參麥注射液原料紅參炮制工藝優(yōu)化及體外活性研究
發(fā)布時間:2023-03-31 18:33
目的:建立一套穩(wěn)定的紅參炮制工藝,為參麥注射液提供優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的紅參原料。方法:1.紅參的炮制工藝研究(1)正交試驗法考察困參浸潤、蒸制時間、干燥溫度、干燥時間等因素,以困參浸潤效果、總皂苷含量為指標(biāo),確定紅參炮制工藝。(2)高效液相色譜法比較自制紅參和市售紅參Rg1、Re、Rb1單體皂苷的含量。(3)采用Bradford法比較紅參蛋白含量。2.參麥注射液原料藥紅參對心肌細(xì)胞氧化損傷的保護作用過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)H9c2大鼠心肌細(xì)胞建立體外心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型;MTT法檢測細(xì)胞存活率;試劑盒檢測細(xì)胞因子LDH釋放、SOD活性和MDA含量;流式細(xì)胞術(shù)檢測ROS、細(xì)胞凋亡;Western Blot法檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達。結(jié)果:1.紅參炮制工藝為困參3d,潤參20min,蒸制時間3h;烘干溫度60℃;烘干時間10h。2.炮制后的紅參與市售紅參對比,皂苷含量穩(wěn)定均一,且蛋白質(zhì)的含量相對較低。3.與Control組比較,H2O2能夠明顯降低細(xì)胞存活率,紅參有效成分預(yù)處理后,心肌細(xì)胞存活率顯著提高,減輕...
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
引言
文獻綜述
第一章 參麥注射液原料紅參炮制工藝研究
1 儀器與試劑
1.1 實驗藥材
1.2 實驗儀器
2 實驗方法
2.1 紅參加工前處理對外在質(zhì)量的影響研究
2.2 紫外分光光度計測總皂苷含量
2.3 紅參炮制方法的優(yōu)化
2.4 紅參理化性質(zhì)測定
2.5 高效液相法測單體皂苷含量
2.6 炮制紅參與市售紅參蛋白含量比較
3 實驗結(jié)果
3.1 紅參加工前處理對外在質(zhì)量的影響研究
3.2 人參總皂苷含量測定
3.3 紅參炮制工藝
3.4 紅參的水分、總灰分、水浸物、醇浸物含量測定
3.5 高效液相法比較紅參單體皂苷含量
3.6 炮制紅參與市售紅參蛋白含量比較
4 討論
5 小結(jié)
第二章 紅參的體外活性研究
1 儀器與試劑
1.1 實驗材料
1.2 實驗儀器
1.3 實驗試劑及配置
2 實驗方法
2.1 大鼠心肌細(xì)胞H9c2 的培養(yǎng)技術(shù)和方法
2.2 MTT法檢測細(xì)胞活力
2.3 試劑盒檢測LDH釋放
2.4 試劑盒檢測SOD活性
2.5 試劑盒檢測MDA含量
2.6 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)ROS
2.7 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的影響
2.8 Western Blot檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白
2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
3 實驗結(jié)果
3.1 建立H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞損傷模型
3.2 紅參對H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞損傷的影響
3.3 紅參總提物對H2O2誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞總SOD活性和MDA含量的影響
3.4 紅參總提物對H2O2誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞ROS水平的影響
3.5 紅參總提物對H2O2 誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞凋亡率的影響
3.6 紅參總提物H2O2誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白表達的影響
4 討論
5 小結(jié)
結(jié)論
本文創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
致謝
在學(xué)期間主要研究成果
個人簡介
本文編號:3775585
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
引言
文獻綜述
第一章 參麥注射液原料紅參炮制工藝研究
1 儀器與試劑
1.1 實驗藥材
1.2 實驗儀器
2 實驗方法
2.1 紅參加工前處理對外在質(zhì)量的影響研究
2.2 紫外分光光度計測總皂苷含量
2.3 紅參炮制方法的優(yōu)化
2.4 紅參理化性質(zhì)測定
2.5 高效液相法測單體皂苷含量
2.6 炮制紅參與市售紅參蛋白含量比較
3 實驗結(jié)果
3.1 紅參加工前處理對外在質(zhì)量的影響研究
3.2 人參總皂苷含量測定
3.3 紅參炮制工藝
3.4 紅參的水分、總灰分、水浸物、醇浸物含量測定
3.5 高效液相法比較紅參單體皂苷含量
3.6 炮制紅參與市售紅參蛋白含量比較
4 討論
5 小結(jié)
第二章 紅參的體外活性研究
1 儀器與試劑
1.1 實驗材料
1.2 實驗儀器
1.3 實驗試劑及配置
2 實驗方法
2.1 大鼠心肌細(xì)胞H9c2 的培養(yǎng)技術(shù)和方法
2.2 MTT法檢測細(xì)胞活力
2.3 試劑盒檢測LDH釋放
2.4 試劑盒檢測SOD活性
2.5 試劑盒檢測MDA含量
2.6 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)ROS
2.7 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的影響
2.8 Western Blot檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白
2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
3 實驗結(jié)果
3.1 建立H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞損傷模型
3.2 紅參對H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞損傷的影響
3.3 紅參總提物對H2O2誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞總SOD活性和MDA含量的影響
3.4 紅參總提物對H2O2誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞ROS水平的影響
3.5 紅參總提物對H2O2 誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞凋亡率的影響
3.6 紅參總提物H2O2誘導(dǎo)的H9c2 細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白表達的影響
4 討論
5 小結(jié)
結(jié)論
本文創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
致謝
在學(xué)期間主要研究成果
個人簡介
本文編號:3775585
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