葛根素抑制慢性腎臟病大鼠血管鈣化及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-26 14:17
研究背景:慢性腎臟病是嚴(yán)重危害人類生命健康的疾病之一。與普通人群相比,慢性腎臟病病人,發(fā)生血管鈣化的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加。血管鈣化會(huì)導(dǎo)致心臟肥大、心臟舒張功能異常和心力衰竭,最終顯著增加病人的心血管事件。血管鈣化機(jī)制復(fù)雜,其中血管炎癥極大地參與了血管鈣化的發(fā)生和發(fā)展。血管炎癥可以由NLRP3/Caspase1/IL-1β、NF-κB和反應(yīng)性活性氧(ROS)信號(hào)通路介導(dǎo)。葛根素具有顯著的抗炎、抗氧化、抗凋亡等心血管保護(hù)作用,并且能抑制小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的鈣化。但葛根素抑制血管鈣化的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)未見報(bào)道。研究目的:探索葛根素是否通過抗炎抑制慢性腎臟病大鼠的血管鈣化,及其相關(guān)的分子通路。研究方法:采用正常培養(yǎng)基培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(RVSMCs)作為對(duì)照組,用鈣化培養(yǎng)基構(gòu)建RVSMCs鈣化模型(鈣化組),用1、10和1OOμM葛根素進(jìn)行干預(yù)(葛根素組)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用慢性腎臟病大鼠模型(5/6腎切除+維生素D3灌胃+高鈣高磷飼料干預(yù)4周),隨機(jī)分為模型組和葛根素組(每組10只)。葛根素組予以葛根素400mg/kg體重灌胃,每天一次,持續(xù)4周。另取正常的大鼠作為假手術(shù)組(10只)。用茜素紅染色...
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
1.1 主要試劑、耗材、儀器和動(dòng)物
1.2 大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(RVSMCs)的培養(yǎng)與干預(yù)
1.3 構(gòu)建慢性腎臟病大鼠模型與葛根素干預(yù)
1.4 血管整體染色
1.5 血管石蠟切片及染色
1.6 RVSMCs茜素紅染色
1.7 RVSMCs鈣定量檢測(cè)
1.8 RVSMCs CCK-8檢測(cè)
1.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qPCR)
1.10 蛋白電泳(western blot)
1.11 ROS檢測(cè)
1.12 免疫熒光染色
1.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
2.1 RVSMCs鑒定
2.2 葛根素對(duì)RVSMCs鈣化的抑制作用
2.3 葛根素對(duì)慢性腎臟病大鼠血管鈣化的抑制作用
2.4 葛根素通過NLRP3/Caspasel/IL-1 β、NF-κB和ROS通路抑制血管炎癥
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞對(duì)照表
攻讀學(xué)位期間成果
致謝
本文編號(hào):3771118
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
1.1 主要試劑、耗材、儀器和動(dòng)物
1.2 大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(RVSMCs)的培養(yǎng)與干預(yù)
1.3 構(gòu)建慢性腎臟病大鼠模型與葛根素干預(yù)
1.4 血管整體染色
1.5 血管石蠟切片及染色
1.6 RVSMCs茜素紅染色
1.7 RVSMCs鈣定量檢測(cè)
1.8 RVSMCs CCK-8檢測(cè)
1.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qPCR)
1.10 蛋白電泳(western blot)
1.11 ROS檢測(cè)
1.12 免疫熒光染色
1.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
2.1 RVSMCs鑒定
2.2 葛根素對(duì)RVSMCs鈣化的抑制作用
2.3 葛根素對(duì)慢性腎臟病大鼠血管鈣化的抑制作用
2.4 葛根素通過NLRP3/Caspasel/IL-1 β、NF-κB和ROS通路抑制血管炎癥
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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攻讀學(xué)位期間成果
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