目的:神經(jīng)退行性疾病是危害中老年健康的主要疾病之一,其中最為常見為阿爾茲海默癥(Alzheimer’s disease,AD)和帕金森癥(Parkinson Disease,PD)。目前,臨床上治療神經(jīng)退行性疾病的藥物大多為化學(xué)藥,但化學(xué)藥毒副作用大容易引起并發(fā)癥。神經(jīng)細(xì)胞移植和補(bǔ)腎類中藥在治療神經(jīng)疾病中由于療效持久、毒副作用小,已經(jīng)成為近年來治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究的熱點(diǎn)。在細(xì)胞移植治療中,神經(jīng)祖細(xì)胞(Neural progenitor cells,NPCs)是常用來進(jìn)行移植的種子細(xì)胞,是一種具有自我更新能力和多種分化潛能的神經(jīng)細(xì)胞,但是從胚胎或神經(jīng)組織獲得的NPCs在臨床應(yīng)用中也存在細(xì)胞來源少、組織免疫排斥、倫理學(xué)等問題,因此通過體外誘導(dǎo)獲得高純度、高活性的NPCs是解決這一問題的關(guān)鍵。補(bǔ)腎中藥近年來在神經(jīng)系統(tǒng)性疾病的治療中也顯著成效,因此篩選具有神經(jīng)保護(hù)的中藥也是為神經(jīng)系統(tǒng)性疾病患者疾病治療研究提供理論依據(jù)。方法:本論文首先在體外將小鼠誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(Mice induced pluripotent stem cells,miPSCs)誘導(dǎo)分化為NPCs細(xì)胞,在分化過程中加入了維甲酸...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 綜述
    1.1 研究的背景和意義
    1.2 神經(jīng)祖細(xì)胞的研究概況
    1.3 神經(jīng)保護(hù)中藥研究概況
        1.3.1 遠(yuǎn)志
        1.3.2 鹿茸
        1.3.3 參遠(yuǎn)苷
        1.3.4 地黃
        1.3.5 淫羊藿
        1.3.6 梔子
    1.4 3D培養(yǎng)細(xì)胞的用途
        1.4.1 3D支架在細(xì)胞3D培養(yǎng)中的作用
        1.4.2 細(xì)胞外基質(zhì)在3D培養(yǎng)中的應(yīng)用
        1.4.3 水凝膠在3D培養(yǎng)中的應(yīng)用
    1.5 展望
2 體外誘導(dǎo)miPSCs向NPCs定向分化方法的建立
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
        2.2.2 主要儀器設(shè)備
        2.2.3 藥品與試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 miPSCs的培養(yǎng)
        2.3.2 miPSCs向NPCs定向誘導(dǎo)分化
        2.3.3 免疫熒光染色鑒定NPCs標(biāo)志物
        2.3.4 NPCs向OPCs定向分化及免疫熒光鑒定OPCs標(biāo)志物
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 miPSCs細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)
        2.4.2 NPCs細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)
        2.4.3 免疫熒光染色鑒定NPCs標(biāo)志物結(jié)果
        2.4.4 免疫熒光鑒定OPCs標(biāo)志物結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
3 中藥提取物對NPCs細(xì)胞損傷保護(hù)作用的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
        3.2.2 主要儀器設(shè)備
        3.2.3 藥品和試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 中藥提取物制備
        3.3.2 NPCs細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.3.3 中藥提取物對NPCs細(xì)胞增殖的影響
        3.3.4 中藥提取物對NPCs細(xì)胞皮質(zhì)酮(CORT)損傷的保護(hù)作用
        3.3.5 中藥提取物對NPCs細(xì)胞谷氨酸(Glu)損傷的保護(hù)作用
        3.3.6 免疫熒光染色鑒定中藥提取物對NPCs向OPCs分化的影響
    3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.5 結(jié)果
        3.5.1 中藥提取物對NPCs細(xì)胞增殖的影響
        3.5.2 中藥提取物對NPCs皮質(zhì)酮(CORT)損傷的保護(hù)作用
        3.5.3 中藥提取物對NPCs細(xì)胞谷氨酸(Glu)損傷的保護(hù)作用
        3.5.4 免疫熒光染色鑒定中藥提取物對NPCs向OPCs分化的影響
    3.6 本章小結(jié)
4 鹿茸多肽在3D條件下對NPCs細(xì)胞的保護(hù)作用
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
        4.2.2 主要儀器設(shè)備
        4.2.3 藥品和試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 小鼠腦細(xì)胞外基質(zhì)的制備及表征
        4.3.2 小鼠腦細(xì)胞外基質(zhì)溶液的制備
        4.3.3 水凝膠支架材料3D培養(yǎng)模型的建立
        4.3.4 3D條件下鹿茸多肽對NPCs細(xì)胞保護(hù)和分化的影響
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 小鼠腦細(xì)胞外基質(zhì)表征結(jié)果
        4.4.2 水凝膠支架材料3D培養(yǎng)的觀察結(jié)果
        4.4.3 細(xì)胞死活染色結(jié)果
        4.4.4 細(xì)胞增殖活性結(jié)果
        4.4.5 免疫熒光染色鑒定在3D條件下鹿茸多肽對NPCs分化的影響
    4.5 本章小結(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3783866