發(fā)布時(shí)間：2023-03-23 20:13

　　糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常見(jiàn)并發(fā)癥之一,是導(dǎo)致終末期腎病(end-stage renal disease,ESRD)的主要原因。其主要病理改變?yōu)槟I小球系膜細(xì)胞(Human mesangial cels,HMCs)的過(guò)度增殖、細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular martrixc,ECM)積聚和基底膜增厚。在高糖環(huán)境下,HMCs中細(xì)胞外基質(zhì)分泌增多而積聚于系膜區(qū),使腎小球發(fā)生一系列病理變化,最終導(dǎo)致腎小球硬化。胡蘆巴堿(Trigonelline,TRL)具有降血糖、降血脂、降低膽固醇和抗氧化等功效,但其對(duì)高糖狀態(tài)下的HMCs的作用機(jī)制尚不明確。目的:探討胡蘆巴堿對(duì)高糖誘導(dǎo)下HMCs增殖、凋亡及細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)的影響及Wnt/β-catenin信號(hào)通路的調(diào)控。方法:1.采用ELISA法和免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)FN、Col IV在HMCs中分泌及表達(dá)情況。2.采用MTT法檢測(cè)HMCs增殖情況;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期。3.采用RT-PCR和Western blot檢測(cè)Wnt/β-catenin通路相關(guān)因子Wnt5a、β-catenin、TCF4、Cy...

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 Wnt信號(hào)通路
        1.1.1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路的組成
        1.1.2 Wnt/β-catenin信號(hào)通路的調(diào)控作用
        1.1.3 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與疾病的關(guān)系
        1.1.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與細(xì)胞周期
        1.1.5 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與細(xì)胞凋亡
    1.2 胡蘆巴中有效成分防治糖尿病研究進(jìn)展
        1.2.1 胡蘆巴概述
        1.2.2 胡蘆巴抗糖尿病的有效成分及其作用機(jī)制
    1.3 HMCs與DN
        1.3.1 HMCs在DN發(fā)生、發(fā)展中的作用
        1.3.2 HMCs高糖條件體外模擬DN
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 藥品配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 HMCs的復(fù)蘇、培養(yǎng)及傳代
        2.2.2 MTT法檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下的HMCs增殖的影響
        2.2.3 ELISA檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)HMCs中FN、Col IV分泌情況的影響
        2.2.4 免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)HMCs中FN、Col IV表達(dá)情況
        2.2.5 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        2.2.6 RT-PCR法檢測(cè)Wnt/β -catenin通路相關(guān)基因表達(dá)水平
        2.2.7 Western Blot法檢測(cè)Wnt/β -catenin通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平
        2.2.8 流式細(xì)胞儀檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs細(xì)胞周期的影響
        2.2.9 流式細(xì)胞儀檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs凋亡的影響
        2.2.10 TUNEL法檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs凋亡的影響
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 MTT法檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs增殖的作用
    3.2 ELISA檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs FN、Col IV分泌水平的影響
    3.3 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs FN、Col IV分泌水平的影響
    3.4 胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs Wnt/β-catenin通路相關(guān)因子m RMA表達(dá)的影響
    3.5 胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs Wnt/β-catenin通路相關(guān)因子蛋白表達(dá)的影響
    3.6 胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs細(xì)胞周期的影響
    3.7 胡蘆巴堿對(duì)高糖引起的HMCs凋亡的抑制作用
    3.8 TUNEL檢測(cè)胡蘆巴堿對(duì)高糖下HMCs凋亡結(jié)果
第4章 討論
    4.1 胡蘆巴堿對(duì)HMCs增殖的影響
    4.2 胡蘆巴堿對(duì)HMCs分泌ECM能力的影響
    4.3 胡蘆巴堿高糖條件下HMCs中Wnt/β-catenin信號(hào)通路的調(diào)控
    4.4 胡蘆巴堿對(duì)HMCs凋亡的影響
第5章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3768672