骨誘導(dǎo)液對(duì)hADSCs細(xì)胞增殖的影響
        4.2 ASD對(duì)hADSCs向成骨細(xì)胞分化的影響
    5 討論
    6 小結(jié)
結(jié)論
問題與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡介
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致謝



本文編號(hào)：3808394