目的以caspase-1介導(dǎo)細(xì)胞焦亡為基礎(chǔ),篩查并探究中藥及單體有效成分治療糖尿病腎病(DN)的分子機(jī)制。方法利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(TCMSP)篩選靶向caspase-1的中藥以及活性單體成分,并通過GeneCards數(shù)據(jù)庫檢索單體成分潛在的作用基因靶點(diǎn),運(yùn)用Cytoscape構(gòu)建單體化合物-基因靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)圖。采用基因本體(GO)功能富集分析和京都基因與基因百科全書(KEGG)通路富集分析,預(yù)測中藥及其單體的分子作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)SD大鼠隨機(jī)分為對照組、糖尿病組(DM)和人參皂苷Rh2藥物治療組(Rh2)。DM組和Rh2組通過腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)(60 mg/kg)構(gòu)建DN大鼠,對照組注射等量生理鹽水。在造模成功后Rh2組大鼠給予Rh2(20 mg·kg^-1·d^-1)灌胃12周,對照組和DM組大鼠給予等量生理鹽水灌胃。HE染色觀察大鼠腎臟形態(tài);Western blot檢測焦亡標(biāo)志蛋白caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18表達(dá);試劑盒檢測大鼠血漿IL-1β、IL-18含量以及cathepsin B和cathepsin ...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物與試劑
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 方法
        1.2.1 中藥及單體成分篩選
        1.2.2 藥物基因靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
        1.2.3 單體成分-靶蛋白分子對接
        1.2.4 GO功能富集和KEGG通路富集分析
        1.2.5 糖尿病腎病大鼠模型建立及給藥處理
        1.2.6 大鼠相關(guān)指標(biāo)檢測
        1.2.7 HE染色
        1.2.8 ELISA實(shí)驗(yàn)
        1.2.9 酶活性檢測
        1.2.1 0 Western blot
        1.2.1 1 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 作用caspase-1蛋白的中藥及單體化合物
    2.2 人參皂苷Rh2作用靶點(diǎn)的生物信息學(xué)分析
    2.3 人參皂苷Rh2對DN腎臟損傷的影響
    2.4 人參皂苷Rh2對Caspase-1介導(dǎo)細(xì)胞焦亡的影響
    2.5 人參皂苷Rh2對DN溶酶體功能影響
3 討論



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